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  本文關(guān)鍵詞：大鼠肝郁脾虛證的代謝組學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

；中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)２００７年５月第５卷第３期Jour；·３０７·；大鼠肝郁脾虛證的代謝組學(xué)研究；羅和古，丁杰，岳廣欣，陳家旭；北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)診斷系，北京１０００２９；目的：研究慢性束縛應(yīng)激大鼠（肝郁脾虛模型）的血漿；方法：選用實(shí)驗(yàn)用二級(jí)雄性SD大鼠２４只，隨機(jī)分為；NMR）波譜儀檢測(cè)；０．０４ppm，進(jìn)行分段積

中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)２００７年５月第５卷第３期　JournalofChineseIntegrativeMedicine，May２００７；Vol．５，No．３

·３０７·

大鼠肝郁脾虛證的代謝組學(xué)研究

羅和古，丁杰，岳廣欣，陳家旭

北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)診斷系，北京１０００２９

目的：研究慢性束縛應(yīng)激大鼠（肝郁脾虛模型）的血漿代謝表型改變，開(kāi)展中醫(yī)證候?qū)W的研究，試圖通過(guò)對(duì)慢性束縛應(yīng)激大鼠代謝物組的共性分析和生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)，尋找肝郁脾虛證候的生物學(xué)本質(zhì)，探討代謝組學(xué)在中醫(yī)證候?qū)W研究中的應(yīng)用。

方法：選用實(shí)驗(yàn)用二級(jí)雄性SD大鼠２４只，隨機(jī)分為４組：７d正常對(duì)照組（A組）、２１d正常對(duì)照組（B組）、７d模型組（C組）和２１d模型組（D組），每組６只。以慢性束縛方法制作應(yīng)激大鼠模型。分別于第８天和第２２天麻醉后心室取血，用VarianUnityInova６００M超導(dǎo)傅立葉變化核磁共振（nuclearmagneticresonance，程序?qū)�H譜按默認(rèn)值，分別從４．５～０．５ppm（弛豫時(shí)間編輯）以及６．０～０ppm（擴(kuò)散編輯），每段為

１

NMR）波譜儀檢測(cè)。自由感應(yīng)衰減信號(hào)經(jīng)過(guò)３２k傅立葉變換轉(zhuǎn)為一維NMR譜圖。調(diào)用VNMR軟件中的

０．０４ppm，進(jìn)行分段積分，將積分?jǐn)?shù)據(jù)歸一化后，以文本文件或Excel文件貯存，用于模式識(shí)別分析。將上述得到的數(shù)據(jù)文件利用Simca�睵１０．０軟件包進(jìn)行主成分分析。

結(jié)果：大鼠血漿１HNMR譜的主成分分析，各組動(dòng)物代謝譜各不相同，與已知應(yīng)激狀態(tài)下動(dòng)物體內(nèi)代謝的調(diào)未知化合物的譜峰峰形改變較為明顯。這些發(fā)生改變的代謝物可以作為肝郁脾虛證的生物標(biāo)志物做進(jìn)一步的研究。

物，闡釋中醫(yī)證候的生物學(xué)本質(zhì)。代謝組學(xué)分析是一種有良好發(fā)展前景的中醫(yī)證候?qū)W研究方法。關(guān)鍵詞：代謝組學(xué)；模式識(shí)別；核磁共振；中醫(yī)；大鼠

中圖分類號(hào)：R２５；文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A；文章編號(hào)：１６７２�玻保梗罚罚ǎ玻埃埃罚�０３�玻埃常埃藩玻埃�

結(jié)論：各組大鼠血漿HNMR代謝譜之間存在差異，而且可能從代謝組學(xué)分析中找出特異的標(biāo)志性代謝產(chǎn)

１

節(jié)過(guò)程及結(jié)果相一致。正常對(duì)照組與模型組相比較發(fā)現(xiàn)，醋酸、乳酸、酪氨酸、低密度脂蛋白和３．４４ppm的

Metabonomicstudyofsyndromeofliverqistagnationandspleendeficiencyinrats

He�瞘uLUO，JieDING，Guang�瞲inYUE，Jia�瞲uCHEN

DepartmentofDiagnosticsofTraditionalChineseMedicine，BeijingUniversityofChineseMedicine，Beijing１０００２９，China

