【摘要】：液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)將液相色譜法的高效分離能力和質(zhì)譜法的定性優(yōu)勢有機結(jié)合在一起,尤其是以大氣壓電離為接口的LC-MS技術(shù)已經(jīng)在醫(yī)藥學、生物化學、環(huán)境化學等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用,并促進了相關(guān)學科的發(fā)展。本文針對多種中藥及生物轉(zhuǎn)化的復雜體系,基于超高效液相色譜、電噴霧質(zhì)譜、高分辨飛行時間質(zhì)譜和串聯(lián)質(zhì)譜等技術(shù),進行了中藥成分分析和吲哚轉(zhuǎn)化特征組分識別的研究。建立了基于高效液相色譜-高分辨飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-TOF/MS)的分析方法,對中藥中復雜組分進行高分辨質(zhì)譜定性分析。以兩種狼毒(月腺大戟,狼毒大戟)的根為研究對象,針對其乙醇水提取液,優(yōu)化液相色譜分離條件,分別鑒定了狼毒大戟中55種化合物、月腺大戟中83種化合物,初步確定了未知組分的組成。二者都含有二萜類內(nèi)酯成分,而該類物質(zhì)被認為是狼毒具有抗腫瘤藥效的主要成分。分別建立了基于HPLC-TOF/MS和高效液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)的分析方法,同時對中藥中復雜組分進行快速定性和定量分析。以養(yǎng)心氏片和產(chǎn)復康顆粒為研究對象,基于HPLC-TOF/MS方法,共推測得到養(yǎng)心氏片中30種、產(chǎn)復康顆粒中24種化合物。利用已有的標準對照品,鑒別出養(yǎng)心氏片中16種、產(chǎn)復康顆粒中13種化學成分,并應(yīng)用HPLC-MS/MS方法分別對這些組分進行了定量分析。為中藥產(chǎn)品的質(zhì)量控制和藥理研究提供了技術(shù)支撐。建立了基于HPLC-MS/MS的定量方法,對產(chǎn)復康顆粒大鼠體內(nèi)藥代動力學進行了研究。以水蘇堿和益母草堿為指標物質(zhì),比較了二者在單獨給藥和產(chǎn)復康顆粒復方給藥時的藥代動力學差異。以產(chǎn)復康顆粒形式給藥比單一成分應(yīng)用生物利用度更高,更有利于藥理活性的發(fā)揮,從藥代動力學的角度揭示了中藥復方“減毒增效”的組方規(guī)律。建立了基于HPLC-TOF/MS的定性方法,開展了生物轉(zhuǎn)化特征產(chǎn)物識別研究。對苯酚降解菌PI1和PI2轉(zhuǎn)化吲哚合成靛藍的產(chǎn)物進行鑒定,檢測到4個m/z均為261.0670的物質(zhì),包括靛藍(C16H10N2O2)和紫色產(chǎn)物2-(7-氧-1H-吲哚-6(7H)-取代)吲哚-3-酮,并證實了中間產(chǎn)物靛紅和7-羥基吲哚的存在,推測出菌株P(guān)I1和PI2轉(zhuǎn)化吲哚的途徑。利用表面響應(yīng)法對菌株P(guān)I1和PI2合成靛藍的條件進行優(yōu)化,得到了菌株P(guān)I1和PI2合成靛藍的最優(yōu)條件,二者合成靛藍產(chǎn)量最高可達11.82± 0.30 mg/L和17.19± 0.49 mg/L。
【圖文】：

排除其它雜質(zhì)離子，可以大幅度降低化學噪聲和復雜基質(zhì)帶來的干擾，逡逑實用性更顯著，因此三重四極桿質(zhì)譜常常用來做痕量物質(zhì)的定量檢測。逡逑三重四極桿質(zhì)譜是三級四極式構(gòu)造（如圖１．２），Ｑ１用于質(zhì)量分離和提取，逡逑Ｑ２是碰撞室，Ｑ３用于產(chǎn)物離子檢測。與單四極桿相比，串聯(lián)四極桿的優(yōu)勢在于逡逑掃描模式的靈活性和良好的信噪比。邐？逡逑Ｑ１邐Ｑ２邐Ｑ３逡逑Ｉ邋邐邋）邋［邐）邋Ｉ邐）逡逑？邐？邋？邐ｗ邋Ｍ邐ＭＲＭ邋Ｉ逡逑？邐＾ｍ邐＾邋Ｓｉｇｎａｌ邋，逡逑？？邋＿邐＿邋—？｜邋．邋？邋ｖ邋？邋？邋＃邋ｗ邋＊邋？邋—？邋ｇ逡逑？邐邋？邋邐邐邋邐１１邋．逡逑Ｉ邋ｉｉ邋邋邋邋Ｈ．．．１．１．，．．．—Ｊ邋１邋ｉ邐丨丨丨丨丨Ｊ邐Ｔｉｍｅ逡逑Ｐａｒｅｎｔ邋ｉｏｎ邋Ｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ邐Ｆｒａｇｍｅｎｔ逡逑Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ邐Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ逡逑圖１．２三重四極桿質(zhì)譜示意圖逡逑Ｆｉｇ．邋１．２邋Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ邋ｄｉａｇｒａｍ邋ｏｆ邋ｔｒｉｐｌｅ邋ｑｕａｄｍｐｏｌｅ逡逑三重四極桿質(zhì)譜一般有６種常用的掃描模式，，見表１．２。不同掃描模式的特逡逑點和應(yīng)用范圍是不同的

ＱＴＲＡＰ技術(shù)就是在ＱＱＱ基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種混合型串聯(lián)質(zhì)譜儀。在硬逡逑件設(shè)計上，將ＱＱＱ的Ｑ３改為線性離子阱（ＬＩＴ），把四極桿和離子阱技術(shù)結(jié)合逡逑在一起（如圖１．３）。逡逑Ｓａｕｎａ邐Ｑｔ邋ｔｉｇｋ邋Ｐｒ？Ｍｕｒ＊邋！邋５Ｔ邐０１邐ＳＩ２邋ＩＱ２邋ＵＮＡＣ＾邋Ｃ？Ｂｍｍ邋Ｃｄｉ邋ｉ邋｝ＳＴ３邐０３邐ＥＭＴ邋ＢＪ５邋ＯＴＳＣＴＯｆｌ逡逑ＴｕｒｂｏＶ邐ＬＩＮＡＣ？邐二級四極桿邐丨逡逑丨，

本文編號：2591393