發(fā)布時間：2020-10-21 20:39

　　 糖皮質(zhì)激素具有抗炎、抗過敏等藥理作用,但過多攝入糖皮質(zhì)激素就會引發(fā)肥胖,高血壓,骨質(zhì)疏松等疾病。人類常見的癌癥、畸形、抗藥性、青少年早熟、中老年心血管疾病等問題均與畜禽產(chǎn)品中的抗生素、激素等藥物的殘留有關(guān)�，F(xiàn)在中國、日本和歐盟都對糖皮質(zhì)激素規(guī)定了最大殘留量,而且我國還將部分糖皮質(zhì)激素規(guī)定為違禁藥物。因此,建立一類靈敏、高效、可靠的糖皮質(zhì)激素檢測方法就顯得尤為重要。本文研究了丙酸倍氯米松、丁酸氫化可的松、苯丙酸諾龍幾種糖皮質(zhì)激素的高效液相色譜檢測法,主要研究內(nèi)容如下： 濁點萃取(CPE)-高效液相色譜法檢測糖皮質(zhì)激素的研究 1、超聲輔助濁點萃取(US-CPE)-HPLC檢測牛奶中糖皮質(zhì)激素的研究 建立超聲輔助濁點萃取(US-CPE)-高效液相色譜法檢測牛奶中的三種糖皮質(zhì)激素(丙酸倍氯米松,丁酸氫化可的松,苯丙酸諾龍)。本研究探討了TMN-6相變化分離過程,得到濁點萃取的最有條件為3%(v/v) TMN-6,3%(w/v) NaCl,在平衡溫度35℃平衡40mmin,最終富集因子為10。三種糖皮質(zhì)激素濃度在1-500ng mL-1范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好線性,檢測限分別為：丙酸倍氯米松0.10ng mL-1,丁酸氫化可的松0.13ng mL-1,苯丙酸諾龍0.17ng mL-1。方法的平均回收率大于90%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.5%-2.8%。 2、助乳化劑超聲輔助濁點萃取(CUS-CPE)-HPLC檢測尿液中糖皮質(zhì)激素的研究 本研究討論了四種濁點萃取體系(DC-193-壬酸,DC-193-硫酸鈉,DC-193-月桂酸和經(jīng)典的Triton X-100體系),表面活性劑DC-193本身濁點溫度較高,用助乳化劑壬酸來降低濁點,大大降低了濁點溫度,提高了回收率和富集倍數(shù)。優(yōu)化后最優(yōu)萃取條件為2.5%(v/v)DC-193,35kHz和65℃超聲30min,1mL壬酸,4000rpm離心3mmin,富集倍數(shù)達(dá)35。1-350ng mL-1范圍內(nèi),三種糖皮質(zhì)激素線性良好,檢測限為1.29-3.33ng mL-1,回收率高于85%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.3-2.7%。 液相微萃取(LPME)-高效液相色譜法檢測糖皮質(zhì)激素的研究1、表面活性劑超聲輔助分散液液微萃取(UA-DLLME)和衍生-高效液相色譜法檢測尿液和血液中糖皮質(zhì)激素的研究 以表面活性劑Triton X-100作為分散劑,四氯化碳作為萃取劑,水楊醛為衍生試劑連續(xù)進行萃取和衍生。對一些關(guān)鍵參數(shù)包括萃取劑和分散劑的性質(zhì)和用量,衍生試劑量,萃取時間和溫度的影響進行了研究。三種糖皮質(zhì)激素濃度在1-300ng mL-1線性良好。所有校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)均高于0.9993�；厥章蕿�80.36%-87.60%,富集系數(shù)為50, LOD為0.014-0.314ng mL-1,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.66%-2.72%。結(jié)果表明,該方法適用于人體尿液和血液樣品中微量糖皮質(zhì)激素的檢測。2、離子液體渦旋輔助協(xié)同微萃取(ILSVA-SME)-高效液相色譜法檢測環(huán)境水樣中糖皮質(zhì)激素的研究 本研究用1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽([BMIM] PF6)作萃取劑,非離子型表面活性劑的Triton X-100(TX-100)作協(xié)同試劑,在常溫下迅速完成萃取過程。與傳統(tǒng)的液液萃取(LLE)和濁點萃取(CPE)相比,該方法在8mmin內(nèi)完成,并且有較高的回收率(≥97.24%)。最后優(yōu)化的結(jié)果：三種激素在0.6-300ng mL-1的范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.997,檢測限為4.11-9.19ng mL-1,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.57-1.81%,富集倍數(shù)為99.85。該方法大大提高了靈敏度,縮短了分析時間,并得到了較高的富集倍數(shù),成功用于環(huán)境水樣中糖皮質(zhì)激素的檢測。