發(fā)布時(shí)間：2020-11-21 02:17

　　 目的: 研究門靜脈高壓癥(portal hypertension,PHT)脾靜脈組織局部血管緊張素II(angiotensin II ,AngII)及其受體表達(dá)水平。研究門靜脈高壓癥脾靜脈組織中絲裂素活化蛋白激酶(MAPK)、核因子-κB (NF-κB)蛋白的表達(dá)。研究AngII以及MAPK、NF-κB與人門靜脈高壓癥脾靜脈血管平滑肌細(xì)胞(Splenic vein Vascular Smooth Muscle Cell,SvVSMC)增殖的關(guān)系。探討MAPK及NF-κB在AngII誘導(dǎo)的人門靜脈高壓癥SvVSMC增殖中的作用。 方法: PHT組為乙肝后肝硬化門靜脈高壓癥行脾切除加選擇性賁門周圍血管離斷術(shù)患者26例;對(duì)照組選取同期因外傷性脾破裂行脾切除術(shù)患者10例。放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)檢測(cè)脾靜脈中AngII水平;反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法(RT-PCR法)測(cè)定脾靜脈血管組織AT1-R及AT2-R mRNA的表達(dá);免疫組織化學(xué)法和蛋白免疫印跡法(Western blot)測(cè)定NF-κB(p65)、ERK(p-erk42/44)、P38(phospho-p38)蛋白的表達(dá)。體外培養(yǎng)人門靜脈高壓癥SvVSMC,用WST-1法測(cè)定細(xì)胞增殖狀況。蛋白免疫印跡法(Western blot)測(cè)定人門靜脈高壓癥SvVSMC中NF-κB、ERK、P38蛋白的表達(dá)。 結(jié)果: 第一部分: PHT組脾靜脈組織AngII為248.91±48.31 ng/L,顯著高于對(duì)照組AngII為143.35±36.45 ng/L(P0.01)。免疫組化和蛋白免疫印跡均顯示PHT組脾靜脈NF-κB、P38、ERK蛋白的表達(dá)較對(duì)照組明顯增強(qiáng)。與對(duì)照組比較,PHT組脾靜脈AT1-R mRNA表達(dá)明顯降低(P0.01)。而AT2-R mRNA表達(dá)明顯增高(P0.01)。 第二部分: 1、低濃度AngII(10-8mol/L)促進(jìn)SvVSMC增殖作用就較顯著(P0.05),隨著AngII濃度增高(10~(-7),10-6mol/L),細(xì)胞增殖顯著上升(P0.01)。 2、AngII誘導(dǎo)SvVSMC NF-κB蛋白表達(dá),于30min達(dá)高峰;在10~(-8)-10~(-6)mol/L濃度范圍內(nèi),AngII以濃度依賴性方式增加人門靜脈高壓癥SvVSMC的NF-κB活化,當(dāng)AngII濃度為10~(-7) mol/L時(shí),SvVSMC中的NF-κB表達(dá)明顯增高,與對(duì)照組相比,差異具有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 3、AngII誘導(dǎo)SvVSMC ERK蛋白表達(dá),于10min達(dá)高峰,在10~(-8)-10~(-6)mol/L濃度范圍內(nèi),AngII以濃度依賴性方式增加人門靜脈高壓癥SvVSMC的ERK活化,當(dāng)AngII濃度為10~(-7) mol/L時(shí),SvVSMC中的ERK表達(dá)明顯增高,與對(duì)照組相比,差異具有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 4、AngII誘導(dǎo)SvVSMC P38蛋白表達(dá),于5min達(dá)高峰,在10~(-8)-10~(-6)mol/L濃度范圍內(nèi),AngII以濃度依賴性方式增加人PHT脾靜脈VSMC的P38活化,當(dāng)AngII濃度為10~(-7) mol/L時(shí),SvVSMC中的P38表達(dá)明顯增高,與對(duì)照組相比,差異具有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 5、NF-κB特異性阻斷劑PDTC(100umol/L)降低AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)的SvVSMC NF-κB活性和細(xì)胞增殖,與單純AngII(10~(-7)mol/L)組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與單純AngII(10~(-7)mol/L)組比較,ERK特異性阻斷劑PD98059(100umol/L)降低AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)的SvVSMC ERK活性和細(xì)胞增殖,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);P38特異性阻斷劑SB202190(10~(-7) mol/L)降低AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)的SvVSMC P38活性和細(xì)胞增殖,與單純AngII(10~(-7)mol/L)組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);JNK特異性阻斷劑SP600125(100umol/L)能降低AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)的人PHT脾靜脈VSMC的細(xì)胞增殖,與單純AngII組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。PD98059、PDTC干預(yù)后AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)SvVSMC WST-1活性與對(duì)照組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),而SB202190、SP600125干預(yù)后AngII誘導(dǎo)人PHT脾靜脈WST-1活性與對(duì)照組相比存在顯著差異(P0.05)。 6、PD98059(100umol/L)干預(yù)后AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)的SvVSMC NF-κB活性與單純AngI(I10~(-7)mol/L)組比較顯著降低(P0.01);與單純AngI(I10~(-7)mol/L)組比較,SB202190(10~(-7) mol/L)干預(yù)后AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)的SvVSMC P38活性顯著降低(P0.01);SP600125(100umol/L)干預(yù)后AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)的SvVSMC NF-κB活性與單純AngII(10~(-7)mol/L)組比較顯著降低(P0.01);PDTC(100umol/L)干預(yù)后,AngII(10~(-7)mol/L)誘導(dǎo)的SvVSMC P38活性與單純AngII(10~(-7)mol/L)組比較顯著降低(P0.01)。 結(jié)論: 第一部分:1.門靜脈高壓癥脾靜脈血管存在LRAS的激活,提示LRAS的激活可能參與PHT時(shí)的脾靜脈血管病變的形成和發(fā)展。2.門靜脈高壓癥時(shí)脾靜脈血管NF-κB、ERK及P38活化可能與門靜脈脈高壓癥血管病變關(guān)系密切。3.門靜脈高壓癥時(shí)脾靜脈血管LRAS的激活可能是脾靜脈血管中NF-κB、ERK及P38活化的重要原因。 第二部分:1. AngII誘導(dǎo)SvVSMC中MAPK、NF-κB活化是促人PHT SvVSMC增殖的重要原因。2. ERK、NF-κB途徑是AngII誘導(dǎo)人PHT SvVSMC增殖的主要途徑。3. AngII誘導(dǎo)人PHT SvVSMC MAPK活化可以激活NF-κB。4. AngII誘導(dǎo)人PHT SvVSMC NF-κB活化可以激活P38. 5. AngII激活MAPK、NF-κB通路可能是門靜脈高壓癥血管病變發(fā)生發(fā)展的重要原因。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R575.2
【部分圖文】：

