基于目標(biāo)循環(huán)放大及背景抑制策略構(gòu)建靈敏的DNA熒光生物傳感器的研究
發(fā)布時(shí)間:2024-06-28 19:20
生物傳感器是由分析化學(xué)、生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)等領(lǐng)域相互滲透而形成的一個(gè)新興的研究課題。生物傳感器憑借其設(shè)備簡(jiǎn)單、易于攜帶、測(cè)試成本低廉、檢測(cè)快速方便、結(jié)果靈敏可靠以及易于實(shí)現(xiàn)原位活體檢測(cè)等優(yōu)勢(shì),躋身當(dāng)前的研究熱點(diǎn)之一。DNA熒光傳感器便是其中一種。DNA熒光生物傳感器通過(guò)DNA生物傳感器將目標(biāo)物的信號(hào)轉(zhuǎn)換成熒光信號(hào)進(jìn)行輸出和檢測(cè),進(jìn)而對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行定性及定量分析。這種分析方法將生物傳感器的特異性、易于實(shí)現(xiàn)多種放大策略的優(yōu)點(diǎn)和熒光傳感器的高靈敏度、高選擇性和較高的儀器普及率等特點(diǎn)結(jié)合起來(lái),大大提高了分析測(cè)試的靈敏度、準(zhǔn)確度和可操作性。這些特點(diǎn)使得DNA熒光生物傳感器吸引了大量研究者的目光,因而該技術(shù)也得到了不斷的發(fā)展。然而隨著基因測(cè)序、疾病診斷、食品藥品監(jiān)控、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域?qū)τ诜治鰴z測(cè)技術(shù)的要求不斷提高,DNA熒光傳感器的研究也迫切需要更加深入,以期發(fā)展出更加靈敏快速、準(zhǔn)確可靠、簡(jiǎn)易、實(shí)惠的測(cè)定方法,服務(wù)科研和社會(huì)。本文以DNA熒光傳感技術(shù)為基礎(chǔ)結(jié)合多種酶利用目標(biāo)循環(huán)放大策略來(lái)提高方法的靈敏度,同時(shí)采用核酸外切酶Ⅲ和氧化石墨烯(GO)以實(shí)現(xiàn)對(duì)熒光背景信號(hào)的降低,構(gòu)建了三種生物傳感器...
【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
1.1 DNA生物傳感器
1.1.1 DNA
1.1.2 生物傳感器
1.1.3 DNA熒光型生物傳感器的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用
1.2 賽博綠 Ⅰ 熒光染料
1.2.1 賽博綠 Ⅰ 熒光染料簡(jiǎn)介
1.2.2 賽博綠 Ⅰ 熒光染料在DNA熒光傳感器中的應(yīng)用
1.3 提高DNA傳感器靈敏度的方法
1.3.1 DNA傳感器的信號(hào)放大策略
1.3.2 DNA傳感器的背景抑制策略
1.4 本文的研究思路
第2章 基于toehold鏈置換反應(yīng)驅(qū)動(dòng)的目標(biāo)循環(huán)放大以及外切酶 Ⅲ 輔助背景信號(hào)降低原理構(gòu)建熒光傳感器用于突變DNA序列的檢測(cè)
2.1 前言
2.2 實(shí)驗(yàn)部分
2.2.1 試劑及材料
2.2.2 儀器裝置
2.2.3 DNA傳感過(guò)程
2.2.4 熒光測(cè)定過(guò)程
2.2.5 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
2.2.6 在血清樣品中進(jìn)行回收率試驗(yàn)
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 機(jī)理及其驗(yàn)證
2.3.2 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
2.3.3 靈敏度的研究
2.3.4 檢測(cè)目標(biāo)DNA的選擇性和重復(fù)性探究
2.3.5 實(shí)際應(yīng)用前景的探究
2.4 結(jié)論
第3章 基于toehold鏈置換反應(yīng)驅(qū)動(dòng)的目標(biāo)循環(huán)放大以及外切酶 Ⅲ 輔助背景信號(hào)降低原理構(gòu)建熒光傳感器用于凝血酶的檢測(cè)
3.1 前言
3.2 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.1 試劑及材料
3.2.2 儀器裝置
3.2.3 DNA傳感過(guò)程
3.2.4 熒光測(cè)定過(guò)程
3.2.5 在血清樣品中進(jìn)行回收率試驗(yàn)
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 機(jī)理及其驗(yàn)證
3.3.2 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
3.3.3 靈敏度的研究
3.3.4 檢測(cè)凝血酶的選擇性探究
3.3.5 實(shí)際應(yīng)用前景的探究
3.4 結(jié)論
第4章 基于脫氧核酶和Klenow Fragment, Exo- 聚合酶的雙重信號(hào)循環(huán)放大和氧化石墨烯輔助的背景信號(hào)降低策略檢測(cè)L-組氨酸
