發(fā)布時間：2024-05-26 20:37

　　目的闡述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是否參與了游離脂肪酸(FFA)誘導(dǎo)的細(xì)胞脂肪變性模型的脂變形成過程,并探討二甲雙胍對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的潛在影響。方法將HepG2細(xì)胞按培養(yǎng)液成分不同分為4組:空白對照組,二甲雙胍組,游離脂肪酸組以及干預(yù)組。HepG2細(xì)胞培養(yǎng)24h后,檢測細(xì)胞活力和脂質(zhì)含量。以反轉(zhuǎn)錄PCR和Western blotting檢測各組葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c(SREBP1c)表達(dá)水平。結(jié)果游離脂肪酸組誘導(dǎo)的細(xì)胞脂肪變性的HepG2細(xì)胞的甘油三酯、GRP78和SREBP1c的mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯升高。同時,干預(yù)組的甘油三酯、GRP78和SREBP1c的mRNA和蛋白的表達(dá)水平均有所下降,但是沒有顯著性差異。結(jié)論內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與了游離脂肪酸誘導(dǎo)的細(xì)胞脂肪變性模型的脂變形成過程。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能是非酒精性脂肪肝發(fā)病機(jī)制中新的干預(yù)靶點(diǎn)和治療靶點(diǎn)。

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【部分圖文】：

圖1.1NAFLD發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制161脂類在肝細(xì)胞的聚集是NAFLD的病理性標(biāo)志

圖1.1NAFLD發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制161脂類在肝細(xì)胞的聚集是NAFLD的病理性標(biāo)志。NAFLD的自然病程變化多樣，是遺傳易感一環(huán)境一行為因素相互作用的結(jié)果。由于一般認(rèn)為單純性脂肪肝階段不進(jìn)展，往往忽視對這個階段的防治。研究發(fā)現(xiàn)，約20%的單純性脂肪肝患者可以發(fā)展成脂肪性肝炎，這....

圖2.1正常HepGZ細(xì)胞油紅o染色xZoo細(xì)胞生長為不規(guī)則或卵園形，胞質(zhì)無明顯紅染或淡染

而加入了游離脂肪酸的模型組細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)發(fā)亮，可見較多油性物質(zhì)。經(jīng)過油紅染色發(fā)現(xiàn)，正常組HePGZ胞質(zhì)無明顯紅染或淡染，模型組細(xì)胞內(nèi)胞質(zhì)廣泛染色，為紅色脂滴，大而多。見圖2.1、2.20圖2.1正常HepGZ細(xì)胞油紅o染色xZoo細(xì)胞生長為不規(guī)則或卵園形，胞質(zhì)無明顯紅染或淡染

圖2.2FFA誘導(dǎo)HePGZ細(xì)胞油紅

圖2.2FFA誘導(dǎo)HePGZ細(xì)胞油紅。染色xZoo生長為不規(guī)則或卵園形，但胞質(zhì)廣泛染色，為紅色脂滴，:細(xì)胞大小不一，其內(nèi)線粒體小而多，峙完整且較多，少見脂見大量脂滴積累，細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)量較少，其內(nèi)峙數(shù)量減少體積很大的脂滴，細(xì)胞核被擠到邊上。見圖2.3、2.4。

圖2.3正常組HepGZ細(xì)胞電鏡圖xl000o細(xì)胞大小不一，其內(nèi)線粒體小而多，峙完整且較多，少見脂滴出現(xiàn)

正常組細(xì)胞大小不一，其內(nèi)線粒體小而多，峙完整且較多，少見脂滴出現(xiàn)。而模型組細(xì)胞，可見大量脂滴積累，細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)量較少，其內(nèi)峙數(shù)量減少。有些細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)了較多體積很大的脂滴，細(xì)胞核被擠到邊上。見圖2.3、2.4。圖2.3正常組HepGZ細(xì)胞電鏡圖xl000o細(xì)胞大小不一，其內(nèi)線粒體....

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