發(fā)布時間：2018-06-02 01:28

  本文選題：慢加急性乙型肝炎肝衰竭 + 過氧化物酶體增殖激活受體γ��； 參考：《山東大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：研究背景與目的慢加急性乙型肝炎肝衰竭(acute-on-chronic hepatitis B liver failure, ACHBLF)病死率高,嚴(yán)重危害人類健康。最近的研究表明,促炎細(xì)胞因子在ACHBLF的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮著十分重要的作用。有研究證明,過氧化物酶體增殖物激活受體y(peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPAR-γ)參與抗炎反應(yīng),但其在ACHBLF中發(fā)揮的作用仍不明確。因此,本研究旨在通過檢測PPAR-γ基因啟動子甲基化及表達(dá)水平,揭示PPAR-γ在ACHBLF發(fā)生發(fā)展中的作用及其預(yù)測ACHBLF短期預(yù)后的潛在臨床應(yīng)用價值。研究方法本研究共納入了161例受試者,包括81例ACHBLF患者,50例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)患者,以及30例健康對照者。用實時熒光定量PCR (quantitative real-time PCR)法檢測外周血單個核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中PPAR-γ的mRNA水平；用甲基化特異性PCR(methylation specific PCR, MSP)檢測PPAR-γ基因啟動子甲基化情況；用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)檢測血漿中TNF-α和IL-6的水平。應(yīng)用SPSS V17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)相關(guān)分析,兩組之間差異比較采用兩獨立樣本t檢驗,Mann-Whitney U檢驗或卡方檢驗,PPAR-γ表達(dá)水平與臨床資料的相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.ACHBLF患者PPAR-γ mRNA水平與CHB患者相比顯著升高(Z=-4.003,P0.001)。然而,ACHBLF患者PPAR-γ mRNA水平仍顯著低于健康對照組(Z=-4.632,P0.001)。同時,CHB患者中PPAR-γ表達(dá)水平顯著低于健康對照組(Z=-6.037,P0.001)。2.對ACHBLF患者PPAR-γ mRNA水平與臨床指標(biāo)進(jìn)行線性相關(guān)分析結(jié)果顯示,PPAR-γ的表達(dá)水平與總膽紅素(total bilirubin, TBIL)(r=-0.280,P=0.011)及國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(international normalized ratio,INR)(r=-0.230,P=0.039)呈顯著負(fù)相關(guān)。ACHBLF患者PPAR-γ mRNA水平與谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotranferase,ALT).血肌酐(creatinine,Cr)及乙型肝炎病毒DNA(hepatitis B virUs-DNA,HBV-DNA)載量之間未發(fā)現(xiàn)顯著相關(guān)關(guān)系。3.ACHBLF患者中PPAR-γ啟動子的甲基化率比CHB患者顯著降低(CpG-1,x2=8.918,P=0.003；CpG-2,x2=9.268,P=0.002),而仍然高于健康對照組(CpG-1,x2=6.691,P=0.009；CpG.2,x2=5.050,P=0.025).同時,CHB患者兩個CpG島的甲基化率均明顯高于健康對照組(CpG-1,X2= 21.333,P0.001；CpG-2,x2=19.448,P0.001).4.對所有受試者甲基化組與非甲基化組的PPAR-γ mRNA水平進(jìn)行比較。結(jié)果顯示,在CpG-1或CpG-2發(fā)生甲基化的情況下,PPAR-γ的相對表達(dá)量將顯著減少(CpG-1,Z=-6.613,P0.001；CpG-2,Z=-7.712, P0.001),并且當(dāng)CpG-1及CpG-2同時發(fā)生甲基化時對PPAR-γ的表達(dá)抑制效果增強(Z=-4.085,P0.001)。5.受試者的血漿TNF-α和IL-6水平通過酶聯(lián)免疫吸附試驗測定。ACHBLF患者中兩種細(xì)胞因子水平均顯著高于CHB患者(TNF-α, t=6.649,P0.001；IL一6,t=6.784,P0.001)和健康對照組(TNFα,t=5.582, P0.001；IL-6,t=5.961,P0.001).ACHBLF患者中甲基化組的血漿細(xì)胞因子水平顯著高于非甲基化組(TNF-α,t=2.312,P=0.023；IL-6,t=2.639, P=0.012).6.ACHBLF患者3個月的死亡率為54.32%(44/81),平均生存時間為53.47天(SE 4.057,95％CI 45.39-61.54).存活組的PPAR-γ mRNA水平顯著高于死亡組(Z=-3.489,P0.001)。ACHBLF患者甲基化組的預(yù)后顯著差于非甲基化組(χ2=11.140,P0.001)。ACHBLF存活組PPAR-γ表達(dá)水平隨時間延長而顯著增加,而死亡組維持于較低水平。我們評估了PPAR-γ mRNA水平、PPAR-γ啟動子甲基化對預(yù)測ACHBLF短期預(yù)后的價值。ROC曲線下面積分別為0.726(SE 0.059,95% CI 0.611-0.841), 0.657(SE 0.062,95％CI 0.535-1.778).結(jié)論ACHBLF患者與CHB患者相比PPAR-γ表達(dá)水平升高,啟動子甲基化率降低。PPAR-γ的表達(dá)水平及啟動子甲基化狀態(tài)與ACHBLF的嚴(yán)重程度和預(yù)后密切相關(guān)。并且,PPAR-γ可能通過下調(diào)TNF-α和IL-6,對于改善ACHBLF預(yù)后具有潛在意義,PPAR-γ的啟動子甲基化狀態(tài)及表達(dá)水平對于預(yù)測ACHBLF的短期預(yù)后具有重要價值。
[Abstract]:Research background and objective acute-on-chronic hepatitis B liver failure (ACHBLF) has high mortality and serious harm to human health. Recent studies have shown that proinflammatory cytokines play a very important role in the development and development of ACHBLF. Studies have shown that peroxisome proliferation is stimulated. The active receptor y (peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPAR- gamma) is involved in anti-inflammatory reactions, but its role in ACHBLF is still not clear. Therefore, this study aims to reveal the role of PPAR- gamma in the development of ACHBLF and to predict the potential of ACHBLF and short-term prognosis by detecting the methylation and expression level of PPAR- gamma promoter. This study included 161 subjects including 81 ACHBLF patients, 50 patients with chronic hepatitis B (chronic hepatitis B, CHB), and 30 healthy