三、超分子渦旋混合微萃取(SS-BVMME)-高效液相色譜法檢測環(huán)境水樣中糖皮質(zhì)激素的研究 該方法打破經(jīng)典的超分子溶劑的組成,用離子液體1-丁基-3甲基咪唑四氟硼酸鹽([BMIM]BF4)和正丁醇對糖皮質(zhì)激素在氫鍵和范德華力等驅(qū)動力的作用下進行分子識別和組裝,探討了溶液中氫鍵形成的相關(guān)理論并論證,結(jié)果優(yōu)化后有很合適的匹配性。該方法20mmin即完成檢測,三種激素在0.5-100ng mL-1的范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)均大于0.9971,檢測限為0.09925-2.428ng mL-1,回收率為88-103%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.6-4%。該方法成功應(yīng)用于環(huán)境水樣中糖皮質(zhì)激素的檢測。
【學(xué)位單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R155.5
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
插圖和附表清單
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 糖皮質(zhì)激素的檢測方法
        1.2.1 高效液相色譜法
        1.2.2 氣相色譜法
        1.2.3 液質(zhì)聯(lián)用法
        1.2.4 氣質(zhì)聯(lián)用法
        1.2.5 超臨界流體色譜聯(lián)用法
        1.2.6 免疫分析法
        1.2.7 毛細(xì)管電泳法
    1.3 糖皮質(zhì)激素殘留樣品前處理技術(shù)
        1.3.1 液-液萃取
        1.3.2 固相萃取
        1.3.3 基質(zhì)固相分散萃取技術(shù)
        1.3.4 超臨界流體萃取技術(shù)
        1.3.5 免疫親和色譜
        1.3.6 濁點萃取
        1.3.7 分散液液微萃取
        1.3.8 超分子萃取
    1.4 論文研究意義、內(nèi)容和創(chuàng)新點
        1.4.1 研究意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
        1.4.3 創(chuàng)新點
第二章 濁點萃取（CPE）-高效液相色譜法檢測糖皮質(zhì)激素的研究
    第一節(jié) 超聲輔助濁點萃�。║S-CPE）-HPLC檢測牛奶中糖皮質(zhì)激素的研究
        2.1 主要試劑與儀器
        2.2 實驗部分
        2.3 結(jié)果與討論
        2.4 小結(jié)
    第二節(jié) 助乳化劑超聲輔助濁點萃取（CUS-CPE）-HPLC檢測尿液中糖皮質(zhì)激素的研究
        2.1 主要試劑與儀器
        2.2 實驗部分
        2.3 結(jié)果與討論
        2.4 小結(jié)
第三章 液相微萃�。↙PME）-高效液相色譜法檢測糖皮質(zhì)激素的研究
    第一節(jié) 表面活性劑超聲輔助分散液液微萃�。║A-DLLME）和衍生-高效液相色譜法檢測尿液和血液中糖皮質(zhì)激素的研究
        3.1 主要試劑與儀器
        3.2 實驗部分
        3.3 結(jié)果與討論
        3.4 小結(jié)
    第二節(jié) 離子液體渦旋輔助協(xié)同微萃�。↖LSVA-SME）-高效液相色譜法檢測環(huán)境水樣中糖皮質(zhì)激素的研究
        3.1 主要試劑與儀器
        3.2 實驗部分
        3.3 結(jié)果與討論
        3.4 小結(jié)
第四章 超分子渦旋混合微萃�。⊿S-BVMME）-高效液相色譜法檢測環(huán)境水樣中糖皮質(zhì)激素的研究
    4.1 主要試劑與儀器
        4.1.1 主要試劑
        4.1.2 主要儀器
    4.2 實驗部分
        4.2.1 溶液的配制
        4.2.2 溶液的配制
        4.2.3 樣品前處理
        4.2.4 實驗方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 超分子溶劑的篩選
        4.3.2 超分子溶劑自組裝驅(qū)動力的研究
        4.3.3 實驗優(yōu)化
        4.3.4 方法學(xué)考察
        4.3.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄A 攻讀碩士期間發(fā)表論文目錄

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2850573