間充質干細胞的免疫調控在治療肝衰竭中的作用及機制探討
發(fā)布時間：2020-12-05 15:03
間充質干細胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）是具有自我復制和多向分化潛能的一類多能干細胞。目前成人骨髓是MSCs的主要來源。由于骨髓間充質干細胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs）獲取須行骨髓穿刺術,給供者造成一定的痛苦,且BM-MSCs的增殖和分化潛能隨著供者年齡的增大而下降,因此人們把目光投向了臍帶間充質干細胞（umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs）.本文通過對MSCs生物學特征、免疫學特性及其在臨床上的初步應用,爭取為臨床治療慢性肝衰竭找到一條有效的途徑。本文第一部分首先建立從小鼠骨髓和從人臍帶中分離純化MSCs的方法,然后分別研究它們的生物學特征和免疫學特性。結果顯示,兩種來源不同MSCs,形態(tài)相似,小鼠BM-MSCs表達CD44,Sca-1,不表達CD45,CD34, CD11c,CD11b,H-2,I-A,而UC-MSCs表達CD73、CD59、HLA-A,B,C、CD44,不表達CD31、CD34、CD45、CD80、CD83、CD86、...
【文章來源】：蘇州大學江蘇省
【文章頁數(shù)】：99 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
C57BL/6骨髓來源的間充質干細胞圖1-1：為普通倒置顯微鏡下觀察結果，放大倍數(shù)均為100×
圖 1-2：C57BL/6 骨髓來源的間充質干細胞表面標志鑒定圖 1-2 注：其中細線所示為同型對照的熒光強度，粗線所示為表面標志的熒光強度。結果顯示 CD45，CD34， CD11c，CD11b，H-2，I-A 陰性，CD44，Sca-1 陽性3、小鼠 BM-MSCs 的細胞分化結果小鼠 BM-MSCs 經誘導第 14~20 天后分別向成脂細胞和成骨細胞分化。在成骨細胞中可見大小不一的紅色顆粒（Alizarin Red S 染色）（圖 1-3 B），提示有礦化基質沉積，而對照組（圖 1-3 A）Alizarin Red S 染色陰性。成脂細胞中（圖 1-3 D）可見胞漿內脂滴形成，油紅-O 染色陽性，而而對照組（圖 1-3 C）油紅-O 染色陰性。
圖 1-3：小鼠骨髓來源的間充質干細胞分化形態(tài)觀察圖 1-3 注：所有圖片為普通倒置顯微鏡下觀察結果，放大倍數(shù)均為 100×。圖中顯示細胞為第五代的小鼠骨髓來源的間充質干細胞. 脂肪分化為 Oil Red O 染色；成骨分化為 Alizarin Red S 染色。A 圖及 B 圖分別為成骨分化的對照組和成骨分化組. 圖及 D 圖分別為脂肪分化的對照組和脂肪分化組.第二節(jié) 人臍帶間充質干細胞的分離、培養(yǎng)及生物學性狀研究一、實驗試劑和耗材1、材料與設備DMEM 高糖培養(yǎng)基 GIBICO 公司胎牛血清 FBS GIBICO 公司氯化鈉 Amresco 公司
【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性肝功能衰竭時骨髓間充質干細胞胞膜CXCR4的表達及影響因素[J]. 黃小平,秦愛蘭,趙衛(wèi)峰,江敏華,羅二平,吳紹宏,甘建和. 中國組織工程研究與臨床康復. 2009(40)
[2]肝衰竭最新研究熱點和展望[J]. 王宇明. 內科急危重癥雜志. 2009(03)
[3]自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化[J]. 王娟,邵麗春,郭慶,孔欣,朱丹,李曉惠. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(46)
[4]肝衰竭診療指南[J]. 李蘭娟. 中華內科雜志. 2006(12)
[5]介入治療兒童先天性心臟病586例[J]. 王震,解啟蓮,張密林,高磊,額爾敦高娃,譚慧蓮,劉凌,朱曉麗. 實用兒科臨床雜志. 2006(19)
[6]臍血間質干細胞的基礎研究和應用進展[J]. 曹勇,宋來君,楊波. 鄭州大學學報(醫(yī)學版). 2006(02)
[7]人MBL糖識別域在大腸桿菌中的表達、純化及鑒定[J]. 盧曉,朱平,張麗蕓,劉瑩,陳政良. 免疫學雜志. 2005(06)
[8]人臍帶血間充質干細胞體外誘導分化為心肌細胞的實驗研究[J]. 湯天軍,楊波,楊漢東,張有順,胡禮儀,李東鋒,張繼紅. 實用醫(yī)學雜志. 2005(21)
