發(fā)布時(shí)間：2024-05-25 00:54

　　拷貝數(shù)變異(Copy Number Variations, CNVs)是一種大小從1 kb到幾個(gè)Mb范圍內(nèi)的DNA片段多態(tài)性,形式包括缺失、插入、重復(fù)以及復(fù)雜的多位點(diǎn)突變等。CNVs廣泛分布于基因組中,是遺傳變異的主要形式之一,對(duì)基因表達(dá)、表型變異以及基因劑量的改變都有很大影響,可以引發(fā)各種復(fù)雜的疾病。對(duì)CNVs的研究可以闡述遺傳疾病的分子機(jī)制,尋找用于基因診斷和產(chǎn)前診斷的分子標(biāo)記,為疾病的分子診斷和新治療方法的開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。近年來(lái),隨著納米技術(shù)的迅速發(fā)展,納米材料的應(yīng)用為生物醫(yī)學(xué)的研究和發(fā)展提供了新的技術(shù)和手段。磁性納米顆粒(Magnetic Nanoparticles, MNPs)是納米材料的重要組成部分,由于其具有高表面積、易分離以及良好的生物相容性等特點(diǎn),目前已被廣泛地應(yīng)用于生物信號(hào)檢測(cè)方面。另外,化學(xué)發(fā)光(Chemiluminescence, CL)技術(shù)因具有較高的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確度以及儀器要求簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),成為了生物分析研究與發(fā)展的重要工具。本論文研究結(jié)合磁性納米顆粒和化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),建立了一種快速、靈敏和實(shí)用的核酸定量新技術(shù),并用于CNVs的檢測(cè),具體研究?jī)?nèi)容包...

【文章頁(yè)數(shù)】：123 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 CNVs與疾病的相關(guān)性
        1.1.1 致病性CNVs的發(fā)生形式
        1.1.2 CNVs與常見(jiàn)疾病
    1.2 CNVs的檢測(cè)方法
        1.2.1 基于雜交技術(shù)的檢測(cè)方法
        1.2.2 基于PCR技術(shù)的檢測(cè)方法
        1.2.3 基于測(cè)序技術(shù)的檢測(cè)方法
    1.3 磁性納米顆粒的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用
        1.3.1 生物分子的分離與純化
        1.3.2 靶向藥物治療
        1.3.3 靶向磁熱療
        1.3.4 磁共振成像
        1.3.5 磁轉(zhuǎn)染
    1.4 化學(xué)發(fā)光的生物檢測(cè)應(yīng)用
        1.4.1 化學(xué)發(fā)光在核酸檢測(cè)分析中的應(yīng)用
        1.4.2 化學(xué)發(fā)光在免疫分析中的應(yīng)用
    1.5 本課題的研究目的和意義
    參考文獻(xiàn)
第二章 基于磁性納米顆粒和引物延伸的核酸定量法的初步探索
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 顆粒的表征
        2.3.2 特異性檢測(cè)
        2.3.3 基于MNPs和引物延伸的核酸檢測(cè)方法的優(yōu)化
        2.3.4 基于MNPs-CL和引物延伸法的核酸定量檢測(cè)
    2.4 結(jié)論
        2.4.1 基于MNPs-CL和引物延伸的核酸檢測(cè)方法的初步建立
        2.4.2 化學(xué)發(fā)光條件的優(yōu)化
        2.4.3 模擬核酸定量分析
    參考文獻(xiàn)
第三章 基于磁性納米顆粒和探針連接依賴的擴(kuò)增技術(shù)的核酸定量法的初步探索
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 特異性檢測(cè)
        3.3.2 MNPs-CL核酸檢測(cè)系統(tǒng)的優(yōu)化
        3.3.3 基于MNPs-CL和探針連接依賴的擴(kuò)增技術(shù)的核酸定量檢測(cè)
    3.4 結(jié)論
        3.4.1 基于MNPs-CL和探針連接依賴的擴(kuò)增技術(shù)的核酸檢測(cè)法的建立
        3.4.2 MNPs-CL系統(tǒng)檢測(cè)目標(biāo)DNA擴(kuò)增產(chǎn)物的條件優(yōu)化
        3.4.3 模擬核酸定量分析
    參考文獻(xiàn)
第四章 基于磁性納米顆粒和探針連接依賴的擴(kuò)增技術(shù)的CNVs檢測(cè)方法的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 連接探針的特異性
        4.3.2 模擬基因的拷貝數(shù)檢測(cè)
        4.3.3 MNPs-CL系統(tǒng)對(duì)目標(biāo)基因的拷貝數(shù)檢測(cè)及分析
        4.3.4 MLPA技術(shù)的拷貝數(shù)檢測(cè)及其與MNPs-CL系統(tǒng)的比較分析
    4.4 結(jié)論
        4.4.1 基于MNPs-CL和探針連接依賴的擴(kuò)增技術(shù)的CNVs檢測(cè)方法的初步建立
        4.4.2 基因組DNA中目標(biāo)基因的拷貝數(shù)檢測(cè)與分析
        4.4.3 與MLPA檢測(cè)法的比較分析
    參考文獻(xiàn)
第五章 基于金磁納米復(fù)合顆粒和熒光技術(shù)的核酸定量檢測(cè)的可能性探討
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 Fe₃O₄@SiO₂@Au納米復(fù)合顆粒的表征
        5.3.2 基于GMNPs和引物在位延伸的熒光檢測(cè)體系
    5.4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第六章 總結(jié)與展望
    6.1 論文工作總結(jié)
    6.2 下一步工作需要解決的問(wèn)題
附錄
    攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文
    攻讀博士期間參加的會(huì)議
    攻讀博士期間申請(qǐng)或參與申請(qǐng)的專(zhuān)利
致謝



本文編號(hào)：3981466