發(fā)布時間：2025-01-09 03:28

　　 目的:研究siRNA抑制高遷移率族蛋白-1(high mobility group protein box-1, HMGB1)表達對人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞增殖和凋亡的影響。方法:RT-PCR和Western blot檢測HMGB1在人視網(wǎng)膜母細胞瘤中的表達。體外化學合成靶向HMGB1 siRNA,RT-PCR和Western blot檢測其抑制效率。MTT法檢測HMGB1沉默后Y79細胞的增殖情況。Caspase-3活性檢測試劑盒檢測HMGB1沉默后Y79細胞的凋亡情況。采用流式細胞儀來分析細胞周期的分布以及細胞凋亡率的變化。結果:HMGB1 mRNA和蛋白在人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞中高表達,siRNA抑制HMGB1表達后,Y79細胞增殖抑制,促進凋亡。結論:抑制HMGB1的表達可以降低人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞的增殖,并促進其凋亡,為人視網(wǎng)膜母細胞瘤的生物學治療提供新的思路。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 細胞培養(yǎng)
    1.2 Real-time PCR
    1.3 Western blot
    1.4 RNA干擾
    1.5 細胞增殖抑制實驗
    1.6 Caspase-3活性檢測
    1.7 流式細胞儀分析細胞凋亡和細胞周期
    1.8 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 HMGB1 mRNA在各細胞系中的轉錄水平
    2.2 Western blot檢測HMGB1蛋白在各細胞系中的表達
    2.3 Real time-PCR 檢測siRNA抑制Y79細胞HMGB1 mRNA表達水平
    2.4 Western blot檢測siRNA抑制Y79細胞HMGB1蛋白表達水平
    2.5 MTT法檢測HMGB1 siRNA對Y79細胞增殖能力的影響
    2.6 沉默HMGB1誘導Y79細胞的Caspase-3激活作用
    2.7 HMGB1 siRNA 對Y79細胞周期的影響
    2.8 HMGB1 siRNA對Y79細胞凋亡的影響
3 討論



本文編號：4025078