Objective：Todeterminethechangesoftheplasmametabolicphenotypeinratswithchronicrestraintstress（ratswithsyndromeofliverqistagnationandspleendeficiency），soastorevealthebiologicalfeaturesofthesyndromeofliverqistagnationandspleendeficiency，andtoexaminepotentialapplicationofmetabonomicanalysisinstudiesofsyndromesintraditionalChinesemedicine．

Methods：Twenty�瞗ourmaleSprague�睤awleyratswererandomlydividedintofourgroups：groupA，７dnor�瞞alcontrolgroup；groupB，２１dnormalcontrolgroup；groupC，７dstressgroup；andgroupD，２１dstressgroup，with６ratsineachgroup．Chronicrestraintwasusedtoinducestressinrats．Bloodwascollectedfromthecardio�瞯entricleunderanesthesiaonthe８th（groupsAandC）or２２ndday（groupsBandD）andde�瞭ectedbyusingtheFouriervariablesuperconductingnuclearmagneticresonance（NMR）spectrometer（Vari�瞐nUnityInova６００M）．Freeinductiondecaysignalsweretransferredintoone�瞕imensionalNMRspectrogramvia３２kFouriertransformation．Segmentalintegralcalculus（０．０４ppmpersegment）wasperformedfrom４．５�玻埃�５ppm（Carr�睵urcell�睲eiboom�睪ill，CPMG）or６．０�玻皃pm（longitudinaleddy�瞕elay，LED）asdefaulted１

HspectravaluesbyusingtheVNMRsoftware．Dataweresavedastextorexcelfilesafternormalizationandthenusedforpatternrecognitionanalyses．Allthedatawereanalyzedbyprincipalcomponentanalysis（PCA）usingtheSIMCA�睵１０．０software（UmetricsAB，Umea，Sweden）．

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No．３０６７２５７８）

Correspondence：Jia�瞲uCHEN，MD，Professor；Tel：０１０�玻叮矗玻福罚埃罚矗籈�瞞ail：chenjiaxu＠hotmail

．com

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中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)２００７年５月第５卷第３期　JournalofChineseIntegrativeMedicine，May２００７；Vol．５，No．３

１

Results：ThePCAanalysisofratplasmaHNMRspectrarevealeddifferentmetabolicspectrabetweenstress

andcontrolgroups，whichwereconsistentwithalterationsofinvivometabolismsinratsunderstressstimuli．Comparedwiththenormalcontrolgroup，ratswithrepeatedstressdisplayedsignificantchangesinspectralpeakshapesofacetate，lactate，tyrosine，low�瞕ensitylipoprotein，andunknowncompounds（３．４４ppm）．Thesealteredmetabolitescanbeusedasbiomarkersofsyndromeofliverqistagnationandspleendeficiencyforfurtherstudies．

１

Conclusion：TheHNMRspectraofmetabolitesintheratbloodaredifferentiallychangedafterchronicstress．Specific，characteristicmetabolicproductscanbeidentifiedbyanalysesofmetabonomics，whichleadtointerpretationofbiologicalfeatureofChinesemedicinesyndromes．Therefore，metabonomicanalysisisanapproachwithgooddevelopmentprospectstostudiesofTCMsyndromes．

Keywords：metabonomics；patternrecognition；nuclearmagneticresonance；traditionalChinesemedicine；rats

LuoHG，DingJ，YueGX，ChenJX．JChinIntegrMed／ZhongXiYiJieHeXueBao．２００７；５（３）：３０７�玻常保常甊eceivedDecember６，２００６；publishedonlineMay１５，２００７．Freefulltext（PDF）isavailableatwww．jcimjournal．com

　　代謝組學(xué)是繼基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)之后新近發(fā)展起來(lái)的一門學(xué)科，是系統(tǒng)生物學(xué)的重要組成部分。它主要研究生物對(duì)外源性物質(zhì)所引起的病理生理反應(yīng)，以及對(duì)遺傳變異的應(yīng)答和內(nèi)源性代謝物的動(dòng)態(tài)變化，通過(guò)對(duì)生物體液和組織中隨時(shí)間改變的代謝物進(jìn)行檢測(cè)、確定、定量和分類，將這些代謝信息與病理生理過(guò)程中的生物學(xué)事件關(guān)聯(lián)起來(lái)，以監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中的化學(xué)變化。

