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對羥基苯甲酸甲酯和乙酯混合暴露對雌果蠅生殖及子代的影響

發(fā)布時間:2020-10-28 11:49
   對羥基苯甲酸酯是對羥基苯甲酸(PHBA)的一組烷基酯,因其抗菌特性被廣泛用于牙膏、毛發(fā)/剃須產(chǎn)品、化妝品、食品、藥品、食品包裝和工業(yè)產(chǎn)品等日用產(chǎn)品。對羥基苯甲酸酯的廣泛使用也使得人類時刻暴露于包括衣食和環(huán)境等各個方面。越來越多的研究表明,對羥基苯甲酸酯是一類內(nèi)分泌干擾物,對動物生殖會產(chǎn)生不良影響,已引起了對這類物質(zhì)使用的爭議。盡管現(xiàn)有的體內(nèi)外研究顯示對羥基苯甲酸酯有弱雌激素效應,但由于研究所限,它可能存在的雌激素危害還不清楚,需要對其生殖毒性進行深入研究,進一步確定對羥基苯甲酸酯暴露對生殖的影響。此外,對羥基苯甲酸酯類物質(zhì)通;旌鲜褂,防腐效果更好,因而,開展混合對羥基苯甲酸酯暴露實驗更為迫切,更貼近現(xiàn)實。本研究以黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)Canton-S品系為實驗材料,以對羥基苯甲酸酯類常用的對羥基苯甲酸甲酯(MP)和乙酯(EP)按質(zhì)量比1:1混合(MP+EP),通過對新羽化雌果蠅進行不同濃度組、不同天數(shù)暴露,從生理水平和分子水平上分析MP+EP對雌果蠅生殖的影響。設置對照組和3個MP+EP濃度組(300mg·L-1、700mg·L-1、1000mg·L-1),5 個不同暴露天數(shù)(5d、10d、15d、20 d、25 d),從生理方面檢測親代總產(chǎn)卵數(shù)、子代總產(chǎn)卵數(shù)、蛹化率、羽化率、生長周期;從分子方面檢測親代和子代生殖相關基因的表達。研究結(jié)果如下:1、新羽化雌果蠅親代暴露,親代300 mg·L-1組具有雌激素效應,促進產(chǎn)卵,生殖力較對照組增加,而700 mg·L-1和1000 mg·L-1組具有毒性效應,影響產(chǎn)卵,生殖力較對照組降低。子代各濃度組的總產(chǎn)卵數(shù)較對照組均減少,生殖力降低,說明對羥基苯甲酸酯類的毒性可能通過生殖方式傳遞給子代,有待進一步研究。親代比子代的總產(chǎn)卵數(shù)少,親代生殖力受暴露的影響較大。此外,對羥基苯甲酸酯因暴露天數(shù)不同親代和子代生殖力存在差異。2、新羽化雌果蠅親代暴露,對子代的蛹化率、羽化率和生長周期都有影響。與對照組相比,各濃度組的蛹化率均顯著降低,羽化率在700 mg·L-1和1000 mg·L-1組顯著降低。濃度組子代卵-蛹、卵-蠅的生長周期均有延長,其中700 mg·L-1組卵-蠅天數(shù)顯著延長。此外,隨著暴露天數(shù)的增加,濃度組的蛹化率和羽化率降低,子代生長周期延長。結(jié)果表明親代暴露影響到子代,而子代生長周期延長可能是對暴露的一種適應。3、新羽化雌果蠅親代暴露,對親代和子代生殖相關基因(LnR、AKT、TOR、YPR)的表達均產(chǎn)生影響。子代濃度組LnR、AKT和TOR基因表達均高于親代,而YPR基因表達則相反。隨著暴露天數(shù)增加,LnR、AKT、TOR和YPR基因表達呈波動變化,說明MP+EP通過紊亂生殖相關基因的表達影響其生殖。綜合各項實驗結(jié)果可知,MP+EP暴露雌果蠅親代,對親代與子代的生殖及子代生長均有影響。對羥基苯甲酸酯類各濃度組的作用不同,300mg·L-1組具有雌激素效應,生殖力增加;700mg·L-1和1000mg·L-1組則表現(xiàn)毒性效應,生殖力降低,發(fā)育延緩。此外,對羥基苯甲酸酯類物質(zhì)的作用隨暴露天數(shù)的增加也有所不同,可能通過營養(yǎng)信號通路作用于生殖,機制有待進一步深入探究。
【學位單位】:陜西師范大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2018
【中圖分類】:R114
【部分圖文】:

