發(fā)布時(shí)間：2024-06-23 10:40

　　第一部分提取和純化大鼠髓核干細(xì)胞的方法比較目的:采用不同的方法所獲得的髓核干細(xì)胞的特性進(jìn)行比較和分析,進(jìn)而獲得更加高效的方法。方法:分別用兩種常用的方法(低密度培養(yǎng)法和間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基法)和兩種新方法(克隆環(huán)法和克隆環(huán)結(jié)合干細(xì)胞培養(yǎng)基法)提取和純化大鼠髓核干細(xì)胞。比較和評(píng)價(jià)采用四種方法提取和純化的髓核干細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)、間充質(zhì)干細(xì)胞表明標(biāo)志物(CD44,CD73,CD90,CD105,CD34和HLA-DR)、多系分化能力、集落形成能力和干性基因表達(dá)情況。結(jié)果:采用上述四種方法從大鼠髓核組織獲得的髓核干細(xì)胞均達(dá)到了國(guó)際細(xì)胞治療學(xué)會(huì)的標(biāo)準(zhǔn),包括貼壁生長(zhǎng)能力,間充質(zhì)干細(xì)胞表面抗體表達(dá)和多系分化能力。然而,相對(duì)其他三種方法,克隆環(huán)結(jié)合干細(xì)胞培養(yǎng)基法所獲得的髓核干細(xì)胞表明標(biāo)志物和干性基因的表達(dá)更多,集落形成能力和多系分化能力更強(qiáng)。結(jié)論:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明四種方法均可獲得髓核干細(xì)胞,且克隆環(huán)結(jié)合干細(xì)胞培養(yǎng)基法較另外三種方法更加可靠和高效。我們的研究為提取和純化髓核干細(xì)胞的方法提供了一個(gè)新的選擇。第二部分壓力經(jīng)線粒體途徑誘導(dǎo)髓核干細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究目的:研究人髓核干細(xì)胞在壓力條件下經(jīng)線粒體途徑發(fā)生凋亡,...

【文章頁(yè)數(shù)】：104 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.1倒置顯微鏡下大鼠髓核細(xì)胞(NPCs)和髓核干細(xì)胞(NPMSCs)的形態(tài)學(xué)

華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文附圖

圖1.2.髓核細(xì)胞和髓核干細(xì)胞表明標(biāo)志表達(dá)(a)CD44,(b)CD73,(c)CD90,(d)CD105,(e)CD34和（f）HLA-DR.NS代表沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，(*P<0.05,**P<0.01vs.control,#P<0.05vs.MSC-CM+CC)

圖1.2.髓核細(xì)胞和髓核干細(xì)胞表明標(biāo)志表達(dá)(a)CD44,(b)CD73,(c)CD90,(d)CD1(e)CD34和（f）HLA-DR.NS代表沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，(*P<0.05,**P<0.01vs.con#P<0.05vs.MS....

圖1.3髓核細(xì)胞和髓核干細(xì)胞的多向分化能力

圖1.3髓核細(xì)胞和髓核干細(xì)胞的多向分化能力。（a）茜素紅染色；（b）阿爾新藍(lán)染（c）油紅O染色；（d）茜素紅染色陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)圖；（e）阿爾新藍(lán)染色陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)（f）油紅O染色陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)圖。（比例尺Scalebar=50μm,*P<0.05,**P<0....

圖1.4髓核細(xì)胞和髓核干細(xì)胞的集落形成能力

圖1.4髓核細(xì)胞和髓核干細(xì)胞的集落形成能力。（a）髓核細(xì)胞；（b）低密度法；（克隆環(huán)法；（d）間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基法；（e）克隆環(huán)法結(jié)合間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基（f）集落形成率統(tǒng)計(jì)圖(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001vs.control,....

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