本課題組用慢性束縛應(yīng)激大鼠模型，以動(dòng)物行為學(xué)評(píng)定和以方測(cè)證等方法確定該模型為肝郁脾虛證候模型，運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù)開(kāi)展中醫(yī)證候?qū)W的研究，試圖通過(guò)對(duì)中醫(yī)病證引起的代謝物的共性分析和生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)，尋找中醫(yī)證候的生物學(xué)本質(zhì)，促進(jìn)中醫(yī)辨證的科學(xué)化和定量化，將代謝組學(xué)技術(shù)和中醫(yī)藥學(xué)的研究結(jié)合起來(lái)，探索出中醫(yī)藥復(fù)雜理論體系研究的新方法與新途徑。1　材料與方法

１．１　動(dòng)物與分組　實(shí)驗(yàn)用二級(jí)雄性SD大鼠２４只，體質(zhì)量（２００±２０）g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心，合格證號(hào)為SCXK�簿�２００２�玻埃埃埃场＿m應(yīng)性飼養(yǎng)３d后隨機(jī)分為：７d正常對(duì)照組（A組）、２１d正常對(duì)照組（B組）、７d模型組（C組）和２１d模型組（D組）４組，每組各６只。動(dòng)物每籠６只群養(yǎng)，飼養(yǎng)于普通級(jí)動(dòng)物房，室內(nèi)溫度保持為（２２±２）℃，相對(duì)濕度保持為３０％～４０％，各組大鼠喂常規(guī)飼料，自由進(jìn)食飲水。

１．２　造模方法　以慢性束縛方法制作大鼠肝郁脾虛證模型，將大鼠束縛于特制的束縛架上（T型束縛臺(tái)：底座寬１０cm、長(zhǎng)２０cm、厚２．８cm，上端束縛臺(tái)長(zhǎng)２２cm，最寬處６．６cm，前端有固定頭部的小架和適合四肢放置的凹槽，上端束縛臺(tái)有３條可調(diào)的軟

帶，兩寬一窄，分別在頭頸部、胸腰和腰背固定），３h／d，C組連續(xù)７d，D組連續(xù)２１d，隨機(jī)選取束縛時(shí)間點(diǎn)。整個(gè)束縛過(guò)程中動(dòng)物在同一環(huán)境中，不予以進(jìn)水和食物。正常對(duì)照組均散養(yǎng)于各自的飼養(yǎng)箱中３h。

１．３　取材與處理

［１，２］

　分別于第８天和第２２天清

晨８時(shí)，用２％戊巴比妥鈉４０mg／kg腹腔注射進(jìn)行深度麻醉，手術(shù)剪剖開(kāi)胸腔，用注射器穿刺左心室取血漿，采集血漿后于－２０℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

核磁共振（nuclearmagneticresonance，NMR）測(cè)量前樣品準(zhǔn)備：取出血漿，常溫解凍，用德國(guó)Ep�玻保癿in），取上清３００μl，添加０．１％２，２，３，３，三甲基甲硅烷基丙酸｛３�玻╰rimethylsiyl）［２，２，３，３�睭４］

２

pendorf公司產(chǎn)５４２４型離心機(jī)離心（１４０００r／min，

５mm樣品管中，混勻，于４℃冰箱保存，備用。

propionate，TSP｝重水溶液１００μl、２００μlD２O于

１．４　NMR數(shù)據(jù)采集　在軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)分析中心核磁共振實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)，２７℃條件下，在VarianUnityInova６００M超導(dǎo)傅立葉變化核磁共振波譜儀上調(diào)用弛豫時(shí)間編輯（Carr�睵urcell�瞖ddy�瞕elay，LED）相關(guān)脈沖序列，采用預(yù)飽和方式Meiboom�睪ill，CPMG）和擴(kuò)散編輯（longitudinal