[9]先天性心臟病介入治療的嚴重并發(fā)癥分析及其防治[J]. 蔣世良,黃連軍,徐仲英,趙世華,凌堅,鄭宏,張戈軍,張巖,戴汝平,劉延玲,王云. 中國循環(huán)雜志. 2005(01)
[10]四氯化碳綜合法誘導大鼠肝硬化模型方法的探討[J]. 金峰,袁芳,薛建設,張捷,張志堅,余英豪. 福建醫(yī)藥雜志. 2003(05)
博士論文
[1]骨髓間充質干細胞移植對急性肝衰竭大鼠腸源性內毒素血癥的治療作用及機制研究[D]. 郝彥琴.山西醫(yī)科大學 2010
本文編號：2899642
【文章來源】：蘇州大學江蘇省
【文章頁數(shù)】：99 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
C57BL/6骨髓來源的間充質干細胞圖1-1：為普通倒置顯微鏡下觀察結果，放大倍數(shù)均為100×
圖 1-2：C57BL/6 骨髓來源的間充質干細胞表面標志鑒定圖 1-2 注：其中細線所示為同型對照的熒光強度，粗線所示為表面標志的熒光強度。結果顯示 CD45，CD34， CD11c，CD11b，H-2，I-A 陰性，CD44，Sca-1 陽性3、小鼠 BM-MSCs 的細胞分化結果小鼠 BM-MSCs 經誘導第 14~20 天后分別向成脂細胞和成骨細胞分化。在成骨細胞中可見大小不一的紅色顆粒（Alizarin Red S 染色）（圖 1-3 B），提示有礦化基質沉積，而對照組（圖 1-3 A）Alizarin Red S 染色陰性。成脂細胞中（圖 1-3 D）可見胞漿內脂滴形成，油紅-O 染色陽性，而而對照組（圖 1-3 C）油紅-O 染色陰性。
圖 1-3：小鼠骨髓來源的間充質干細胞分化形態(tài)觀察圖 1-3 注：所有圖片為普通倒置顯微鏡下觀察結果，放大倍數(shù)均為 100×。圖中顯示細胞為第五代的小鼠骨髓來源的間充質干細胞. 脂肪分化為 Oil Red O 染色；成骨分化為 Alizarin Red S 染色。A 圖及 B 圖分別為成骨分化的對照組和成骨分化組. 圖及 D 圖分別為脂肪分化的對照組和脂肪分化組.第二節(jié) 人臍帶間充質干細胞的分離、培養(yǎng)及生物學性狀研究一、實驗試劑和耗材1、材料與設備DMEM 高糖培養(yǎng)基 GIBICO 公司胎牛血清 FBS GIBICO 公司氯化鈉 Amresco 公司
【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性肝功能衰竭時骨髓間充質干細胞胞膜CXCR4的表達及影響因素[J]. 黃小平,秦愛蘭,趙衛(wèi)峰,江敏華,羅二平,吳紹宏,甘建和. 中國組織工程研究與臨床康復. 2009(40)
[2]肝衰竭最新研究熱點和展望[J]. 王宇明. 內科急危重癥雜志. 2009(03)
[3]自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化[J]. 王娟,邵麗春,郭慶,孔欣,朱丹,李曉惠. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(46)
[4]肝衰竭診療指南[J]. 李蘭娟. 中華內科雜志. 2006(12)
[5]介入治療兒童先天性心臟病586例[J]. 王震,解啟蓮,張密林,高磊,額爾敦高娃,譚慧蓮,劉凌,朱曉麗. 實用兒科臨床雜志. 2006(19)
[6]臍血間質干細胞的基礎研究和應用進展[J]. 曹勇,宋來君,楊波. 鄭州大學學報(醫(yī)學版). 2006(02)
[7]人MBL糖識別域在大腸桿菌中的表達、純化及鑒定[J]. 盧曉,朱平,張麗蕓,劉瑩,陳政良. 免疫學雜志. 2005(06)
[8]人臍帶血間充質干細胞體外誘導分化為心肌細胞的實驗研究[J]. 湯天軍,楊波,楊漢東,張有順,胡禮儀,李東鋒,張繼紅. 實用醫(yī)學雜志. 2005(21)
[9]先天性心臟病介入治療的嚴重并發(fā)癥分析及其防治[J]. 蔣世良,黃連軍,徐仲英,趙世華,凌堅,鄭宏,張戈軍,張巖,戴汝平,劉延玲,王云. 中國循環(huán)雜志. 2005(01)
[10]四氯化碳綜合法誘導大鼠肝硬化模型方法的探討[J]. 金峰,袁芳,薛建設,張捷,張志堅,余英豪. 福建醫(yī)藥雜志. 2003(05)
博士論文
[1]骨髓間充質干細胞移植對急性肝衰竭大鼠腸源性內毒素血癥的治療作用及機制研究[D]. 郝彥琴.山西醫(yī)科大學 2010
本文編號：2899642
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