controls. The detection of peripheral blood mononuclear cells by real-time fluorescent quantitative PCR (quantitative real-time PCR) (peripheral blood mononuclear) The mRNA level of PPAR- gamma in PBMCs; the methylation specific PCR (methylation specific PCR, MSP) was used to detect the methylation of the promoter of the PPAR- gamma gene; the enzyme linked immunosorbent assay (enzyme-linked immunosorbent assay) was used to detect the level of the plasma in the plasma. The two groups were used for statistical analysis. The difference was compared with two independent samples t test, Mann-Whitney U test or chi square test. The correlation analysis of PPAR- gamma expression level and clinical data was statistically significant by Spearman correlation analysis.P0.05. Results the level of PPAR- y mRNA in 1.ACHBLF patients was significantly higher than that of CHB patients (Z=-4.003, P0.001). The level of AR- gamma mRNA was still significantly lower than that in the healthy control group (Z=-4.632, P0.001). At the same time, the expression level of PPAR- gamma in CHB patients was significantly lower than that in the healthy control group (Z=-6.037, P0.001).2. (Z=-6.037, P0.001).2.. .280, P=0.011) and international standardized ratio (international normalized ratio, INR) (r=-0.230, P=0.039) showed a significant negative correlation with PPAR- gamma mRNA level and alanine transaminase (alanine). There was no significant phase between the serum creatinine and hepatitis B virus. The methylation rate of PPAR- gamma promoter in.3.ACHBLF patients was significantly lower than that of patients with CHB (CpG-1, x2=8.918, P=0.003, CpG-2, x2=9.268, P=0.002), but still higher than that of the healthy control group (CpG-1, x2=6.691, P=0.009. 333, P0.001, CpG-2, x2=19.448, P0.001).4. compared the PPAR- gamma mRNA levels between the methylation and the non methylation groups of all the subjects. The results showed that the relative expression of PPAR- gamma would be significantly reduced when CpG-1 or CpG-2 occurred methylation. The inhibitory effect of methylation on the expression of PPAR- gamma enhanced (Z=-4.085, P0.001).5. subjects' plasma TNF- alpha and IL-6 levels were significantly higher than those of CHB patients (TNF- alpha, t=6.649, P0.001, IL a 6,.5.) and healthy control group by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The plasma cytokine levels in the methylation group of the patients with IL-6, t=5.961, P0.001) were significantly higher than those in the non methylation group (TNF-, t=2.312, P=0.023; IL-6, t=2.639, P=0.012), and the mortality of 3 months was 54.32% (44/81) and the average survival time was 53.47 days. The prognosis of the methylation group in the patients with higher than the death group (Z=-3.489, P0.001) was significantly worse than that in the non methylation group (x 2=11.140, P0.001).ACHBLF survival group PPAR- gamma expression level increased significantly with time, while the death group remained at a lower level. We evaluated PPAR- gamma mRNA level, PPAR- gamma promoter methylation for ACHBLF short-term PREPREDICTION. The area under the post value.ROC curve was 0.726 (SE 0.059,95% CI 0.611-0.841) and 0.657 (SE 0.062,95%CI 0.535-1.778). Conclusion ACHBLF patients were higher in PPAR- gamma expression compared with those of CHB patients. Starting Zi Jiaji rate decreased the expression level of.PPAR- gamma and the state of promoter methylation was closely related to the severity and prognosis of CHB. Moreover, PPAR- gamma may be of potential significance for improving the prognosis of ACHBLF by down regulation of TNF- alpha and IL-6. The methylation status and expression level of PPAR- gamma are of great value for predicting the short-term prognosis of ACHBLF.
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R575.3;R512.62

