發(fā)布時(shí)間：2019-01-15 23:11

【摘要】：目的：通過(guò)選取高效、穩(wěn)定的方法制備急性胰腺炎動(dòng)物模型,誘發(fā)肺損傷,比較正常組、假手術(shù)組、胰腺炎組和鞘氨醇激酶1抑制組,包括鞘氨醇激酶1的蛋白表達(dá)及先關(guān)的各項(xiàng)指標(biāo),研究鞘氨醇激酶1在大鼠急性重癥胰腺炎肺損傷中的作用,并探討其可能的作用機(jī)制。方法：將120只SD大鼠隨機(jī)分成4組：正常組、假手術(shù)組、胰腺炎組、鞘氨醇激酶1抑制組,每組30只,其中每組15只用來(lái)觀察24h生存率。正常組不進(jìn)行任何操作,假手術(shù)組僅行開(kāi)關(guān)腹手術(shù),胰腺炎組采用微量注射泵對(duì)大鼠胰膽管進(jìn)行逆行性注射�；撬崮懰徕c的方法制作大鼠急性重癥胰腺炎模型；鞘氨醇激酶1抑制組在制備大鼠急性胰腺炎模型前從大鼠尾靜脈注射鞘氨醇激酶1抑制劑5c的稀釋液,余同胰腺炎組模型制備方法。分別觀察各組生存率,留取血清進(jìn)行血清淀粉酶和血清脂肪酶測(cè)定,進(jìn)行血清TNF-α和IL-1β的測(cè)定,對(duì)左肺組織行組織髓過(guò)氧化物酶活性測(cè)定,取左肺進(jìn)行肺泡灌洗測(cè)定蛋白含量,取肺組織和胰腺組織行組織病理學(xué)檢查,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)和流式細(xì)胞術(shù)的方法檢測(cè)大鼠外周血中性粒細(xì)胞的鞘氨醇激酶1的信使RNA和蛋白表達(dá)。兩兩比較采用獨(dú)立樣本的T檢驗(yàn)。結(jié)果：1.24h生存指數(shù)：正常組和假手術(shù)組24h生存率差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,生存率明顯降低(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎12h組相比,生存率明顯升高(P0.05)；2.血清淀粉酶和血清脂肪酶檢測(cè)：正常組和假手術(shù)組血清淀粉酶和血清脂肪酶水平差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,血清淀粉酶和血清脂肪酶水平明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,血清淀粉酶和血清脂肪酶水平明顯降低(P0.05)；3.肺組織髓過(guò)氧化物酶測(cè)定、肺泡灌洗液蛋白含量測(cè)定：正常組和假手術(shù)組肺組織髓過(guò)氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,肺組織髓過(guò)氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,肺組織髓過(guò)氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量明顯降低(P0.05)；4.鞘氨醇激酶1活性測(cè)定：正常組和假手術(shù)組鞘氨醇激酶1活性差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,Sphk1活性明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,鞘氨醇激酶1活性明顯降低(P0.05)；5.胰腺組織和肺組織病理組織學(xué)檢查：正常組和假手術(shù)組胰腺組織和肺組織病理學(xué)形態(tài)差異不大,胰腺炎組與假手術(shù)組相比,胰腺組織和肺組織胰腺組織和肺組織病理學(xué)形態(tài)明顯較重,鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,胰腺組織和肺組織病理學(xué)病變明顯交清較輕(P0.05)；6大鼠血清TNF-α和IL-1β的水平：正常組和假手術(shù)組血清TNF-α和IL-1β的水平差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,胰腺炎組血清TNF-α和IL-1β的水平明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,血清TNF-α和IL-1β的水平明顯降低(P0.05)；7.大鼠外周血中性粒細(xì)胞中鞘氨醇激酶1信使RNA的表達(dá)水平：正常組和假手術(shù)組鞘氨醇激酶1信使RNA的表達(dá)水平差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,胰腺炎組鞘氨醇激酶1信使RNA的表達(dá)明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,鞘氨醇激酶1信使RNA的表達(dá)明顯降低(P0.05)；8.流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)大鼠外周血中性粒細(xì)胞中鞘氨醇激酶1蛋白表達(dá)水平：正常組和假手術(shù)組鞘氨醇激酶1的蛋白表達(dá)水平差異不大(P0.05),胰腺炎組與假手術(shù)組相比,胰腺炎組鞘氨醇激酶1的蛋白表達(dá)明顯升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制組與胰腺炎組相比,鞘氨醇激酶1蛋白表達(dá)明顯降低(P0.05)；結(jié)論：1.急性胰腺炎大鼠中,外周血中性粒細(xì)胞的鞘氨醇激酶1的活性、信使RNA表達(dá)、蛋白表達(dá)與血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺組織髓過(guò)氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺組織和胰腺組織的組織病理學(xué)檢查,表現(xiàn)了相同的變化趨勢(shì),說(shuō)明急性重癥胰腺炎肺損傷中,鞘氨醇激酶1可能與急性胰腺炎肺損傷的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)；2.血清炎性因子TNF-α和IL-1β水平與鞘氨醇激酶1的活性、mRNA表達(dá)及蛋白表達(dá)、血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺組織髓過(guò)氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺組織和胰腺組織的組織病理學(xué)檢查呈現(xiàn)了相同的表達(dá)趨勢(shì),說(shuō)明鞘氨醇激酶1可能是通過(guò)炎性因子的途徑參與急性胰腺炎導(dǎo)致的肺損傷的病理生理過(guò)程的。3.鞘氨醇激酶1抑制組的外周血中性粒細(xì)胞的鞘氨醇激酶1的活性,信使RNA表達(dá)和蛋白表達(dá),血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺組織髓過(guò)氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺組織和胰腺組織的組織病理學(xué)檢查,相比胰腺炎組出現(xiàn)了明顯的下降或減輕,說(shuō)明比其他抑制劑更低毒性的SKI 5c可能成為急性重癥胰腺炎肺損傷的一種治療手段。
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【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R576

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Sabrina Gea-Sorlí;Daniel Closa;;Role of macrophages in the progression of acute pancreatitis[J];World Journal of Gastrointestinal Pharmacology and Therapeutics;2010年05期

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本文編號(hào)：2409204