十字花科作物根腫病也稱根癌,是由蕓薹根腫菌(Plasmodiaphora brassicae Woronin)侵染引起的世界性土傳病害,在中國乃至全世界范圍危害嚴重。目前生產(chǎn)上主要采用農(nóng)業(yè)防治、化學防治和生物防治,但鑒于農(nóng)業(yè)防治勞動強度大、周期長且容易造成土壤板結(jié);化學藥劑防治,容易造成農(nóng)藥殘留；生物防治研究不太成熟且生防菌種類有限等種種因素導致整體防效并不理想。因此,在生產(chǎn)上培育具有根腫病抗性的十字花科品種是最根本最安全的途徑。但當前我們對于根腫病抗性的遺傳規(guī)律并不十分明確,培育出的抗病品種通常具有生理小種特異性,加之病原菌變異迅速,使得其抗性不能持久,所以,要想有效地防治根腫病,一方面必須加大抗性品種篩選力度,為抗病育種提供多來源的抗性資源,另一方面,還要進一步明確病原菌的致病機理,加強根腫菌的早期檢測,從而開展根腫病的綜合防治。本研究通過比較不同接種方法的發(fā)病情況,研究室內(nèi)接種的適宜方法,利用正交試驗探討接種最優(yōu)發(fā)病體系；以收集到的130多個蕓薹屬蔬菜品種為材料,通過插入法進行抗病性鑒定,篩選抗病品種；利用光學顯微鏡鑒定和PCR檢測的方法檢測根腫組織中存在的根腫菌,并利用ECD系統(tǒng)...

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
縮寫詞(Abbreviation)
前言
1 文獻綜述：十字花科植物根腫病的致病性和遺傳多樣性研究進展
    1.1 十字花科植物根腫病及抗病育種研究進展
        1.1.1 根腫病的發(fā)生與危害
        1.1.2 根腫病的癥狀識別
        1.1.3 蕓薹根腫菌的生物學特性
        1.1.4 根腫病的寄主及病原菌的侵染方式
        1.1.5 蕓薹根腫菌的檢測
            1.1.5.1 植株誘導法
            1.1.5.2 熒光顯微鏡觀察法
            1.1.5.3 血清學分析法
            1.1.5.4 PCR技術
        1.1.6 根腫菌的接種方法
        1.1.7 根腫病抗病育種研究
    1.2 十字花科植物根腫蕓薹菌的致病性與遺傳多樣性研究
        1.2.1 蕓薹根腫菌與寄主互作
            1.2.1.1 植物病原菌發(fā)生變異的遺傳學研究
            1.2.1.2 植物群體抗病性多樣性的遺傳學研究
            1.2.1.3 病原菌群體致病性多樣性的遺傳學研究
            1.2.1.4 植物和病原菌互作的遺傳學研究
        1.2.2 蕓薹根腫病菌致病性分化
        1.2.3 根腫病發(fā)病機理研究
    1.3 十字花科植物根腫病綜合防治措施
        1.3.1 農(nóng)業(yè)防治
        1.3.2 藥劑防治
        1.3.3 生物防治
    1.4 前景與展望
2 優(yōu)化接種方法的研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 病原菌來源
        2.1.3 接種液的制備
        2.1.4 接種試驗優(yōu)化的研究
            2.1.4.1 試驗條件及管理
            2.1.4.2 不同接種方法對發(fā)病程度的影響
            2.1.4.3 不同保存形式的菌源對發(fā)病程度的影響
            2.1.4.4 應用血球計數(shù)板進行孢子計數(shù)
            2.1.4.5 室內(nèi)接種條件的優(yōu)化處理
            2.1.4.6 調(diào)查及評價標準
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 不同接種方法對發(fā)病程度的影響
        2.2.2 不同保存形式的菌源對發(fā)病程度的影響
        2.2.3 室內(nèi)接種條件的優(yōu)化處理
    2.3 討論
3 蕓薹屬作物根腫病抗性品種的篩選
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 病原菌來源
        3.1.3 材料抗/感根腫病鑒定
        3.1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 根腫病抗/感鑒定試驗
        3.2.2 不同材料對根腫病抗性差異及顯著性分析
    3.3 討論
4 蕓薹根腫菌生理小種的檢測
    4.1 材料與方法
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 菌種來源
        4.1.3 ECD鑒別寄主抗/感根腫病鑒定
        4.1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 上海青浦區(qū)大盈鎮(zhèn)根腫菌生理小種鑒定
        4.2.2 湖北長陽火燒坪根腫菌生理小種鑒定
        4.2.3 浙江省臺州市溫嶺根腫菌生理小種的鑒定
        4.2.4 湖北恩施利川根腫菌生理小種的鑒定
        4.2.5 湖北恩施雙河鎮(zhèn)根腫菌生理小種的鑒定
        4.2.6 浙江省溫州市藤橋鎮(zhèn)根腫菌生理小種的鑒定
        4.2.7 西藏林芝地區(qū)根腫菌生理小種的鑒定
        4.2.8 根腫菌的致病性分化
    4.3 討論
        4.3.1 ECD16/0/0與為害臺灣地區(qū)的蕓薹根腫菌為同一生理小種
        4.3.2 蕓薹種根腫菌存在明顯的致病性分化
        4.3.3 蕓薹種的蕪菁亞種類作物可作為抗根腫病病育種的抗源材料
        4.3.4 各地應因地制宜,選擇栽培不同的蔬菜以減輕根腫病的為害
5 蕓薹根腫菌的快速鑒別
    5.1 材料與方法
        5.1.1 蕓薹根腫菌生理小種來源
        5.1.2 PCR引物及其來源
        5.1.3 病根組織總DNA提取
        5.1.4 PCR反應體系及擴增程序
            5.1.5.1 差異片段的回收
            5.1.5.2 回收產(chǎn)物的載體連接
            5.1.5.3 大腸桿菌DH5α感受態(tài)細胞的制備和轉(zhuǎn)化
            5.1.5.4 挑菌斑
            5.1.5.5 搖菌
            5.1.5.6 菌液PCR
            5.1.5.7 測序
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 根腫菌的鏡檢觀察
        5.2.2 測序結(jié)果分析
        5.2.3 各生理小種的序列分析
        5.2.4 各生理小種的系統(tǒng)進化樹分析
    5.3 討論
        5.3.1 P.brassicae不同生理小種的rDNA序列具有多態(tài)性
        5.3.2 P brassicae rDNA的28S區(qū)域保守程度較高
        5.3.3 1RF和2RF兩對引物可用于蕓薹根腫菌的早期檢測
結(jié)論
參考文獻
附件
作者簡歷



本文編號：4051864