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明膠-羥基磷灰石支架材料促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化

發(fā)布時(shí)間:2024-07-07 19:00
  目的探討共沉淀法合成的明膠-羥基磷灰石支架材料的理化性質(zhì)及其對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖分化的影響,并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該支架材料促進(jìn)大鼠顱骨缺損的骨修復(fù)。方法全骨髓貼壁法分離純化SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;對(duì)第2代細(xì)胞表面標(biāo)記分子進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析;P2代進(jìn)行礦化誘導(dǎo)21天,茜素紅染色分析細(xì)胞的成骨分化潛能;采用不同循環(huán)次數(shù)的共沉淀法制備復(fù)合羥基磷灰石的明膠載體并對(duì)材料理化表征進(jìn)行分析;采用掃描電鏡、CCK-8、死活實(shí)驗(yàn)觀察材料對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響,堿性磷酸酶定量分析材料對(duì)其成骨分化的影響。成年雄性SD大鼠12只,每組4只,隨機(jī)分成A、B、C三組。所有大鼠均在左右顱骨處去骨,造直徑為5mm,深度約為3mm的圓形骨缺損。A組左側(cè)放置r BMSCs-1HA-Gel復(fù)合物,右側(cè)為陰性空白對(duì)照組;B組組左側(cè)放置r BMSCs-Gel復(fù)合物,右側(cè)為陰性空白對(duì)照組;C組左側(cè)放置r BMSCs-1HA-Gel復(fù)合物,右側(cè)放置r BMSCs-Gel復(fù)合物。術(shù)后12周行攝CBCT,然后取材,并制作組織學(xué)切片進(jìn)行HE、Masson染色。對(duì)兩組大鼠顱骨缺損處的骨缺損修復(fù)、愈合情況進(jìn)行評(píng)價(jià)。上述所...

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 材料與設(shè)備
        2.1.2 部分材料的配制及儲(chǔ)存方法
    2.2 方法
        2.2.1 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定
        2.2.2 明膠-羥基磷灰石仿生支架材料的制備與表征
            2.2.2.1 明膠-羥基磷灰石仿生支架材料的制備
            2.2.2.2 明膠-羥基磷灰石仿生支架材料的理化檢測(cè)
            2.2.2.3 明膠-羥基磷灰石仿生支架材料的細(xì)胞相容性檢測(cè)
        2.2.3 明膠-羥基磷灰石仿生支架材料修復(fù)大鼠顱骨缺損的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究
            2.2.3.1 SD大鼠顱骨缺損模型的建立
            2.2.3.2 SD大鼠顱骨缺損模型的CBCT檢測(cè)
            2.2.3.3 SD大鼠顱骨缺損模型的HE染色和Masson染色
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)
    3.2 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面特定抗原的鑒定
    3.3 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化潛能的鑒定
    3.4 成功制備明膠-羥基磷灰石仿生支架材料
    3.5 明膠-羥基磷灰石仿生支架材料的形貌特征與理化特性
    3.6 明膠-羥基磷灰石仿生支架材料的生物相容性評(píng)價(jià)
    3.7 成功建立SD大鼠顱骨缺損模型
    3.8 CBCT 檢測(cè)
    3.9 HE 染色和 Masson 染色
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 層層自組裝技術(shù)在組織工程領(lǐng)域的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào):4003634

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