抑制水峰，飽和時(shí)間為２s，混合時(shí)間為０．１５s，譜寬８０００Hz，采樣點(diǎn)數(shù)３２k，累加次數(shù)６４次，預(yù)飽和頻

率和中心頻率都在水峰位置。自由感應(yīng)衰減（freeinductiondecay，F(xiàn)ID）信號(hào)經(jīng)過(guò)３２k傅立葉變換轉(zhuǎn)為一維NMR譜圖。以TSP為化學(xué)位移參考峰的位置，設(shè)為０ppm。調(diào)用VNMR軟件中的程序?qū)?/p>

１

６．０～０ppm（LED），每段為０．０４ppm，進(jìn)行分段積分。將積分?jǐn)?shù)據(jù)歸一化之后，以文本文件或Excel文件貯存，用于模式識(shí)別分析。

H譜按默認(rèn)值，分別從４．５～０．５ppm（CPMG）以及

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中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)２００７年５月第５卷第３期　JournalofChineseIntegrativeMedicine，May２００７；Vol．５，No．３

１．５　主成分分析　將積分值進(jìn)行中心化和比例換算Umea，用）SIM進(jìn)C行A�仓鱌成１０分．０軟件包分析（（瑞典principal，Umetcoricsmponent

AB，analynentssis，P，CPC），利A）用，求PC出對(duì)主各成組大分鼠（principal清的代compo謝組分

�策M(jìn)行分析，必要時(shí)進(jìn)行判別分血析（partialleastsquaresdiscriminateanalysis，PLS�睤S）。2　結(jié)　果

２．１　四組動(dòng)物血清１

HNMR圖譜　見(jiàn)圖１。

圖1　四組動(dòng)物血清的典型1HNMR譜圖

Figure1　Serumspectraof600�睲Hz1HNMRin4groups

A：GroupcontA（７roldgronormD：upGroup）al；controClgroup）；B：GroupB（２１dnormal

D：Gro（２１updCstress（７dgrostressup）．

group）；

２．２　時(shí)點(diǎn)相同的正常對(duì)照組與模型組動(dòng)物血清１

NMR譜模式識(shí)別分析　A、C兩組動(dòng)物血清LED

H

實(shí)驗(yàn)１

LED實(shí)驗(yàn)表明HNMR譜的波峰積分值的：A、C兩組大致以tP５CA軸分結(jié)果見(jiàn)圖開(kāi)，A組２樣

。本中極低密度脂蛋白（verylowdensitylipoprotein，LDVLDLL）（）０和．８７低、密０．９１度脂、０蛋．９５白（和low０．９９）density、高密lipopro度脂蛋tein白，

（highdensitylipoprotein，HDL）（０．８３）、膽堿

（３．２３和３．２７）、N�惨阴Ｌ堑鞍祝∟�瞐cetyl�瞘lycopro�瞭ein長(zhǎng)鏈脂肪，NAC酸）（１NA．３１C１（２、１．２３．０７）、１等．２７化、１合．３６物和含量１．較３９）高、NAC；C組

２（２．１５）以及１．５９ppm處未知化合物含量較高。峰積分值的B、D兩組動(dòng)物血清PCA結(jié)果見(jiàn)L圖ED３實(shí)驗(yàn)１

。B、DH兩N組M樣本R譜的間波

沿t中４軸方向基本LDL（０．８７、分開(kāi)０．９１。和從因１．２７）子載以及荷圖上化學(xué)看位移，B在組樣４～本５左右的含氧脂肪酸、不飽和脂肪酸等化合物的含量較高；D組樣本中LDL含量不高，NAC１（２．０７）、

酸含量較高NAC２（２．１６）。

及化學(xué)位移在１～３之間的飽和脂肪

波峰積分值的A、C兩組動(dòng)物血清PLS�睤A結(jié)果見(jiàn)圖CPMG實(shí)４驗(yàn)１。CHPMNGMR實(shí)驗(yàn)結(jié)譜的

