發(fā)布時(shí)間：2020-07-09 10:45

【摘要】：目的:研究山楂有機(jī)酸對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用是否通過抑制HIF-1α,抑制凋亡及調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的,并探討該作用是否通過激活PI3K/Akt、MAPK傳導(dǎo)通路而起作用。方法:體外實(shí)驗(yàn):1.將正常生長的H9c2細(xì)胞隨機(jī)分為6組:Control組、H_2O_2組、H_2O_2+NAC組和H_2O_2+山楂有機(jī)酸(高、中、低濃度)組。心肌細(xì)胞在H_2O_2 100μmol/L刺激2 h后,采用MTS法檢測細(xì)胞增殖吸光值,利用標(biāo)準(zhǔn)試劑盒測定細(xì)胞內(nèi)Caspase 3和Caspase 9的酶活性,以及流式細(xì)胞術(shù)測定H9c2細(xì)胞的凋亡率,Western blot檢測H9c2細(xì)胞中p-NF-κB/NF-κB蛋白水平的表達(dá)。2.實(shí)驗(yàn)分組:Control組、H_2O_2組、山楂有機(jī)酸預(yù)給藥組(給藥組)、ERK激動(dòng)劑組、JNK抑制劑組、PI3K抑制劑組。H9c2細(xì)胞在抑制劑或激動(dòng)劑處理之后,用山楂有機(jī)酸預(yù)處理2 h后,加入H_2O_2 100μmol/L作用2 h后,采用MTS法檢測細(xì)胞增殖吸光值,利用試劑盒測定細(xì)胞內(nèi)Caspase 3的酶活性。體內(nèi)實(shí)驗(yàn):將正常飼養(yǎng)的SD大鼠隨機(jī)分成4組:Sham組、I/R組、山楂有機(jī)酸給藥+I/R組、山楂有機(jī)酸預(yù)給藥+Sham組。Western blot檢測心肌組織中HIF-1α、Bcl-2及Bax蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果:體外實(shí)驗(yàn):1.山楂有機(jī)酸對H_2O_2誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用與Control組相比,給予H_2O_2刺激2 h后的心肌細(xì)胞數(shù)量顯著減少;與H_2O_2組相比較,H_2O_2+山楂有機(jī)酸組使H9c2心肌細(xì)胞數(shù)量增加,并在6.25μg/ml、25μg/ml時(shí)效果及重復(fù)性最好,H_2O_2+NAC組也具有顯著效果。2.山楂有機(jī)酸對H_2O_2誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)蛋白的影響與Control組相比,H_2O_2組細(xì)胞數(shù)量凋亡增加,Caspase 3及Caspase 9酶活性增強(qiáng),p-NF-κB的蛋白表達(dá)增強(qiáng)。與H_2O_2組相比較,山楂有機(jī)酸組凋亡細(xì)胞數(shù)量減少,Caspase 3及Caspase 9酶活性減少,p-NF-κB的蛋白表達(dá)降低。3.山楂有機(jī)酸對H_2O_2誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞PI3K/Akt、MAPK、JNK信號通路的影響與Control組相比,H_2O_2組細(xì)胞數(shù)量減少,Caspase 3酶活性顯著升高,與H_2O_2組相比較,山楂有機(jī)酸組細(xì)胞數(shù)量增加,Caspase 3酶活性顯著降低,與山楂有機(jī)酸預(yù)給藥組比較,ERK激動(dòng)劑、JNK抑制劑、PI3K抑制劑細(xì)胞數(shù)量明顯減少,Caspase 3酶活性顯著升高。體內(nèi)實(shí)驗(yàn):1.山楂有機(jī)酸對心肌缺血再灌注損傷的作用與Sham組比較,模型組大鼠心肌組織HIF-1α的蛋白表達(dá)明顯增加;Bcl-2的蛋白表達(dá)顯著減少;Bax蛋白表達(dá)顯著升高;給藥組與模型組相比,HIF-1α的蛋白表達(dá)明顯減少;Bcl-2的蛋白表達(dá)顯著增加;Bax的蛋白表達(dá)顯著下降。結(jié)論:山楂有機(jī)酸抗心肌缺血再灌注損傷作用可能與調(diào)控缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1α、抑制凋亡及凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2/Bax和激活PI3K/Akt、MAPK信號通路有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：江西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

圖 1：不同濃度 H2O2對 H9c2 心肌細(xì)胞存活率的影Effect of different concentrations of H2O2on the survivcardiomyocytes注：與 Control 組比較***P<0.001。

圖 2：山楂有機(jī)酸對 H2O2誘導(dǎo)的 H9c2 細(xì)胞損傷的保護(hù)作用 2: Protective effect of Organic Acids of Crataegus pinnatifida oinduced H9c2 cell injury與 Control 組比較 *** P<0.001；與模型組比較##P<0.01，### P<0.0

山楂有機(jī)酸對H2O2誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞損傷凋亡的影響

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張廣全;;空腹有些食物不能吃[J];老同志之友;2017年08期

2 ;孕產(chǎn)[J];時(shí)尚育兒;2017年10期

3 郭娜;孫云朝;王驍;;山楂抗癌機(jī)制的研究進(jìn)展[J];湖南中醫(yī)雜志;2019年06期

4 呂榮華;;山楂雖好,食之有度[J];健康生活;2018年02期

5 陳江萍;;橘皮山楂軟糖的制作工藝研究[J];中國果菜;2019年01期

6 ;山楂(文獻(xiàn)綜述)[J];中草藥通訊;1975年05期

7 丁兆平;;山楂更可化瘀滯[J];家庭中醫(yī)藥;2018年09期

8 丁兆平;;冰糖葫蘆——山楂的代名詞[J];家庭中醫(yī)藥;2018年12期

9 陳璧州,譚鋒,陳縈,喬東;山楂酸奶的研制[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2003年05期

10 何峰;張雪蓮;溫祥臣;;山楂酸對高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝模型小鼠炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激的影響[J];中國藥房;2019年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前3條

1 陳龍勝;許舒雯;忻e

本文編號：2747342