發(fā)布時間：2024-07-02 00:10

　　目的:探討體外培養(yǎng)人早孕絨毛滋養(yǎng)層細胞在含有抗子宮內膜抗體(EmAb)血清環(huán)境中細胞凋亡指數(shù)(apoptosis index,AI)及凋亡相關蛋白因子配體(factor associated suicide ligend,FasL)的表達情況。 方法:抽取在我院門診就診的EmAb陽性而其它與自然流產(chǎn)相關的免疫性抗體陰性的病人肘靜脈血5ml用于EmAb(+)血清處理組,同法取5ml各相關免疫性抗體均陰性的正常育齡婦女血清用于EmAb(-)血清處理組。靜脈血靜置、離心后取上清-80℃保存?zhèn)溆?作為實驗干預條件。無菌條件下獲取正常妊娠6～8周早孕絨毛組織,經(jīng)胰蛋白酶/DNA酶Ⅰ聯(lián)合消化,Percoll密度梯度離心法對得到的細胞進行純化并培養(yǎng),將最終獲得的CTs應用免疫細胞化學法對其進行純度鑒定,并同時傳代培養(yǎng)。將傳1-2代的CTs分為2組:EmAb(+)血清處理組和EmAb(-)血清處理組,分別加入EmAb(+)血清處理和EmAb(-)血清處理并培養(yǎng),于0h、48h、72h、96h,分別經(jīng)過臺盼藍排出試驗觀察CTs的活力、計算細胞存活率;采用DNA末端轉移酶介導的原位缺口末端標記法(lebe...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1人絨毛細胞滋養(yǎng)層細胞原代培養(yǎng),呈不規(guī)則多邊形生長,排列緊密、分裂增殖明顯(×400)

色示絕大多數(shù)貼壁生長的細胞CK7陽性,V9陰性,顯微鏡下計數(shù)5個視野中每100個細胞中的陽性細胞數(shù)為(92.60±1.56)%。見圖1、圖2。2.2　TUNEL法檢測細胞凋亡率　DNA末端轉移酶介導的原位缺口末端標記陽性染色檢測絨毛細胞滋養(yǎng)細胞凋亡,鏡下見各組凋亡的絨毛滋養(yǎng)細....

圖5免疫細胞化學法檢測人絨毛細胞

排列緊密，細胞邊界清晰可見(x400)圖3人絨毛滋養(yǎng)層細胞傳代培養(yǎng)3h后，細胞貼壁，呈圓形或多邊形(X400)

圖3人絨毛滋養(yǎng)層細胞傳代培養(yǎng)

圖3人絨毛滋養(yǎng)層細胞傳代培養(yǎng)3h后，細胞貼壁，呈圓形或多邊形(X400)圖4人絨毛滋養(yǎng)層細胞傳代培養(yǎng)24h后，細胞貼壁，排列緊密，形態(tài)同原代細胞相似(x400)圖5免疫細胞化學法檢測人絨毛細胞細胞角蛋白7表達陽性，胞漿呈棕褐色(X400)

圖4人絨毛滋養(yǎng)層細胞傳代培

圖3人絨毛滋養(yǎng)層細胞傳代培養(yǎng)3h后，細胞貼壁，呈圓形或多邊形(X400)圖4人絨毛滋養(yǎng)層細胞傳代培養(yǎng)24h后，細胞貼壁，排列緊密，形態(tài)同原代細胞相似(x400)圖5免疫細胞化學法檢測人絨毛細胞細胞角蛋白7表達陽性，胞漿呈棕褐色(X400)

本文編號：3999398