羥基香豆素類化合物對青枯雷爾氏菌致病特性的調(diào)控作用研究
發(fā)布時間:2024-12-15 22:07
在病原菌與寄主互作過程中,病原菌通過改變寄主植物的次生代謝產(chǎn)物,富集營養(yǎng)物質(zhì),促進自身的生長與繁殖;同時植物響應(yīng)病原菌侵染,激活防衛(wèi)免疫反應(yīng),調(diào)控次生代謝產(chǎn)物合成,產(chǎn)生具有抑菌活性的小分子化合物,抵御病原菌侵染。因此,植物次生代謝產(chǎn)物在病原菌侵染寄主植物過程中發(fā)揮著重要作用。香豆素類化合物作為一種含有苯駢α-吡喃酮母核的次生代謝產(chǎn)物,廣泛存在于植物中,具有多種生物活性。植物通過分泌香豆素類化合物,調(diào)節(jié)根際土壤微生物組成,顯著影響植物的健康;同時植物響應(yīng)病原菌侵染,在根部和葉部侵染部位聚集香豆素類化合物,抑制病原菌生長。香豆素類化合物被證實在調(diào)控病原菌致病特性、植物健康等方面發(fā)揮重要作用。因此,明確特定香豆素類化合物對植物病原菌的致病特性的調(diào)控作用,有利于植物病害防控技術(shù)研發(fā)。青枯病是由青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一種重要的土傳細(xì)菌性病害,能夠侵染54個科,250余種植物,包括煙草、番茄、辣椒等多種經(jīng)濟/蔬菜作物,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失;瘜W(xué)防治收效甚微,容易引起環(huán)境問題;生防菌劑開發(fā)和應(yīng)用面臨藥效慢、穩(wěn)定性差等難題。目前,已有大量研究報道了香豆素類化合物...
【文章頁數(shù)】:186 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
1 香豆素類化合物對植物與病原菌互作的調(diào)控作用
1.1 香豆素類化合物
1.2 香豆素類化合物對葉際病原微生物與植物互作的影響
1.3 香豆素類化合物對根際病原微生物與植物互作的調(diào)控作用
2 青枯雷爾氏菌及其致病機制
2.1 青枯雷爾氏菌
2.2 侵染循環(huán)
2.3 致病特性
2.4 青枯病的化學(xué)防治技術(shù)
3 植物次生代謝產(chǎn)物對青枯菌與植物互作的調(diào)控作用
3.1 促進病原菌生長作用
3.2 化學(xué)引誘作用
3.3 植物化學(xué)防御作用
4 本研究的目的與意義
4.1 研究目的
4.2 研究內(nèi)容
4.3 技術(shù)路線
第二章 香豆素類化合物對青枯雷爾氏菌的抑菌活性及定量構(gòu)效關(guān)系研究
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 香豆素類化合物對青枯菌的抑菌活性評價
1.6 香豆素類化合物理化參數(shù)獲取
1.7 定量構(gòu)效關(guān)系(2D-QSAR)模型建立
1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 香豆素類化合物對青枯雷爾氏菌的抑菌活性分析
2.2 官能團對香豆素類化合物抑菌活性的影響
2.3 香豆素類化合物抑菌活性的定量構(gòu)效關(guān)系模型構(gòu)建
3 討論
4 小結(jié)
第三章 羥基香豆素類化合物(Hycs)對青枯雷爾氏菌的生物活性及侵染特性的影響
第一節(jié) Hycs對青枯雷爾氏菌的生物活性及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 Hycs對青枯雷爾氏菌生長曲線測定
1.6 Hycs對青枯雷爾氏菌存活率的影響
1.7 Hycs對青枯雷爾氏菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響
1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Hycs對青枯雷爾氏菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度
2.2 Hycs對青枯雷爾氏菌生長曲線的影響
2.3 Hycs對青枯雷爾氏菌存活率的影響
2.4 Hycs對青枯雷爾氏菌細(xì)胞形態(tài)的影響
3 討論
4 小結(jié)
第二節(jié) Hycs對青枯雷爾氏菌侵染特性的影響
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 Hycs對青枯雷爾氏菌生物膜形成的影響
1.6 FITC-ConA染色測定青枯雷爾氏菌生物膜
1.7 Hycs對青枯雷爾氏菌運動性的影響
1.8 Hycs對青枯雷爾氏菌胞外多糖含量的影響
1.9 香豆素類化合物對青枯雷爾氏菌Ⅲ效應(yīng)基因RipX酶活的影響
1.10 Hycs對青枯菌主要致病因子相關(guān)基因表達量的影響
1.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Hycs對青枯雷爾氏菌生物膜形成的影響
2.2 Hycs對青枯雷爾氏菌運動性的影響
2.3 Hycs對青枯雷爾氏菌胞外多糖的影響
2.4 Hycs對青枯菌RipX表達的影響
2.5 Hycs對青枯雷爾氏菌致病相關(guān)基因的影響
3 討論
4 小結(jié)
