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山梨醇脫氫酶抑制劑的篩

發(fā)布時間:2020-12-19 18:51
  鱗翅目昆蟲是一類完全變態(tài)的昆蟲,在其幼蟲階段,許多鱗翅目昆蟲以植物的根莖為食,對農(nóng)作物的生產(chǎn)帶來極大的威脅,需要采取一定的手段來控制鱗翅目昆蟲的生長發(fā)育過程。在鱗翅目昆蟲的生長發(fā)育階段中有一段重要的時期-滯育期,為鱗翅目昆蟲為了應對不利的環(huán)境條件而進入一種生長發(fā)育暫時停止的狀態(tài)。鱗翅目昆蟲可在不同時期進入滯育狀態(tài),包括卵滯育、幼蟲及蛹滯育、成蟲滯育。不同的滯育方式有不同的調(diào)控機制,但在整個滯育解除的過程中,山梨醇脫氫酶的活性對鱗翅目昆蟲的發(fā)育有著至關重要的作用。山梨醇脫氫酶(Sorbitol dehydrogenase,SDH)是MDR超家族中醇脫氫酶的一員,在多元醇代謝通路中,將山梨醇氧化為糖原,為機體提供能量。山梨醇作為昆蟲代謝過程中的主要能量物質(zhì),廣泛存在于各類鱗翅目昆蟲體內(nèi),例如棉鈴蟲、家蠶等等,在其滯育期,山梨醇起到為機體生存提供能量的重要作用,使昆蟲可以順利度過滯育期,并且有足夠的能量打破滯育。柞蠶(Antherea pernyi)是一類在蛹期滯育的鱗翅目昆蟲。在其滯育后期,由于山梨醇可以轉化為糖原,為柞蠶蛹打破滯育提供能量。因此如果能通過體外手段抑制SDH的活性,將有望干... 

【文章來源】:大連理工大學遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
1 文獻綜述
    1.1 鱗翅目昆蟲的危害
    1.2 鱗翅目昆蟲的滯育調(diào)控機制
    1.3 山梨醇脫氫酶與滯育機制的關系
    1.4 山梨醇脫氫酶抑制劑的研究進展
    1.5 分子模擬藥物設計
    1.6 研究目的與意義
    1.7 研究內(nèi)容與路線
2 柞蠶山梨醇脫氫酶基因的克隆表達
    2.1 實驗材料與試劑
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 柞蠶SDH序列全長的獲得
        2.2.2 pApM748BE-His-SDH表達載體的構建
        2.2.3 重組SDH在柞蠶蛹中的表達
        2.2.4 SDH表達活性檢測
    2.3 實驗結果與分析
        2.3.1 柞蠶SDH序列全長的獲得
        2.3.2 pApM748BE-SDH表達載體的構建
        2.3.3 重組SDH在柞蠶蛹中的表達
        2.3.4 重組SDH的酶活檢測
    2.4 本章小結
3 SDH抑制劑的虛擬篩選及衍生物的合成
    3.1 實驗材料
    3.2 實驗方法
        3.2.1 柞蠶SDH同源模型的建立
        3.2.2 分子對接
        3.2.3 達卡巴嗪衍生物的合成
    3.3 實驗結果與分析
        3.3.1 Ap-SDH同源模型
        3.3.2 通過Libdock分子對接使配體與受體蛋白的結合
        3.3.3 衍生物的結構鑒定
    3.4 本章小結
4 達卡巴嗪及其衍生物對SDH抑制作用
    4.1 實驗材料
    4.2 實驗方法
        4.2.1 達卡巴嗪及其衍生物體外檢測對酶活的抑制作用
        4.2.2 達卡巴嗪及其衍生物體內(nèi)檢測對酶活的抑制作用
        4.2.3 達卡巴嗪及其衍生物對酶活的抑制方式
        4.2.4 達卡巴嗪及其衍生物的細胞毒性
    4.3 實驗結果與分析
        4.3.1 達卡巴嗪及其衍生物體外對SDH酶活的抑制作用
        4.3.2 達卡巴嗪及其抑制劑體內(nèi)對SDH活性的影響
        4.3.3 達卡巴嗪及其衍生物對SDH酶活抑制的抑制方式
        4.3.4 達卡巴嗪及其抑制劑的細胞毒性
    4.4 本章小結
結論
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表學術論文情況
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
[1]福建紅樹林昆蟲群落及主要害蟲綜合治理技術研究[D]. 丁珌.福建農(nóng)林大學 2007

碩士論文
[1]亞致死濃度氯蟲苯甲酰胺對二化螟保幼激素和蛻皮激素的影響[D]. 徐貝貝.揚州大學 2017
[2]白楊透翅蛾無公害防治初步研究[D]. 張健.東北師范大學 2008
[3]煙夜蛾(Helicoverpa assulta Guenée)滯育激素cDNA的克隆和序列分析[D]. 湯清波.河南農(nóng)業(yè)大學 2002



本文編號:2926402

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