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‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育期間有機(jī)酸代謝特征及相關(guān)基因表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2020-11-20 14:36
   毛花獼猴桃(Actinidia eriantha Benth.)是我國特有資源,因其豐富的Vc(亦稱抗壞血酸,AsA)含量和良好的剝皮性能而引發(fā)研究者的關(guān)注。目前有關(guān)毛花獼猴桃的高酸低糖現(xiàn)象、有機(jī)酸代謝相關(guān)酶的活性變化和相關(guān)基因的表達(dá)等方面研究尚未見報(bào)道。故本研究以毛花獼猴桃‘贛獼6號’為試材,采用高效液相色譜法(HPLC)對‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育期間糖、有機(jī)酸組分及含量進(jìn)行了測定,并使用紫外分光光度法對其有機(jī)酸代謝相關(guān)酶活性進(jìn)行了檢測,并通過qRT-PCR對‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育過程中主要有機(jī)酸代謝酶基因的相對表達(dá)量進(jìn)行檢測分析。主要研究結(jié)果如下:(1)‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育期間主要糖組分為果糖、葡萄糖、蔗糖,在軟熟時(shí)糖含量最高,果糖含量31.25mg/g,葡萄糖含量27.21mg/g,蔗糖含量17.80mg/g,果糖和葡萄糖分別占總糖含量的41.0%和35.7%。本實(shí)驗(yàn)中測定到‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育期間含有AsA和8種有機(jī)酸,‘贛獼6號’軟熟期果實(shí)有機(jī)酸含量由高到低順序依次為:奎尼酸檸檬酸蘋果酸乳酸琥珀酸草酸酒石酸富馬酸,其中奎尼酸、檸檬酸、蘋果酸在整個(gè)發(fā)育期含量均較高,整個(gè)發(fā)育期分別占總酸42.0~69.2%、2.0~63.6%和4.2~32.2%;這三種酸占總酸75.4~91.0%;通過相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)奎尼酸與總酸呈極顯著相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.88。(2)‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育期間莽草酸脫氫酶(NADP-SDH)活性與奎尼酸含量變化相近,果實(shí)發(fā)育前期均表現(xiàn)下降的趨勢;檸檬酸合酶(CS)、異檸檬酸脫氫酶(NAD-IDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性變化與檸檬酸含量變化基本一致,均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢;蘋果酸脫氫酶(NAD-MDH)活性與蘋果酸含量變化趨勢相近,均在發(fā)育前期升高,后保持相對穩(wěn)定的水平。相關(guān)性分析表明:奎尼酸含量與NADP-QDH活性呈顯著相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.60,與NAD-IDH呈顯著負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.62;檸檬酸與NAD-MDH活性呈極顯著正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為0.72),與PEPC、CS、NAD-IDH活性呈顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.58、0.60、0.57,與奎尼酸脫氫酶(NADP-QDH)、NADP-SDH均呈顯著性負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.66、-0.67;蘋果酸與NAD-MDH活性呈顯著相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.61,與NADP-SDH呈顯著負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.59。各主要酸組分與蘋果酸酶(NADP-ME)、ACO活性的相關(guān)系數(shù)很低,相關(guān)關(guān)系不明顯。本研究認(rèn)為NAD-IDH、CS、NADP-QDH、NADP-SDH、NAD-MDH、PEPC活性對‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育期間有機(jī)酸代謝發(fā)揮著重要作用,而NADP-ME、ACO的影響不明顯。(3)‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育過程中,SDH基因與NADP-QDH、NADP-SDH活性趨勢一致,發(fā)育前期均達(dá)到較高水平;IDH基因相對表達(dá)量與NAD-IDH活性變化趨勢相近,均為先升高后降低;ACO基因與Mit-ACO活性趨勢相近,但是與檸檬酸含量變化趨勢均差異性較大,只有花后140~155 d均達(dá)到最大水平。相關(guān)性分析表明:‘贛獼6號’果實(shí)發(fā)育期間SDH基因與NADP-QDH、NADP-SDH均呈現(xiàn)極顯著相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.79、0.91;IDH基因與NAD-IDH表現(xiàn)出極顯著相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)為0.88),ACO基因與Mit-ACO表現(xiàn)極顯著相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為0.69),但與檸檬酸均沒有相關(guān)性;CS、DQS兩個(gè)基因與奎尼酸、檸檬酸及相關(guān)的酶沒有顯著性相關(guān);本研究認(rèn)為大部分有機(jī)酸代謝酶活性在轉(zhuǎn)錄水平下會受到其對應(yīng)基因的調(diào)控,部分基因(CS、DQS)可能受到翻譯后修飾作用的影響,其活性沒有受到轉(zhuǎn)錄水平下的基因所調(diào)控。
【學(xué)位單位】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:S663.4
【部分圖文】:

增長趨勢,增長階段,快速增長,含量變化


從圖2.1 可以看出,SSC 含量在整個(gè)發(fā)育期都保持增長趨勢,在花后 80~155 d 處于緩慢增長階段,花后 155 d 開始快速增長,直至軟熟期,達(dá)到最大值(16.03%)。從圖 2.2可以看出,‘贛獼 6 號’DM 含量在整個(gè)發(fā)育期都保持增長趨勢,花后 80~125 d DM與 SSC 含量變化趨勢相近,處于緩慢增長,在花后 125~140 d 急劇增長

可溶性糖含量,毛花獼猴桃,糖組分,增長階段


如圖2.3 所示,花后 20~155 d,可溶性糖含量處于較低水平且差異均不明顯,花后 20~95 d 處于緩慢增長階段,在花后 95 d 達(dá)到一個(gè)小高峰(3.15 %)。隨后可溶性總糖開始下降,在花后 125 d 出現(xiàn)最低值(2.03 %)。在花后 125~155 d 開始緩慢增加,花后 155 d 直至軟熟期,可溶性總糖含量快速增長,在軟熟期達(dá)到最大值 9.61 %。圖 2.3 ‘贛獼 6 號’果實(shí)發(fā)育期間可溶性糖含量的變化Fig. 2.3 Changes of soluble sugar content during fruit development of ‘Ganmi 6’通過對毛花獼猴桃‘贛獼 6 號’果實(shí)發(fā)育期間糖組分測定分析,如圖 2.4 所示

干物質(zhì)含量,可溶性糖含量,毛花獼猴桃,糖組分


圖 2.2 贛獼 6 號’果實(shí)發(fā)育期間干物質(zhì)含量的變化Fig. 2.2 Changes of dry matter content during fruit development of ‘Ganm.2 果實(shí)發(fā)育期間可溶性糖、糖組分含量變化通過對毛花獼猴桃‘贛獼 6 號’果實(shí)發(fā)育期間可溶性糖含量進(jìn)行測定分 所示,花后 20~155 d,可溶性糖含量處于較低水平且差異均不明顯,花 d 處于緩慢增長階段,在花后 95 d 達(dá)到一個(gè)小高峰(3.15 %)。隨后可溶下降,在花后 125 d 出現(xiàn)最低值(2.03 %)。在花后 125~155 d 開始緩慢 155 d 直至軟熟期,可溶性總糖含量快速增長,在軟熟期達(dá)到最大值 9.61
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本文編號:2891563

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