目的：①了解人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞系Bewo細(xì)胞HBV感染與TLR3蛋白表達(dá)的關(guān)系；②探討HBV刺激的Bewo細(xì)胞TLR3與其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)的關(guān)系；③探討TLR3和相關(guān)細(xì)胞因子在Bewo細(xì)胞抗HBV中的作用。方法：（1）培養(yǎng)人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞系Bewo細(xì)胞,分為PolyI:C（TLR3配體）刺激組及對(duì)照組Bewo細(xì)胞,采用FAC（流式細(xì)胞技術(shù)）測(cè)定的TLR3表達(dá)；（2）采用100μl HBV DNA含量為5.0×106 （copies/ml）的血清與Bewo細(xì)胞共培養(yǎng)作為HBV感染方法,設(shè)立三組：空白對(duì)照組,HBV刺激組,PolyI:C+HBV刺激組。于HBV刺激8 h、16 h、24 h、48h后收集培養(yǎng)上清及細(xì)胞進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)：①FACS測(cè)定空白對(duì)照組、HBV刺激組和PolyI::C+HBV刺激組Bewo細(xì)胞TLR3的表達(dá)以及不同刺激時(shí)間點(diǎn)的TLR3表達(dá)變化；②用ELISA法（酶聯(lián)免疫吸附法）檢測(cè)HBV刺激組和PolyI:C+HBV刺激組細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-β的含量；③用FQ-PCR（熒光定量PCR）檢測(cè)HBV刺激組及PolyI:C+... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Polyl:C刺激對(duì)BewoBewo細(xì)胞TLR3蛋白的表達(dá)

~~~HBV刺激組 組 PPPolyl:C+HBv刺激組 組圖1一 16Polyl:C對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)HBV刺激Bewo細(xì)胞TLR3蛋白表達(dá)的影響(a)...對(duì)照組 組...HBV刺激組 組口口Polyl:C+HBV刺激組 組圖1一 17Pofyl:C對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)HBv刺激Bewo細(xì)胞TLR3蛋白表達(dá)的影響(b)4:討論 4.1HBV刺激Bewo細(xì)胞TLR3蛋白的表達(dá)的研究丁LR3是較公認(rèn)的與病毒感染關(guān)系較為密切的一種病原體模式識(shí)別受體，在抗病毒免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[’51，其原理為病毒復(fù)制時(shí)產(chǎn)生的雙鏈RNA(dsRNA)是丁LR3的配體，下LR3能夠辨識(shí)當(dāng)病毒在感染的細(xì)胞內(nèi)復(fù)制產(chǎn)生dsRNA，產(chǎn)生抗病毒反應(yīng)，導(dǎo)致天然免疫系統(tǒng)活化I’“l(fā)。課題組前期研究已經(jīng)證實(shí)Bewo細(xì)胞HBv刺激前后TLR3m剛A的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，TLR3可能與HBV感染有關(guān)，本實(shí)驗(yàn)從蛋白水平表明與正常對(duì)照組相比，Bewo細(xì)胞與HBV共培養(yǎng)后TLR3表達(dá)量上升

~~~HBV刺激組 組 PPPolyl:C+HBv刺激組 組圖1一 16Polyl:C對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)HBV刺激Bewo細(xì)胞TLR3蛋白表達(dá)的影響(a)...對(duì)照組 組...HBV刺激組 組口口Polyl:C+HBV刺激組 組圖1一 17Pofyl:C對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)HBv刺激Bewo細(xì)胞TLR3蛋白表達(dá)的影響(b)4:討論 4.1HBV刺激Bewo細(xì)胞TLR3蛋白的表達(dá)的研究丁LR3是較公認(rèn)的與病毒感染關(guān)系較為密切的一種病原體模式識(shí)別受體，在抗病毒免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[’51，其原理為病毒復(fù)制時(shí)產(chǎn)生的雙鏈RNA(dsRNA)是丁LR3的配體，下LR3能夠辨識(shí)當(dāng)病毒在感染的細(xì)胞內(nèi)復(fù)制產(chǎn)生dsRNA，產(chǎn)生抗病毒反應(yīng)，導(dǎo)致天然免疫系統(tǒng)活化I’“l(fā)。課題組前期研究已經(jīng)證實(shí)Bewo細(xì)胞HBv刺激前后TLR3m剛A的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，TLR3可能與HBV感染有關(guān)，本實(shí)驗(yàn)從蛋白水平表明與正常對(duì)照組相比，Bewo細(xì)胞與HBV共培養(yǎng)后TLR3表達(dá)量上升

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞的感染和凋亡與HBV的宮內(nèi)傳播機(jī)制[J]. 白菡,張琳,何麗霞,馮國(guó)和,石理蘭,竇曉光,趙桂珍.  世界華人消化雜志. 2007(15)
[2]Toll樣受體3介導(dǎo)呼吸道合胞病毒感染人肺上皮細(xì)胞的炎性反應(yīng)及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路[J]. 云云,黃升海.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2007(21)
[3]乙肝病毒標(biāo)志物陽(yáng)性血清感染胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞的體外研究[J]. 張磊,邵晨,王安輝,門可,張景霞,邵中軍,閆永平,徐德忠,許文娟.  中國(guó)全科醫(yī)學(xué). 2007(09)
[4]正常和HBsAg陽(yáng)性孕婦胎盤中TLR3檢測(cè)分析[J]. 原琛利,王素萍,宋秀霞.  中國(guó)公共衛(wèi)生. 2007(03)
[5]HBsAg陽(yáng)性孕婦胎盤HBV感染狀況及危險(xiǎn)因素[J]. 李鐵鋼,王素萍,李淑珍,王效軍,馮永亮,薛淑蓮,雙潔玉,渠軼群.  中國(guó)公共衛(wèi)生. 2005(02)

博士論文
[1]Toll樣受體3與HBV感染和HBV宮內(nèi)感染的關(guān)系及其作用機(jī)制的研究[D]. 宋秀霞.山西醫(yī)科大學(xué) 2008



本文編號(hào)：2913687