第四章 青枯雷爾氏菌響應(yīng)羥基香豆素類化合物(Hycs)脅迫的應(yīng)激機制研究
第一節(jié) 青枯雷爾氏菌響應(yīng)Hycs脅迫的轉(zhuǎn)錄組分析
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 Hycs脅迫下青枯菌RNA的提取
1.6 Hycs脅迫下青枯雷爾氏菌原核鏈特異性轉(zhuǎn)錄組測序及數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Hycs脅迫下青枯雷爾氏菌RNA質(zhì)量檢測
2.2 Hycs脅迫下青枯雷爾氏菌轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)概況
2.3 Hycs脅迫青枯雷爾氏菌的差異表達基因
2.4 不同處理青枯菌差異基因的Venn分析
2.5 差異基因的GO富集和KEGG分析
2.6 Hycs對青枯菌生長抑制相關(guān)基因表達的影響
2.7 Hycs對青枯菌致病相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達的影響
3 討論
4 小結(jié)
第二節(jié) Hycs調(diào)控青枯菌脂多糖合成基因lpxB的作用機理
1 材料與方法
1.1 供試菌株、質(zhì)粒及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 青枯菌lpxB缺失突變菌株構(gòu)建
1.6 青枯菌lpxB基因功能測定
1.7 lpxB基因缺失對青枯菌致病力的影響
1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Hycs對青枯菌脂多糖合成相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達的影響
2.2 lpxB缺失型突變對青枯菌生長情況的影響
2.3 lpxB缺失型突變對青枯菌致病因子的影響
2.4 lpxB缺失型突變菌株對煙草致病力的影響
3 討論
4 小結(jié)
第五章 傘形花內(nèi)酯和瑞香素對青枯菌致病因子的調(diào)控作用研究
第一節(jié) 傘形花內(nèi)酯對青枯雷爾氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)的調(diào)控作用研究
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 傘形花內(nèi)酯對青枯菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控作用研究
1.6 青枯菌致病力測定實驗
1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 傘形花內(nèi)酯對青枯菌Ⅲ型效應(yīng)蛋白編碼基因ripX轉(zhuǎn)錄表達的影響
2.2 傘形花內(nèi)酯對青枯菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)調(diào)控通路的轉(zhuǎn)錄表達影響
2.3 傘形花內(nèi)酯對青枯菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白編碼基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
2.4 傘形花內(nèi)酯對青枯菌其他致病相關(guān)基因表達的影響
2.5 傘形花內(nèi)酯對青枯菌侵染煙草致病力的影響
3 討論
4 小結(jié)
第二節(jié) 瑞香素對青枯雷爾氏菌胞外多糖分泌功能的調(diào)控作用
1 材料與方法
1.1 供試菌株、質(zhì)粒及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 青枯菌epsB、wecC、epsC缺失突變體的構(gòu)建
1.6 青枯菌eps-缺失突變體生長情況評價
1.7 青枯菌eps-缺失突變致病因子評價
1.8 青枯菌eps-缺失突變體對煙草致病力的影響
1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 瑞香素對青枯菌胞外多糖相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達的影響
2.2 epsB、epsC和 wec C控制青枯菌在固體培養(yǎng)基上的生長和胞外多糖分泌
2.3 青枯菌胞外多糖含量檢測
2.4 EPS基因突變抑制青枯菌生物膜的形成
2.5 EPS合成相關(guān)基因負(fù)調(diào)控青枯菌運動活性
2.6 胞外多糖合成是青枯菌致病的關(guān)鍵因子
2.7 epsB缺失突變菌株對煙草青枯病的控制效果研究
3 討論
4 小結(jié)
第六章 Hycs對煙草青枯病的防控效果
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試煙苗及生長條件
1.4 供試化合物
1.5 實驗儀器
1.6 室內(nèi)盆栽條件下Hycs處理對煙草青枯病的防控效果
1.7 青枯雷爾氏菌在煙草根部和莖基部定殖研究
1.8 田間施用Hycs對煙草青枯病的控制效果
