發(fā)布時間：2019-01-15 23:11

【摘要】：目的：通過選取高效、穩(wěn)定的方法制備急性胰腺炎動物模型,誘發(fā)肺損傷,比較正常組、假手術(shù)組、胰腺炎組和鞘氨醇激酶1抑制組,包括鞘氨醇激酶1的蛋白表達及先關(guān)的各項指標(biāo),研究鞘氨醇激酶1在大鼠急性重癥胰腺炎肺損傷中的作用,并探討其可能的作用機制。方法：將120只SD大鼠隨機分成4組：正常組、假手術(shù)組、胰腺炎組、鞘氨醇激酶1抑制組,每組30只,其中每組15只用來觀察24h生存率。正常組不進行任何操作,假手術(shù)組僅行開關(guān)腹手術(shù),胰腺炎組采用微量注射泵對大鼠胰膽管進行逆行性注射牛磺酸膽酸鈉的方法制作大鼠急性重癥胰腺炎模型；鞘氨醇激酶1抑制組在制備大鼠急性胰腺炎模型前從大鼠尾靜脈注射鞘氨醇激酶1抑制劑5c的稀釋液,余同胰腺炎組模型制備方法。分別觀察各組生存率,留取血清進行血清淀粉酶和血清脂肪酶測定,進行血清TNF-α和IL-1β的測定,對左肺組織行組織髓過氧化物酶活性測定,取左肺進行肺泡灌洗測定蛋白含量,取肺組織和胰腺組織行組織病理學(xué)檢查,采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)和流式細(xì)胞術(shù)的方法檢測大鼠外周血中性粒細(xì)胞的鞘氨醇激酶1的信使RNA和蛋白表達。兩兩比較采用獨立樣本的T檢驗。結(jié)果：1.24h生存指數(shù)：正常組和假手術(shù)組24h生存率差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,生存率明顯降低(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎12h組相比,生存率明顯升高(P0.05)；2.血清淀粉酶和血清脂肪酶檢測：正常組和假手術(shù)組血清淀粉酶和血清脂肪酶水平差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,血清淀粉酶和血清脂肪酶水平明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,血清淀粉酶和血清脂肪酶水平明顯降低(P0.05)；3.肺組織髓過氧化物酶測定、肺泡灌洗液蛋白含量測定：正常組和假手術(shù)組肺組織髓過氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,肺組織髓過氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,肺組織髓過氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量明顯降低(P0.05)；4.鞘氨醇激酶1活性測定：正常組和假手術(shù)組鞘氨醇激酶1活性差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,Sphk1活性明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,鞘氨醇激酶1活性明顯降低(P0.05)；5.胰腺組織和肺組織病理組織學(xué)檢查：正常組和假手術(shù)組胰腺組織和肺組織病理學(xué)形態(tài)差異不大,胰腺炎組與假手術(shù)組相比,胰腺組織和肺組織胰腺組織和肺組織病理學(xué)形態(tài)明顯較重,鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,胰腺組織和肺組織病理學(xué)病變明顯交清較輕(P0.05)；6大鼠血清TNF-α和IL-1β的水平：正常組和假手術(shù)組血清TNF-α和IL-1β的水平差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,胰腺炎組血清TNF-α和IL-1β的水平明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,血清TNF-α和IL-1β的水平明顯降低(P0.05)；7.大鼠外周血中性粒細(xì)胞中鞘氨醇激酶1信使RNA的表達水平：正常組和假手術(shù)組鞘氨醇激酶1信使RNA的表達水平差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,胰腺炎組鞘氨醇激酶1信使RNA的表達明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,鞘氨醇激酶1信使RNA的表達明顯降低(P0.05)；8.流式細(xì)胞學(xué)檢測大鼠外周血中性粒細(xì)胞中鞘氨醇激酶1蛋白表達水平：正常組和假手術(shù)組鞘氨醇激酶1的蛋白表達水平差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,胰腺炎組鞘氨醇激酶1的蛋白表達明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,鞘氨醇激酶1蛋白表達明顯降低(P0.05)；結(jié)論：1.急性胰腺炎大鼠中,外周血中性粒細(xì)胞的鞘氨醇激酶1的活性、信使RNA表達、蛋白表達與血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺組織髓過氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺組織和胰腺組織的組織病理學(xué)檢查,表現(xiàn)了相同的變化趨勢,說明急性重癥胰腺炎肺損傷中,鞘氨醇激酶1可能與急性胰腺炎肺損傷的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)；2.血清炎性因子TNF-α和IL-1β水平與鞘氨醇激酶1的活性、mRNA表達及蛋白表達、血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺組織髓過氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺組織和胰腺組織的組織病理學(xué)檢查呈現(xiàn)了相同的表達趨勢,說明鞘氨醇激酶1可能是通過炎性因子的途徑參與急性胰腺炎導(dǎo)致的肺損傷的病理生理過程的。3.鞘氨醇激酶1抑制組的外周血中性粒細(xì)胞的鞘氨醇激酶1的活性,信使RNA表達和蛋白表達,血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺組織髓過氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺組織和胰腺組織的組織病理學(xué)檢查,相比胰腺炎組出現(xiàn)了明顯的下降或減輕,說明比其他抑制劑更低毒性的SKI 5c可能成為急性重癥胰腺炎肺損傷的一種治療手段。
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【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R576

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Sabrina Gea-Sorlí;Daniel Closa;;Role of macrophages in the progression of acute pancreatitis[J];World Journal of Gastrointestinal Pharmacology and Therapeutics;2010年05期

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本文編號：2409204