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 任黔川;彭芝蘭;譚欣;;PPARγ在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)[J];重慶醫(yī)學(xué);2009年23期

2 張乾勇;PPAR的結(jié)構(gòu)與功能及其生物學(xué)作用[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);2000年05期

3 白玉杰,牛丹,趙錦榮,張文紅,呂貫廷,閻小君;Rapid detection of PPAR_γ gene Pro12Ala polymorphism with fluorescence polarization in Chinese population[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2003年03期

4 袁平戈;PPARα的主要功能是什么[J];中華肝臟病雜志;2003年05期

5 潘光棟;PPAR-γ及其配體在人體細(xì)胞的分子研究[J];職業(yè)衛(wèi)生與病傷;2003年02期

6 曹廷兵,葉治家,彭家和,鞏燕,黃剛;人PPARγ2 cDNA的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)純化[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2004年01期

7 王剛,陳繼俊,倪沛洲;PPARα受體亞型與新藥研究[J];藥學(xué)進(jìn)展;2004年01期

8 葉平;過氧化體增殖物激活型受體(PPAR)與心血管疾病[J];中華心血管病雜志;2004年07期

9 孫曙光,周智廣;PPARγ與1型糖尿病[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊;2005年02期

10 胡桂芳,武革;PPARγ與2型糖尿病大血管病變的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2005年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 ;Genetic polymorphisms of PPAR-γ,HHEX,PTPRD,KCNQ1,and SRR affect therapeutic efficacy of Pioglitazone in Chinese Patients with type 2 diabetes[A];傳承與發(fā)展，，創(chuàng)湖南省生理科學(xué)事業(yè)的新高——湖南省生理科學(xué)會2011年度學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2011年

2 ;Dynamic analysis and ligand binding affinity investigation of PPAR mutations[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會2003年學(xué)術(shù)交流會論文摘要集[C];2003年

3 童南偉;;過氧化物酶增殖物激活受體(PPAR)a與脂質(zhì)代謝[A];全國首屆代謝綜合征的基礎(chǔ)與臨床專題學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

4 王偉銘;章慧娣;劉峰;陳佳韻;陳楠;;PPARγ活化對腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞的作用研究[A];2007年浙滬兩地腎臟病學(xué)術(shù)年會資料匯編[C];2007年

