作為一種常見的組成蛋白質(zhì)的氨基酸,L-絲氨酸主要應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域。生物體內(nèi),L-絲氨酸可以用于合成嘌呤、胸腺嘧啶、膽堿等前體,L-絲氨酸還可作為中間體,用于合成L-色氨酸、L-多巴、L-半胱氨酸等物質(zhì)。L-絲氨酸合成方法中,酶法以良好的催化專一性、反應(yīng)條件溫和、易滿足等優(yōu)點(diǎn)成為生產(chǎn)和研究的主要方向。但是,酶法合成L-絲氨酸存在檢測技術(shù)落后、轉(zhuǎn)化率低、產(chǎn)酸量低、污染嚴(yán)重等問題,為了解決上述酶法合成L-絲氨酸工藝存在的技術(shù)難題,本文開展了詳細(xì)研究并得出如下主要結(jié)論：(1)建立了一種新型的靈敏度高、重現(xiàn)性和選擇性好的HPLC-ESI-MS測定氨基酸含量的方法。A流動相：0.01%甲酸水溶液,B流動相：乙腈：水=70：30(v/v),流速為1 mL min-1,采用Agilent Eclipse plus C18 (4.6mm×250mm×5μm)色譜柱,柱溫30℃,進(jìn)樣量為10μL,UV檢測波長為254 nm。洗脫梯度：0 min=90% A and 10% B,12 min=70% A and 30% B,20 min=52% A and 48% B,30min=100% B,...

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圖２．５?ＰＩＴＣ－ＡＡ液相色譜留??Ｆｉｇ．２．５?Ｌｉｑ山ｄ?ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ?ｆｏｒ?ＰＩＴＣ－ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄｓ??氨基酸標(biāo)準(zhǔn)混合溶液（２．５ｍｌｏｌｍＬ－ｌ）?—，一？打（

華中科技大學(xué)博去學(xué)位論文??在化０５％甲酸水溶液為Ａ流動相、Ｂ流動相乙臘；水＝７０；?３０條件下，對比Ｈ種??不同的流速下Ｇｌｙ和Ｓｅｒ兩種物質(zhì)的分離效果，由結(jié)果（圖２．３），流動相流速ｖ?＝化８??ｍＬｍｉｉｆｉ時，兩種物質(zhì)對應(yīng)的分離度較好，但Ｇｌｙ和Ｓｅｒ兩種物質(zhì)的出峰時間相....

圖３．４不同濃度的ＰＬＰ對巧活的影響??Ｆｉｇ．３．４?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＰＬＰ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ?ＳＨＭＴ?ａｃｔｉｖｉｔｙ??

Ｆｉｇ．３．３?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＤＬｐ－Ｐｈｅｎｙｌｓｅｒｉｎｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ?ＳＨＭＴ?ａｃｔｉｖｉｔｙ??ＣＴＡＢ濃度為化０３ｇ?Ｌ￣ｉ時，向底物中加入ＤＬｐ－苯基絲気酸，濃度依次為５０、??１００、１５０、２００和２５０?＾１１１〇１１７１，....

圖３．７不同反應(yīng)溫度對心絲氨酸產(chǎn)量的影響分析．（■■■ＭＭ四種國案依次代表溫度??為?２５°Ｃ、３０

綜合考慮ＳＨＭＴ熱穩(wěn)定性、試驗設(shè)備耐熱性能，選擇２５?°Ｃ、３０?°Ｃ、３５?Ｘ、４０?°Ｃ??進(jìn)行酶促轉(zhuǎn)化實驗，連續(xù)轉(zhuǎn)化反應(yīng)４．０?ｈ，確定轉(zhuǎn)化反應(yīng)溫度對產(chǎn)物心絲氨酸積累量??的影響。根據(jù)實驗結(jié)果（圖３．７），２５°Ｃ、３０°Ｃ、３５°Ｃ和４０°Ｃ條件下，０￣０．５ｈ，??產(chǎn)物....

圖３．口甲整滴加方法實施前反應(yīng)體系中組分及轉(zhuǎn)化率變化，（？）甘巧酸，（＊）心絲安敵

Ｉ?（６）?ＨＣＨＯ滴加策咯及其應(yīng)用??！?酶促轉(zhuǎn)化反應(yīng)混合溶液中含甘気酸１５?ｍｍｏｌ?Ｌ￣ｉ、ｐｉｐ?０．４?ｍｍｏｌ?Ｌ￣ｉ，ＴＨＦＡ?７?ｍｍｏｌ??１１７１，通入氮?dú)猓常埃保保�；１１，加甲醒１２１１１１１１〇１［１，３０°＜：，１５０巧〇１條件下，連續(xù)進(jìn)行轉(zhuǎn)化??反應(yīng)，....

本文編號：4007735