4.1 前言
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 試劑及材料
4.2.2 儀器裝置
4.2.3 DNA傳感過(guò)程
4.2.4 熒光測(cè)定過(guò)程
4.2.5 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
4.2.6 在血清樣品中進(jìn)行回收率試驗(yàn)
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 機(jī)理及其驗(yàn)證
4.3.2 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
4.3.3 靈敏度的研究
4.3.4 檢測(cè)L-組氨酸的選擇性探究
4.3.5 實(shí)際應(yīng)用前景的探究
4.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表的論文
致謝
本文編號(hào):3996557
【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
1.1 DNA生物傳感器
1.1.1 DNA
1.1.2 生物傳感器
1.1.3 DNA熒光型生物傳感器的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用
1.2 賽博綠 Ⅰ 熒光染料
1.2.1 賽博綠 Ⅰ 熒光染料簡(jiǎn)介
1.2.2 賽博綠 Ⅰ 熒光染料在DNA熒光傳感器中的應(yīng)用
1.3 提高DNA傳感器靈敏度的方法
1.3.1 DNA傳感器的信號(hào)放大策略
1.3.2 DNA傳感器的背景抑制策略
1.4 本文的研究思路
第2章 基于toehold鏈置換反應(yīng)驅(qū)動(dòng)的目標(biāo)循環(huán)放大以及外切酶 Ⅲ 輔助背景信號(hào)降低原理構(gòu)建熒光傳感器用于突變DNA序列的檢測(cè)
2.1 前言
2.2 實(shí)驗(yàn)部分
2.2.1 試劑及材料
2.2.2 儀器裝置
2.2.3 DNA傳感過(guò)程
2.2.4 熒光測(cè)定過(guò)程
2.2.5 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
2.2.6 在血清樣品中進(jìn)行回收率試驗(yàn)
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 機(jī)理及其驗(yàn)證
2.3.2 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
2.3.3 靈敏度的研究
2.3.4 檢測(cè)目標(biāo)DNA的選擇性和重復(fù)性探究
2.3.5 實(shí)際應(yīng)用前景的探究
2.4 結(jié)論
第3章 基于toehold鏈置換反應(yīng)驅(qū)動(dòng)的目標(biāo)循環(huán)放大以及外切酶 Ⅲ 輔助背景信號(hào)降低原理構(gòu)建熒光傳感器用于凝血酶的檢測(cè)
3.1 前言
3.2 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.1 試劑及材料
3.2.2 儀器裝置
3.2.3 DNA傳感過(guò)程
3.2.4 熒光測(cè)定過(guò)程
3.2.5 在血清樣品中進(jìn)行回收率試驗(yàn)
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 機(jī)理及其驗(yàn)證
3.3.2 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
3.3.3 靈敏度的研究
3.3.4 檢測(cè)凝血酶的選擇性探究
3.3.5 實(shí)際應(yīng)用前景的探究
3.4 結(jié)論
第4章 基于脫氧核酶和Klenow Fragment, Exo- 聚合酶的雙重信號(hào)循環(huán)放大和氧化石墨烯輔助的背景信號(hào)降低策略檢測(cè)L-組氨酸
4.1 前言
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 試劑及材料
4.2.2 儀器裝置
4.2.3 DNA傳感過(guò)程
4.2.4 熒光測(cè)定過(guò)程
4.2.5 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
4.2.6 在血清樣品中進(jìn)行回收率試驗(yàn)
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 機(jī)理及其驗(yàn)證
4.3.2 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
4.3.3 靈敏度的研究
4.3.4 檢測(cè)L-組氨酸的選擇性探究
4.3.5 實(shí)際應(yīng)用前景的探究
4.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表的論文
致謝
本文編號(hào):3996557
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