1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 室內(nèi)盆栽條件下Hycs提前灌根處理對煙草青枯病的防控效果
2.2 接菌后灌根處理Hycs對煙草青枯病的防控效果
2.3 葉面噴施Hycs對煙草青枯病的防控效果研究
2.4 室內(nèi)盆栽條件下Hycs處理對青枯雷爾氏菌根部定殖的影響
2.5 室內(nèi)條件下不同Hycs處理對青枯雷爾氏菌侵染煙草莖基部含量的影響
2.6 田間施用Hycs對煙草青枯病的控制效果
3 討論
4 小結(jié)
第七章 主要結(jié)果和結(jié)論、創(chuàng)新點及研究展望
1 主要結(jié)果和結(jié)論
2 創(chuàng)新點
3 展望
參考文獻
攻讀博士期間發(fā)表論文及參加科研項目情況
致謝
本文編號:4016538
【文章頁數(shù)】:186 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
1 香豆素類化合物對植物與病原菌互作的調(diào)控作用
1.1 香豆素類化合物
1.2 香豆素類化合物對葉際病原微生物與植物互作的影響
1.3 香豆素類化合物對根際病原微生物與植物互作的調(diào)控作用
2 青枯雷爾氏菌及其致病機制
2.1 青枯雷爾氏菌
2.2 侵染循環(huán)
2.3 致病特性
2.4 青枯病的化學(xué)防治技術(shù)
3 植物次生代謝產(chǎn)物對青枯菌與植物互作的調(diào)控作用
3.1 促進病原菌生長作用
3.2 化學(xué)引誘作用
3.3 植物化學(xué)防御作用
4 本研究的目的與意義
4.1 研究目的
4.2 研究內(nèi)容
4.3 技術(shù)路線
第二章 香豆素類化合物對青枯雷爾氏菌的抑菌活性及定量構(gòu)效關(guān)系研究
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 香豆素類化合物對青枯菌的抑菌活性評價
1.6 香豆素類化合物理化參數(shù)獲取
1.7 定量構(gòu)效關(guān)系(2D-QSAR)模型建立
1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 香豆素類化合物對青枯雷爾氏菌的抑菌活性分析
2.2 官能團對香豆素類化合物抑菌活性的影響
2.3 香豆素類化合物抑菌活性的定量構(gòu)效關(guān)系模型構(gòu)建
3 討論
4 小結(jié)
第三章 羥基香豆素類化合物(Hycs)對青枯雷爾氏菌的生物活性及侵染特性的影響
第一節(jié) Hycs對青枯雷爾氏菌的生物活性及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 Hycs對青枯雷爾氏菌生長曲線測定
1.6 Hycs對青枯雷爾氏菌存活率的影響
1.7 Hycs對青枯雷爾氏菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響
1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Hycs對青枯雷爾氏菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度
2.2 Hycs對青枯雷爾氏菌生長曲線的影響
2.3 Hycs對青枯雷爾氏菌存活率的影響
2.4 Hycs對青枯雷爾氏菌細(xì)胞形態(tài)的影響
3 討論
4 小結(jié)
第二節(jié) Hycs對青枯雷爾氏菌侵染特性的影響
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 Hycs對青枯雷爾氏菌生物膜形成的影響
1.6 FITC-ConA染色測定青枯雷爾氏菌生物膜
1.7 Hycs對青枯雷爾氏菌運動性的影響
1.8 Hycs對青枯雷爾氏菌胞外多糖含量的影響
1.9 香豆素類化合物對青枯雷爾氏菌Ⅲ效應(yīng)基因RipX酶活的影響
1.10 Hycs對青枯菌主要致病因子相關(guān)基因表達量的影響
1.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Hycs對青枯雷爾氏菌生物膜形成的影響
2.2 Hycs對青枯雷爾氏菌運動性的影響
2.3 Hycs對青枯雷爾氏菌胞外多糖的影響
2.4 Hycs對青枯菌RipX表達的影響
2.5 Hycs對青枯雷爾氏菌致病相關(guān)基因的影響
3 討論
4 小結(jié)
第四章 青枯雷爾氏菌響應(yīng)羥基香豆素類化合物(Hycs)脅迫的應(yīng)激機制研究
第一節(jié) 青枯雷爾氏菌響應(yīng)Hycs脅迫的轉(zhuǎn)錄組分析
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 Hycs脅迫下青枯菌RNA的提取
1.6 Hycs脅迫下青枯雷爾氏菌原核鏈特異性轉(zhuǎn)錄組測序及數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Hycs脅迫下青枯雷爾氏菌RNA質(zhì)量檢測
2.2 Hycs脅迫下青枯雷爾氏菌轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)概況
2.3 Hycs脅迫青枯雷爾氏菌的差異表達基因
2.4 不同處理青枯菌差異基因的Venn分析
2.5 差異基因的GO富集和KEGG分析