5 陳剛;林新富;梁繼興;林麗香;沈曉麗;;過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)基因多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥相關(guān)性研究[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

6 陳剛;林新富;梁繼興;林麗香;沈曉麗;;過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)基因多態(tài)性與老年男性骨質(zhì)疏松癥相關(guān)性研究[A];2008中國醫(yī)師協(xié)會內(nèi)分泌代謝科醫(yī)師分會年會論文匯編[C];2008年

7 李潔;戴愛國;胡瑞成;朱黎明;王梅芳;;PPARγ影響γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶活性及表達(dá)在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用[A];中國生理學(xué)會第23屆全國會員代表大會暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要文集[C];2010年

8 管又飛;;脂質(zhì)過氧化物體增殖物激活受體γ(PPAR γ)與糖尿病腎病[A];中華醫(yī)學(xué)會腎臟學(xué)分會2004年年會暨第二屆全國中青年腎臟病學(xué)術(shù)會議專題講座匯編[C];2004年

9 孫莉;尚進(jìn)林;梁浩;程焱;;PPAR全激動劑對小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護作用[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

10 ;Endothelial PPARγmediates anti-inflammatory actions of rosiglitazone through dissociation of NF-κB[A];中國生理學(xué)會心血管生理學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前3條

1 徐錚奎;發(fā)現(xiàn)PPAR拮抗劑[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2012年

2 曾凡新邋林敏;PPAR激動劑類抗糖尿病藥研發(fā)喜憂參半[N];中國醫(yī)藥報;2007年

3 袁松范;開發(fā)PPAR多通道激動劑須謹(jǐn)慎[N];中國醫(yī)藥報;2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉炳婷;SUMO特異性蛋白酶1調(diào)控脂肪形成的作用及分子機制[D];上海交通大學(xué);2014年

2 陳宏;巨噬細(xì)胞PPARγ對皮膚傷口愈合的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 韓晶;PPARγ在腦缺血再灌注損傷和過氧化氫損傷中的調(diào)控機制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

4 張巖;PPARα/γ信號通路在高脂性脂肪性肝炎發(fā)病機制中的作用研究[D];蘇州大學(xué);2015年

5 張鷗;阿托伐他汀對動脈粥樣硬化患者外周血中PPAR γ的作用研究及相關(guān)炎癥因子與動脈粥樣硬化關(guān)系的建模分析[D];鄭州大學(xué);2016年

6 周毅;PPARγ介導(dǎo)的抗氧化機制在血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化中作用和機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

7 滕志朋;PPARβ/δ在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的作用及其機制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

8 佟強;PPARβ/δ激活在帕金森病中的保護作用及機制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

9 王伶;高靜水壓刺激對血小板活化的影響及PPARγ的保護作用的研究[D];南昌大學(xué);2008年

10 孫晶;PPARγ1對系膜細(xì)胞外基質(zhì)生成的抑制作用及其機制[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 曹智麗;過氧化物酶增殖物激活受體α（PPARα）在大鼠酒精性肝病發(fā)生過程中的變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 宋石;miR-27a通過靶向調(diào)控PPARγ對酒精誘導(dǎo)大鼠BMSC分化的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

3 鄒佳楠;PPAR-γ在IgA腎病發(fā)生中的作用及其機理研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 李春梅;家兔PPARγ和MYF5基因多態(tài)性及其與部分經(jīng)濟性狀的關(guān)聯(lián)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

5 李曉鵬;腦膠質(zhì)瘤中PPARγ、Bcl-2基因表達(dá)水平及臨床意義[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

6 李晉福;慢病毒介導(dǎo)PPAR-γ基因?qū)︸：鄹泶癯衫w維細(xì)胞增殖、遷移、侵襲性的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

7 徐穎;EGFR/MDM2信號通過PPARγ降解途徑促進(jìn)NFκB激活[D];江蘇大學(xué);2016年

8 高家明;PPARα/Bcl2信號誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[D];江蘇大學(xué);2016年

9 冷銀芝;低劑量雙酚A通過PPARγ促進(jìn)小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

10 朱夢;妊娠期糖尿病胎盤PPARγ水平及其對新生兒體脂的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

本文編號：1966678