統(tǒng)計(jì)軟件包分析。組間比較采用多樣本均數(shù)的 One-wayANOVA 檢驗(yàn)。兩組均數(shù)比較采用 t 檢驗(yàn)。P<0.05 表示有顯著性差異；P<0.01 表示有極顯著性差異。結(jié) 果1. 形態(tài)學(xué)結(jié)果與對(duì)照組相比，PHT 組脾靜脈壁明顯增厚，管徑明顯增加，彈性減弱。對(duì)照組正常脾靜脈內(nèi)膜完整，內(nèi)皮細(xì)胞無破壞（圖 1）；PHT 組脾靜脈內(nèi)膜局灶性增厚，增厚的內(nèi)膜中可見遷移的平滑肌細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞不完整，中膜也顯著增厚（圖 2，圖 3）。2. 脾靜脈組織中 AngII 水平脾靜脈組織局部 AngII 水平比較顯示，PHT 組 AngII 為 248.91±48.31 ng/L，顯著高于對(duì)照組 143.35±36.45 ng/L，差異有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01,見圖 4）。

PHT組脾靜脈內(nèi)皮不完整，內(nèi)膜層增厚其中可見遷移的血管平滑肌細(xì)胞x800

PHT組脾靜脈中膜顯著增厚x800
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張娜娜;李茂蓮;邊云飛;高奮;楊慧宇;肖傳實(shí);;腎素(前體)受體miRNA干擾質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[J];中國動(dòng)脈硬化雜志;2011年05期

2 李憲偉;姜維良;張英男;孫占峰;孫慶峰;張?zhí)烊A;馬軍;;microRNA-21對(duì)體外培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞遷移能力的調(diào)控[J];中國血管外科雜志(電子版);2010年04期