2.6 Hycs對青枯菌生長抑制相關(guān)基因表達的影響
2.7 Hycs對青枯菌致病相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達的影響
3 討論
4 小結(jié)
第二節(jié) Hycs調(diào)控青枯菌脂多糖合成基因lpxB的作用機理
1 材料與方法
1.1 供試菌株、質(zhì)粒及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 青枯菌lpxB缺失突變菌株構(gòu)建
1.6 青枯菌lpxB基因功能測定
1.7 lpxB基因缺失對青枯菌致病力的影響
1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Hycs對青枯菌脂多糖合成相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達的影響
2.2 lpxB缺失型突變對青枯菌生長情況的影響
2.3 lpxB缺失型突變對青枯菌致病因子的影響
2.4 lpxB缺失型突變菌株對煙草致病力的影響
3 討論
4 小結(jié)
第五章 傘形花內(nèi)酯和瑞香素對青枯菌致病因子的調(diào)控作用研究
第一節(jié) 傘形花內(nèi)酯對青枯雷爾氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)的調(diào)控作用研究
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 傘形花內(nèi)酯對青枯菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控作用研究
1.6 青枯菌致病力測定實驗
1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 傘形花內(nèi)酯對青枯菌Ⅲ型效應(yīng)蛋白編碼基因ripX轉(zhuǎn)錄表達的影響
2.2 傘形花內(nèi)酯對青枯菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)調(diào)控通路的轉(zhuǎn)錄表達影響
2.3 傘形花內(nèi)酯對青枯菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白編碼基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
2.4 傘形花內(nèi)酯對青枯菌其他致病相關(guān)基因表達的影響
2.5 傘形花內(nèi)酯對青枯菌侵染煙草致病力的影響
3 討論
4 小結(jié)
第二節(jié) 瑞香素對青枯雷爾氏菌胞外多糖分泌功能的調(diào)控作用
1 材料與方法
1.1 供試菌株、質(zhì)粒及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試化合物
1.4 實驗儀器
1.5 青枯菌epsB、wecC、epsC缺失突變體的構(gòu)建
1.6 青枯菌eps-缺失突變體生長情況評價
1.7 青枯菌eps-缺失突變致病因子評價
1.8 青枯菌eps-缺失突變體對煙草致病力的影響
1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 瑞香素對青枯菌胞外多糖相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達的影響
2.2 epsB、epsC和 wec C控制青枯菌在固體培養(yǎng)基上的生長和胞外多糖分泌
2.3 青枯菌胞外多糖含量檢測
2.4 EPS基因突變抑制青枯菌生物膜的形成
2.5 EPS合成相關(guān)基因負(fù)調(diào)控青枯菌運動活性
2.6 胞外多糖合成是青枯菌致病的關(guān)鍵因子
2.7 epsB缺失突變菌株對煙草青枯病的控制效果研究
3 討論
4 小結(jié)
第六章 Hycs對煙草青枯病的防控效果
1 材料與方法
1.1 供試菌株及其培養(yǎng)條件
1.2 培養(yǎng)基和主要試劑
1.3 供試煙苗及生長條件
1.4 供試化合物
1.5 實驗儀器
1.6 室內(nèi)盆栽條件下Hycs處理對煙草青枯病的防控效果
1.7 青枯雷爾氏菌在煙草根部和莖基部定殖研究
1.8 田間施用Hycs對煙草青枯病的控制效果
1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
2.1 室內(nèi)盆栽條件下Hycs提前灌根處理對煙草青枯病的防控效果
2.2 接菌后灌根處理Hycs對煙草青枯病的防控效果
2.3 葉面噴施Hycs對煙草青枯病的防控效果研究
2.4 室內(nèi)盆栽條件下Hycs處理對青枯雷爾氏菌根部定殖的影響
2.5 室內(nèi)條件下不同Hycs處理對青枯雷爾氏菌侵染煙草莖基部含量的影響
2.6 田間施用Hycs對煙草青枯病的控制效果
3 討論
4 小結(jié)
第七章 主要結(jié)果和結(jié)論、創(chuàng)新點及研究展望
1 主要結(jié)果和結(jié)論
2 創(chuàng)新點
3 展望
參考文獻
攻讀博士期間發(fā)表論文及參加科研項目情況
致謝
本文編號:4016538
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