果表明，A組和C組組內(nèi)樣本間個(gè)體差異較大，且點(diǎn)c５與其他點(diǎn)有明顯差異。在排除點(diǎn)c５的基礎(chǔ)上

進(jìn)行PLS�睤S。從得分圖中可以看出，A、C兩組可被圖中所示虛線大致分開(kāi)。從因子載荷圖中可以看出，A組樣本中乳酸（１．３６、１．３８、１．４、４．１６和４．１２）、丙氨酸（１．４４）、脂類化合物（０．９２和１．３６）、血糖（３～４）、NAC２（２．１６）以及谷氨酸（２．４）含量較高；而C組樣本中NAC１（２．０８）、小分子化合物（１．１２）以及乙醇和１．２ppm與３．４ppm所代表的未知化合物含量較高。兩組都未能分開(kāi)B和D組進(jìn)行的。

CPMG實(shí)驗(yàn)，PLS�睤S和PCA

２．３　不同時(shí)點(diǎn)的正常對(duì)照組組間和模型組組間的動(dòng)物血清１

物血清LEDH實(shí)驗(yàn)NMR１H譜模NM式R識(shí)譜的波峰積分值的別分析　A、B兩組PC動(dòng)結(jié)果見(jiàn)圖５。LED實(shí)驗(yàn)表明：A、B兩組被圖中所示A

虛線較好地分開(kāi)。因子載荷圖結(jié)合原始圖譜分析，和A組樣本中１．３５）、膽V堿LDL（３．２３和LDL、３．２７）（０．以８７及、０不．９１飽、１和．２７脂、肪１．酸３１（１．９９、５．３１和５．３５）等化合物含量較高；B組僅化學(xué)位移在３～４之間的可能為含氧脂肪酸的化合物含量較高。

峰積分值的C、D兩組動(dòng)物血清PCA結(jié)果見(jiàn)LE圖D６實(shí)驗(yàn)１。C、DH兩N組M分組R譜的趨波勢(shì)明顯，但是點(diǎn)c６與本組其他樣本間有明顯不同。排除c６后仍進(jìn)行PCA分析，得分圖中可看出，C、D兩組沿t１軸能較好地分開(kāi)，因而t１軸方向表示組間差異；各組內(nèi)樣本沿t２軸方向散開(kāi)，因而t２軸方向表示組內(nèi)差異。因子載荷圖結(jié)合原始譜圖分析，C組樣本中VLDL和LDL（０．８７、０．９１、１．２７、１．３１和１．３５）、膽堿（３．２３、３．２７）以及不飽和脂肪酸（５．３１、５．３５）等化合物含量較高；而D組中僅化學(xué)位移在３～４之間的可能為含氧脂肪酸的化合物和NAC含量較高。

A、B兩組動(dòng)物血清CPMG實(shí)驗(yàn)１

波峰積分值的PCA結(jié)果見(jiàn)圖７。CPMHGN實(shí)M驗(yàn)表明R譜的

，，子載荷圖中可以看出A、B兩組樣本可被如，圖所A組樣本中乳酸示虛線大致分（１．開(kāi)３６）。、蘇氨從因

酸（１．３２）、脂類化合物（０．９２、０．９６）、丙氨酸（１．５２）、小分子化合NAC１（２．０８）物、含３�擦u基丁酯量較高；而（１B．２８）組以及樣本中２～血３糖之間（３的～４）、谷氨酸（２．４４）、醋酸（１．９６）及１．４８ppm和

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中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)２００７年５月第５卷第３期　JournalofChineseIntegrativeMedicine，May２００７；Vol．５，No．３

１．２４ppm處所表示的未知化合物含量較高。波峰積分值的PCA結(jié)果見(jiàn)圖８。C、D兩組樣本沿t２軸顯示出一定的分組趨勢(shì)，但兩組內(nèi)樣本間差異太大，而且c５和d１兩樣本與其他樣本間有明顯不同。排除c５和d１后對(duì)剩余數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA分析，從得分圖中可看出，兩組樣本被圖中所示虛線分開(kāi)。從因子載荷圖中可看出，C組樣本中脂類化合物（０．９６、０．８９、０．９２、１．３２和１．３６）、血糖（３～４）、３．４ppm處所表示的化合物含量較高；D組樣本中NAC１（２．０８）、NAC２（２．２），以及１．２４ppm和