3 劉晶;馬坤嶺;倪杰;黃文瑾;劉必成;陳壓西;阮雄中;;動(dòng)脈粥樣硬化模型小鼠血管平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年04期

4 李巍;陳麗萍;李莉;緒廣林;何書英;;肝素十二糖對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖作用的研究[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2011年08期

5 趙俠;魯永織;張敏;林雪烽;徐建榮;王志榮;王向東;曹希傳;夏勇;李東野;張卓琦;;新型陽離子磷酸膽堿聚合物MPC_(30)-DEA_(70)轉(zhuǎn)染血管平滑肌細(xì)胞的體外研究[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年08期

6 宋肖靜;王朝霞;徐汪節(jié);崔永萍;喬中東;;尼古丁對(duì)血管平滑肌細(xì)胞NF-κB通路的影響[J];生物物理學(xué)報(bào);2011年08期

7 阮云軍;吳賽珠;邱健;向定成;董鳳英;賴文巖;;過氧化氫對(duì)老年大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響[J];中華保健醫(yī)學(xué)雜志;2011年04期

8 李新榮;高景燕;鄧湘蕾;李艷平;;絲裂原蛋白激酶在糖尿病慢性血管并發(fā)癥中的作用[J];中國糖尿病雜志;2007年04期

9 韓麗萍;徐長(zhǎng)慶;李鴻珠;龔永生;張卓然;;槲皮素對(duì)大鼠血管平滑肌肌張力的影響[J];浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2011年04期

10 張宏偉;劉宇;楊野;張強(qiáng);;c-Fos基因RNA干擾對(duì)大鼠血管平滑肌細(xì)胞表型及遷移的影響[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年08期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李靈;AngⅡ、MAPK、NF-κB在人門靜脈高壓癥脾靜脈血管病變中作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

2 朱清;腎素-血管緊張素系統(tǒng)及其阻斷劑對(duì)血管平滑肌細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用機(jī)理的研究[D];山東大學(xué);2003年

3 耿慶信;糖尿病大鼠動(dòng)脈損傷后新生內(nèi)膜形成及冠心病合并糖尿病患者血管內(nèi)皮功能的研究[D];山東大學(xué);2004年

4 王志高;加味桃核承氣湯不同配伍組方及提取方法對(duì)糖尿病血管平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2007年

5 彭侃夫;AOPP對(duì)血管平滑肌細(xì)胞MCP-1表達(dá)及其信號(hào)通路的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

6 張園;重組人組織因子腺病毒干擾載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)染人血管平滑肌的體外研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

7 高宇;血漿尾加壓素Ⅱ水平在相關(guān)疾病中變化的臨床和基礎(chǔ)研究[D];吉林大學(xué);2009年

8 張慧娜;Sirt1對(duì)血管平滑肌細(xì)胞遷移的影響及分子機(jī)制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

9 崔蓉蓉;microRNA和apelin調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞向成骨樣細(xì)胞分化和凋亡[D];中南大學(xué);2012年

10 王國勇;高血壓時(shí)阻力血管平滑肌鈣激活鉀通道的特性及調(diào)節(jié)[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1994年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 許柳青;P38MAPK在SHR大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖中的介導(dǎo)作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2005年

2 龍波;三氧化二砷對(duì)兔髂動(dòng)脈球囊損傷術(shù)后內(nèi)膜增殖的影響及其機(jī)理的研究[D];四川大學(xué);2004年

3 付艷;串珠素在冠心病治療性血管生成中的作用及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2006年

4 邢震宇;鎂離子對(duì)體外培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2007年

5 常亮;行氣活血湯對(duì)動(dòng)脈損傷兔的血管平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡的研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2007年

6 戰(zhàn)曉麗;高磷對(duì)血管平滑肌細(xì)胞鈣化的影響及阿托伐他汀干預(yù)效應(yīng)的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

7 蔣紅艷;苦參總堿對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移的影響[D];重慶大學(xué);2007年

8 江毅;益氣活血方及其拆方對(duì)人血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2008年

9 李峰;ERK1/2介導(dǎo)apelin促血管平滑肌細(xì)胞增殖研究[D];南華大學(xué);2006年

10 婁可心;celecoxib對(duì)血管平滑肌培養(yǎng)細(xì)胞的增殖抑制、凋亡誘導(dǎo)作用及分子機(jī)制的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2892366