發(fā)布時間：2018-06-05 06:01

  本文選題：內臟高敏感 + 背根神經節(jié)　； 參考：《安徽醫(yī)科大學》2014年碩士論文

【摘要】：背景與目的腸易激綜合征(abdominal withdrawal reflex，IBS)是一組以腹痛或腹部不適同時伴有排便習慣及大便性狀改變?yōu)榘Y狀的腸道功能性疾病。臨床上較為常見，人群流行病學調查顯示IBS的發(fā)病率約為5％～10％[1]，歐美等發(fā)達國家發(fā)病率較高，國內以北京、廣州、上海、浙江等地高發(fā)。該病嚴重影響患者的生活質量，但其發(fā)病機制尚未完全清楚。目前認為IBS的發(fā)病可能與內臟感覺異常、腸道動力異常、感染、神經-內分泌、遺傳等多種因素有關，其中內臟感覺異常被認為是IBS主要的病理生理學基礎。在內臟感知過程中，長期以來人們推測來自胃腸道的疼痛感覺是由脊髓傳入纖維所介導的[2]，疼痛信號起源于初級傷害性受體外周末梢，一種位于脊髓背根神經節(jié)(dorsal root ganglion neurons, DRG)上的特殊神經元，傷害性感受器能通過特殊受體如瞬時感受器電位香草素受體1(transient receptor potential vanilloid type-1，TRPV1)和/或P2X嘌呤能受體（P2X purinoreceptors，P2XRs）將傷害性刺激轉變?yōu)橐环N電信號，并將這種信號由外周向中樞神經傳遞，引起相應的反射，調節(jié)內臟活動。但目前，TRPV1和P2XRs對內臟感覺調節(jié)的確切作用機制仍不清楚。因此在本研究中，我們采用大鼠乙酸造模制備內臟高敏感模型，用1,1'-二(十八烷基)-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰基花青高氯酸鹽（DiI）逆行示蹤標記結腸特異背根神經節(jié)神經元，探討結腸特異背根神經節(jié)神經元的興奮性及TRPV1、P2X3受體表達情況，為研究IBS相關性腹痛提供新的治療靶點。 方法出生10天的大鼠，結腸內給予0.5%乙酸（acetic acid，，AA）溶液制備內臟高敏感大鼠模型（AA組），對照組（NS組）給予同等量0.9％生理鹽水(normalsaline,NS)。對成年后的大鼠進行結直腸擴張（CRD），主要用腹部回撤反射（AWR）值來評估內臟敏感性。在結腸壁上注射DiI逆行標記的DRG神經元為結腸特異DRG神經元，酶解分離神經節(jié)成單細胞后，熒光顯微鏡下觀察細胞形態(tài)并計數。采用全細胞膜片鉗技術記錄神經元的閾電位和動作電位頻率來反映結腸特異DRG神經元的興奮性。用免疫熒光技術觀察結腸特異背根神經節(jié)神經元上TRPV1、P2X3受體表達情況，并分別計算AA組AWR評分值與結腸特異DRG神經元上TRPV1受體陽性率、動作電位頻率、閾電流值的相關性，與結腸特異DRG神經元上P2X3受體陽性率、動作電位頻率、閾電流值的相關性。 結果 1. AA組大鼠在結腸乙酸灌注后出現排便異常，在每日進行刺激時，大鼠表現比較煩躁、畏懼和嘶叫，隨著天數增加，出現易激惹和好斗傾向； 2.與NS組相比，AA組大鼠分別在同一結直腸擴張壓力(5.332、7.998、10.664kPa)下AWR值明顯增高(P0.05)； 3. AA組結腸特異DRG神經元細胞直徑多分布于為35~45μm，NS組為25~35μm； 4. AA組神經元閾電流低于NS組(P0.05)，2倍閾電流刺激下，引發(fā)出的AA組動作電位頻率高于NS組(P0.05)。 5. AA組結腸特異DRG神經元上TRPV1和P2X3受體免疫陽性率較正常組明顯增加(P0.01). 6. AA組AWR評分值在不同壓力結直腸擴張下均與結腸特異DRG神經元上TRPV1受體陽性率（P0.01）、動作電位頻率（P0.01）呈正相關、與閾電流值（P0.05）呈負相關；與結腸特異DRG神經元上P2X3受體陽性率（P0.01）、動作電位頻率（P0.01）呈正相關、與閾電流值（P0.05）呈負相關。 結論 1.經乙酸結腸灌注后的大鼠內臟敏感性增高，內臟高敏感大鼠模型建立。 2.內臟高敏感大鼠結腸特異DRG神經元細胞增大且興奮性增加。 3.內臟高敏感大鼠結腸特異DRG神經元細胞上TRPV1和P2X3受體表達上調且內臟敏感性的高低與DRG神經元興奮性及TRPV1和P2X3受體表達量有關。
[Abstract]:BACKGROUND & OBJECTIVE : The pathogenesis of irritable bowel syndrome ( IBS ) is a group of intestinal functional diseases with abdominal pain or abdominal discomfort accompanied by bowel habits and stool traits .

Methods The rats with 10 days of birth , 0.5 % acetic acid ( AA ) solution were given in the colon to prepare the visceral highly sensitive rat model ( AA group ) , and the control group ( NS group ) was given the equivalent amount of 0.9 % normal saline ( NS ) . In order to assess the sensitivity of visceral sensitivity to adult rat dorsal root ganglion neurons , we observed the expression of TRpv1 and P2X3 receptors on the dorsal root ganglion neurons of the colon by using the technique of immunofluorescence technique . The correlation between the AWR score and the positive rate , the frequency of action potential and the threshold current of the specific DRG neurons in the colon were observed .

Results

1 . In AA group , the rats were abnormal after acetic acid infusion , and when the rats were stimulated daily , the rats were more irritable , afraid and brawl , with the increase of the number of days , the rats appeared to be irritable and aggressive ;


2 . Compared with NS group , the AWR value of AA rats increased significantly ( P0.05 ) at the same colorectal distension pressure ( 5.332 , 7.998 , 10.664kPa ) , respectively .


3 . The diameter of specific DRG neurons in AA group was 35 锝

本文編號：1980885