黑腹果蠅,卵巢


?人工飼養(yǎng),以瓊脂-酵母-玉米粉的培養(yǎng)基為食。黑腹果蠅的生命周期經(jīng)歷卵、幼蟲??(三個齡期)、蛹和成蟲四個主要發(fā)育階段’(圖1-1)。在25?°C,60%相對濕度??的條件下,一個完整的發(fā)育周期大約為10?d。通過控制培養(yǎng)的溫度,可以加速和??減緩黑腹果蠅的發(fā)育。??Embiyo?Larva?Pupa??^??圖i-i黑腹果蠅的發(fā)育周期[7{)]??Fig.?1-1?The?development?cycle?ofD.?melanogaster??新羽化的雌蠅大約8?h之后、雄蠅12?h即可進行交配。雌果蠅交尾后24?h即??可產(chǎn)卵且交尾一次便可終生產(chǎn)卵。每只雌蠅產(chǎn)卵初期每天可達50-70個,累計產(chǎn)卵??可達上千|71]。果蠅中樞祌經(jīng)系統(tǒng)一中央腦參與了嗅覺的學習和記憶、求偶以及運??動[72]。求偶行為對于果蠅的繁衍和其對環(huán)境的適應都是非常重要的,其中果蠅有??控制求愛行動的P1祌經(jīng)細胞[73],也有規(guī)范配偶的行為的性信息素CH503?[74]。生??殖對于果蠅是非常重要的生理活動,卵巢就是發(fā)揮主要作用的器官。大部分卵巢??組織起源于內(nèi)臟中胚層,原始生殖細胞PGCs?(GSCs的前體與體細胞性腺前體)??部分發(fā)育成卵巢[7 ̄7]。原始生殖細胞PGCs[78_83](生殖干細胞GSCs的前體)和性??腺體細胞(生態(tài)位細胞的前體)在幼蟲卵巢內(nèi)發(fā)育,它們一起形成卵巢的16-20??個niche-GSC單位[781

電泳圖,果蠅,電泳,內(nèi)參


M:?DL2000?marker;?1-2:?F〇?female;?3-4:?Fi?female??3.3.2溶解曲線和擴増曲線??圖3-2為黑腹果蠅及ZPi?基因的溶解曲線和擴增曲線。??內(nèi)參基因和待測的四個目的基因溶解曲線峰圖單一,并且起峰和落峰點穩(wěn)定。同??樣,內(nèi)參基因和待測的四個目的基因的擴增曲線的循環(huán)數(shù)都在同一個范圍,其擴??增的效果良好,可用于四個基因相對表達量的計算。??36??

擴增曲線,親代,果蠅,和子


3.3.3?MP+EP對雌果蠅親代和子代生殖相關基因表達量的影響??(1)對基因L?/?表達量的影響??如圖3-3a和圖3-3b分別為雌果蠅親代和子代基因的相對表達量。在雌果??蠅親代中
【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 李雅娟;趙曉俊;顧蔚;;對羥基苯甲酸酯暴露與乳腺癌患病風險研究進展[J];衛(wèi)生研究;2014年06期

2 趙曉俊;李雅娟;顧蔚;;對羥基苯甲酸乙酯對雄果蠅的生殖毒性[J];衛(wèi)生研究;2014年02期

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相關碩士學位論文 前9條

1 秦夢貝;對羥基苯甲酸甲酯和乙酯對果蠅攝食影響及其在體內(nèi)代謝研究[D];陜西師范大學;2017年

2 薛佩琴;MP和EP混合對雌果蠅親代和子代繁殖力的影響[D];陜西師范大學;2017年

3 潘晨光;對羥基苯甲酸甲酯和乙酯混合對雄果蠅生殖力影響及體內(nèi)積累研究[D];陜西師范大學;2016年

4 陳琦;對羥基苯甲酸甲酯和乙酯混合對果蠅繁育能力及壽命影響[D];陜西師范大學;2016年

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7 劉婷;對羥基苯甲酸乙酯對黑腹果蠅雌激素相關基因表達的影響[D];陜西師范大學;2013年

8 應瓊瓊;對羥基苯甲酸乙酯對黑腹果蠅壽命及凋亡相關基因reaper表達的影響[D];陜西師范大學;2012年

9 侯曉薇;對羥基苯甲酸丙酯對果蠅生殖及壽命影響的研究[D];陜西師范大學;2010年



本文編號:2860051

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