發(fā)布時(shí)間：2020-07-02 10:31

【摘要】：目的:通過(guò)觀察升降散對(duì)自身免疫性腦脊髓炎大鼠臨床癥狀、病理改變、以及免疫炎性因子和Nogo-A水平的影響,來(lái)探討它對(duì)該病的抗炎效果和神經(jīng)保護(hù)作用,從而為多發(fā)性硬化的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將32只WWistar雌性大鼠分成正常組、模型組、激素組、中藥組,利用豚鼠脊髓勻漿作為大鼠致敏抗原,制成EAE模型。正常組、模型組以生理鹽水灌胃,激素組以及中藥組分別予醋酸潑尼松、升降散灌胃。用藥從造模當(dāng)天開(kāi)始,并每天給大鼠稱(chēng)重、進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分。用藥16天后將大鼠處死并收集血清及腦脊髓組織。ELISA法測(cè)定血清中IL-33和IL-35含量,QPCR法檢測(cè)腦和脊髓中TLR-4的表達(dá),免疫組化法觀察脊髓組織中Nogo-A含量,進(jìn)行HE組織染色觀察組織炎性浸潤(rùn)程度。結(jié)果:神經(jīng)功能評(píng)分:正常組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分始終為0,其余三組大鼠的神經(jīng)功能評(píng)分在實(shí)驗(yàn)前期先逐漸下降,其后有出現(xiàn)緩慢回升的趨勢(shì)。相比于正常組,三個(gè)EAE組的大鼠評(píng)分更高,各組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。相比于模型組,治療組的神經(jīng)功能評(píng)分更低,組間差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而中藥組評(píng)分相對(duì)較激素組更低(P0.05)。潛伏期:相比于模型組,治療組大鼠的潛伏期明顯更短,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而中藥組則明顯較激素組更短(P0.05)。高峰期:各組大鼠發(fā)病的高峰期在統(tǒng)計(jì)學(xué)上卻無(wú)明顯差異(P0.05)。體重:正常組大鼠的體重一直持續(xù)增長(zhǎng),其余三組大鼠體重均在前期出現(xiàn)下降,在后期則緩慢回升。體重下降值:激素組與模型組比較,大鼠體重下降的差異并不明顯(P0.05),而中藥組下降的數(shù)值則明顯較模型組少,且兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。IL-33:與正常組作對(duì)比,三個(gè)EAE組大鼠的IL-33含量均升高,其差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而兩個(gè)治療組與模型組比較,各自的含量均明顯更低,差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。但兩個(gè)治療組之間比較卻無(wú)明顯差異。IL-35:與正常組作對(duì)比,三組EAE大鼠的IL-35含量明顯降低,其組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而兩個(gè)治療組與模型組比較,治療組的含量更高,組間差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。但兩個(gè)治療組之間比較卻無(wú)明顯差異。TLR-4:與正常組作對(duì)比,三組EAE大鼠的TLR-4含量明顯升高,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。兩個(gè)治療組的含量明顯低于模型組,其差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。然而兩個(gè)治療組之間比較卻無(wú)明顯差異。Nogo-A:與正常組比較,三組EAE大鼠的Nogo-A含量明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。相比于模型組,我們發(fā)現(xiàn)兩個(gè)治療組的含量相對(duì)較低,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。然而兩個(gè)治療組之間比較卻無(wú)明顯差異。HE染色:三組EAE大鼠組織切片中均出現(xiàn)了不同程度的炎細(xì)胞浸潤(rùn)及髓鞘脫失。與正常組比較,三組EAE大鼠的病理評(píng)分明顯更高,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。兩個(gè)治療組與模型組比較,其HE評(píng)分均明顯更低,各者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。然而中藥組與激素組之間則無(wú)明顯差異。結(jié)論:升降散可以延遲EAE大鼠的發(fā)病及減輕疾病的嚴(yán)重程度,此外還能降低EAE大鼠IL-33的含量,減少神經(jīng)組織中TLR4和Nogo-A的表達(dá),并同時(shí)提升IL-35的含量。上述結(jié)果均說(shuō)明升降散具有減輕EAE的炎癥反應(yīng)和保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損傷的作用,這提示升降散具備治療多發(fā)性硬化的潛力。
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5

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