目的： 1.依據(jù)仿生原理制備一種新型的膠原多糖基納米HA復(fù)合骨支架材料,并與成骨細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng),檢測其細(xì)胞相容性,為其將來在骨組織工程中和臨床上的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 2.設(shè)計(jì)并構(gòu)建一套用于組織工程骨或骨組織在體外三維灌流培養(yǎng)和動態(tài)載荷生物反應(yīng)器并測試其性能,為體外組織工程骨的動態(tài)培養(yǎng)和三維條件下進(jìn)行骨細(xì)胞生物力學(xué)研究提供一種可靠的培養(yǎng)裝置與研究平臺。 3.初步研究組織工程骨在循環(huán)灌流和動態(tài)壓應(yīng)變載荷下的力學(xué)效應(yīng),從而為考察力學(xué)刺激在組織工程骨的構(gòu)建和培養(yǎng)過程中的作用機(jī)理,以及為將來進(jìn)一步從細(xì)胞和分子水平方面研究各種壓應(yīng)變載荷條件下的細(xì)胞生物學(xué)行為與作用機(jī)理提供一些實(shí)驗(yàn)參考依據(jù)。 方法： 1.稱取6.0g牛Ⅰ型膠原與600mg透明質(zhì)酸鈉(膠原與透明質(zhì)酸鈉的質(zhì)量比為10：1),用0.1%稀醋酸稀釋,在室溫下攪拌混合30min。加入碳化二亞胺[1-ethyl-3-(3-dimethyl aminopropyl)carbodiimide, EDC]和N-羥基琥珀酰亞胺(N-hydroxysuccinimide, NHS),控制pH值在4.75左右交聯(lián)反應(yīng)2h后,分別用...

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖2-2支架材料的外觀形態(tài)

圖2一3支架材料掃描電鏡觀察:(a)支架多孔結(jié)構(gòu)形貌(X30);(b)支架孔壁表面形貌(X800)

(b)(SEMx800)支架材料掃描電鏡觀察:(a)支架多孔結(jié)構(gòu)形貌(X30);(b)支架孔壁表面形貌ObservationofseaffoldsbySEM:(a)ThePorousstructuretoPograPhyofseaffo(b)ThesurfaeetoPograPh....

圖3一1倒置相差顯微鏡(xZOO)

圖3一1倒置相差顯微鏡(xZOO)Fig.3一1InvertedPhaseeontrastmieroseoPe(x200)堿性磷酸酶(ALP)染色可見細(xì)胞胞核和胞漿呈現(xiàn)出藍(lán)色反應(yīng)(如圖3一2)。圖3一ZALP染色(X200)Fig.3一2AlkalinePhosPh....

圖3一ZALP染色(X200)

3.3.23.3.3圖3一1倒置相差顯微鏡(xZOO)Fig.3一1InvertedPhaseeontrastmieroseoPe(x200)堿性磷酸酶(ALP)染色可見細(xì)胞胞核和胞漿呈現(xiàn)出藍(lán)色反應(yīng)(如圖3一2)。圖3一ZALP染色(X200)Fig.3一2Alk....

本文編號：4047040