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ROS通過上調(diào)NEK7促進(jìn)NLRP3炎癥小體激活引起肝缺血再灌注損傷的機(jī)制研究

發(fā)布時間:2024-05-19 11:56
  目的:1.分析小鼠肝臟缺血再灌注(Ischemia and reperfusion,I/R)動物模型中,肝臟組織內(nèi)ROS和NEK7表達(dá)水平的相關(guān)性;2.觀察NEK7對I/R體內(nèi)模型中,NLRP3炎性小體相關(guān)蛋白表達(dá)、炎性因子分泌、肝臟功能、肝臟組織學(xué)改變和肝功能損傷程度的影響;3.探討NEK7參與ROS對肝臟庫普弗細(xì)胞(Kupffer cells,KCs)中NLRP3的調(diào)控作用以及其影響肝臟缺血再灌注損傷(Ischemia and reperfusion injury,IRI)的分子機(jī)制。方法:首先建立C57BL/6J小鼠肝I/R體內(nèi)模型及RAW264.7(KCs替代細(xì)胞株)經(jīng)缺氧復(fù)氧(Hypoxia and reoxygenation,H/R)處理的I/R體外模型。western-blot檢測肝組織相關(guān)蛋白表達(dá),ELISA檢測血清炎性因子IL-1β和IL-18的水平,微板法檢測血清AST和ALT的水平,DCFH-CA法標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)檢測肝臟組織中ROS的表達(dá),HE染色分析肝組織損傷,TUNEL染色評估肝臟組織細(xì)胞凋亡情況,免疫熒光雙標(biāo)NEK7和F4/80或CK18,觀察肝組織中NEK...

【文章頁數(shù)】:90 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1-1.C57BL/6J小鼠肝IRI模型的建立A:肝臟缺血前;B:夾閉肝十二指腸韌帶;C:缺血1h后

圖1-1.C57BL/6J小鼠肝IRI模型的建立A:肝臟缺血前;B:夾閉肝十二指腸韌帶;C:缺血1h后

圖1-1.C57BL/6J小鼠肝IRI模型的建立A:肝臟缺血前;B:夾閉肝十二指腸韌帶;C:缺血1h后Figure1-1.EstablishmentofliverIRImodelinC57BL/6Jmice.:Beforehepaticis....


圖1-2.小鼠血清中AST和ALT的表達(dá)Figure1-2.serumlevelofASTandALTinmice

圖1-2.小鼠血清中AST和ALT的表達(dá)Figure1-2.serumlevelofASTandALTinmice

圖1-1.C57BL/6J小鼠肝IRI模型的建立A:肝臟缺血前;B:夾閉肝十二指腸韌帶;C:缺血1h后Figure1-1.EstablishmentofliverIRImodelinC57BL/6Jmihepaticischemia;B:....


圖1-3.小鼠血清中IL-1β和IL-18的表達(dá)Figure1-3.serumlevelofIL-1βandIL-18inmice

圖1-3.小鼠血清中IL-1β和IL-18的表達(dá)Figure1-3.serumlevelofIL-1βandIL-18inmice

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文灌注時間對小鼠血清中炎性因子IL-1β和IL-18同再灌注時間對小鼠血漿炎性因子分泌的作用,我們3、I1R6和I1R9四組,用ELISA檢測小鼠血清中IL-1,與Sham相比,I1R3組IL-1β和IL-18的表達(dá)上調(diào),<....


圖1-4.小鼠肝臟組織中NEK7、NLRP3及Caspase-1的蛋白表達(dá)A:Western-blot檢測小鼠肝臟組織中NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的蛋白表達(dá);B:NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的半定量分析

圖1-4.小鼠肝臟組織中NEK7、NLRP3及Caspase-1的蛋白表達(dá)A:Western-blot檢測小鼠肝臟組織中NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的蛋白表達(dá);B:NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的半定量分析

圖1-4.小鼠肝臟組織中NEK7、NLRP3及Caspase-1的蛋白表達(dá)rn-blot檢測小鼠肝臟組織中NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的B:NEK7、NLLRP3和Cleaved-caspase-1的半定量分析gure1....



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