魚類多能性相關(guān)基因的篩選和鑒定

發(fā)布時(shí)間：2020-11-18 22:09

　　干細(xì)胞(Stem cell)一般是指生物體中具有自我復(fù)制能力的多發(fā)育潛能細(xì)胞,在一定條件下可以分化成一到多種細(xì)胞類型。多能性因子通常在分子水平上表征干細(xì)胞的特征,不僅參與維持干細(xì)胞的多能性,也可以在已分化的細(xì)胞中過表達(dá)而達(dá)到細(xì)胞重編程目的。然而,低等脊椎動(dòng)物魚類中能夠準(zhǔn)確表征干細(xì)胞多能性的因子尚不明晰。本文以斑馬魚和紅鯽為研究對(duì)象,通過文獻(xiàn)查閱收集了16個(gè)在哺乳動(dòng)物中已報(bào)道的多能性標(biāo)記因子,利用RT-PCR技術(shù)分析了這16個(gè)候選基因在魚類胚胎和成體組織中的表達(dá)特征;篩選到在魚類早期胚胎高表達(dá)、在原腸胚晚期后低表達(dá)的三個(gè)基因Oct4、Nanog和Gdf3;利用Q-PCR進(jìn)一步驗(yàn)證了Oct4、Nanog和Gdf3在胚胎發(fā)育過程中的表達(dá),證實(shí)這三個(gè)基因具有母源性表達(dá)特征,且在囊胚期胚胎中mRNA水平較高,而在體節(jié)開始分化后顯著下降。RT-PCR檢測(cè)表明Oct4和Nanog基因在成體中均只在精卵巢組織中特異性表達(dá),Gdf3基因則在精卵巢和腦組織中特異表達(dá);RNA探針原位雜交定位分析進(jìn)一步顯示,Oct4、Nanog和Gdf3均特異定位表達(dá)于精卵巢的性原細(xì)胞和早期發(fā)育的性母細(xì)胞中。綜上所述,本文通過對(duì)候選多能性相關(guān)基因在魚類胚胎和成體中的表達(dá)分析與鑒定,初步篩選出Oct4、Nanog和Gdf3三個(gè)較穩(wěn)定的魚類多能性標(biāo)記因子,為進(jìn)一步開展魚類干細(xì)胞研究奠定了重要基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：Q953
【部分圖文】：