C、D兩組動(dòng)物血清CPMG實(shí)驗(yàn)HNMR譜的

１

乳酸（１．４、４．１６）、醋酸（１．９６）、膽堿（３．２４）、１．４８ppm等處化合物含量較高。

２．４　對(duì)１HNMR圖譜及模式識(shí)別的進(jìn)一步分析　

各正常對(duì)照組圖中主成分積分值基本集中分布于橢圓形散點(diǎn)圖（９５％置信區(qū)內(nèi)）的４個(gè)區(qū)域，各正常對(duì)照組間無(wú)明顯交叉和重疊。對(duì)其進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，

與正常對(duì)照組相比，C、D兩組中醋酸（１．９９、４．１２、４．１６）及３．４４ppm的未知化合物的譜峰相對(duì)積分面積明顯增高而乳酸（１．３４）、酪氨酸（６．９５、７．２７）和明顯下降。見(jiàn)圖１、２、３和

４。

LDL（０．８７、０．９、０．９５和０．９９）的譜峰相對(duì)積分面積

圖2　A、C兩組血清代謝組PCA分值（t［4］vst［5］）散點(diǎn)分布和因子載荷（p［4］vsp［5］）圖（擴(kuò)散編輯）Figure2　PCAscore（t［4］vst［5］）andloading（p［4］vsp［5］）plotsforgroupsAandCserumspectra（LED）

A：GroupA（７dnormalcontrolgroup）；C：GroupC（７dstressgroup）．

圖3　B、D兩組血清代謝組PCA分值（t［3］vst［4］）散點(diǎn)分布和因子載荷（p［3］vsp［4］）圖（擴(kuò)散編輯）Figure3　PCAscore（t［3］vst［4］）andloading（p［3］vsp［4］）plotsforgroupsBandDserumspectra（LED）

B：GroupB（２１dnormalcontrolgroup）；D：GroupD（２１dstressgroup）．

圖4　A、C兩組血清代謝組PLS�睤S分值（t［1］vst［2］）散點(diǎn)分布和因子載荷（w�砪［1］vsw�砪［2］）圖（弛豫編輯）Figure4　PCAscore（t［1］vst［2］）andloading（w�砪［1］vsw�砪［2］）plotsforgroupsAandCserumspectra（CPMG）

A：GroupA（７dnormalcontrolgroup）；C：GroupC（７dstressgroup）．

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中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)２００７年５月第５卷第３期　JournalofChineseIntegrativeMedicine，May２００７；Vol．５，No．３

圖5　A、B兩組血清代謝組PCA分值（t［1］vst［2］）散點(diǎn)分布和因子載荷（p［1］vsp［2］）圖（擴(kuò)散編輯）Figure5　PCAscore（t［1］vst［2］）andloading（p［1］vsp［2］）plotsforgroupsAandBserumspectra（LED）

A：GroupA（７dnormalcontrolgroup）；B：GroupB（２１dnormalcontrolgroup）．

圖6　C、D兩組血清代謝組PCA分值（t［1］vst［2］）散點(diǎn)分布和因子載荷（p［1］vsp［2］）圖（擴(kuò)散編輯）Figure6　PCAscore（t［1］vst［2］）andloading（p［1］vsp［2］）plotsforgroupsCandDserumspectra（LED）

C：GroupC（７dstressgroup）；D：GroupD（２１dstressgroup）．

圖7　A、B兩組血清代謝組PCA分值（t［2］vst［3］）散點(diǎn)分布和因子載荷（p［2］vsp［3］）圖（弛豫編輯）Figure7　PCAscore（t［2］vst［3］）andloading（p［2］vsp［3］）plotsforgroupsAandBserumspectra（CPMG）

A：GroupA（７dnormalcontrolgroup）；B：GroupB（２１dnormalcontrolgroup）．

圖8　C、D兩組血清代謝組PCA分值（t［1］vst［2］）散點(diǎn)分布和因子載荷（p［1］vsp［2］）圖（弛豫編輯）Figure8　PCAscore（t［1］vst［2］）andloading（p［1］vsp［2］）plotsforgroupsCandDserumspectra（CPMG）

C：GroupC（７dstressgroup）；D：GroupD（２１dstressgroup）．

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