發(fā)布時(shí)間：2020-12-05 22:31

　　目的：通過(guò)靜電紡絲技術(shù)制作左旋聚乳酸/明膠（PLLA/Gelatin）三維多孔納米纖維支架，并評(píng)價(jià)該納米纖維支架與軟骨細(xì)胞的細(xì)胞相容性，對(duì)其作為軟骨組織工程支架進(jìn)行可行性分析，為組織工程技術(shù)修復(fù)軟骨病變?nèi)睋p提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:首先將PLLA和Gelatin按照質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為3:7的比例加入配置好的HFIP/DMF（98:2）溶液中，配置終濃度為10%的紡絲溶液。在特定的工作參數(shù)下（工作電壓15kV，接受距離18cm，注射泵推動(dòng)注射器內(nèi)液體的流動(dòng)速度為30μL/h，空氣濕度在60-75%左右，室溫25℃左右），使用靜電紡絲設(shè)備制備PLLA/Gelatin納米纖維支架。采用掃描電子顯微鏡（SEM）分析所制備的支架的表面形貌，直徑分布等。提取兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞并傳代，將二代軟骨細(xì)胞接種至已經(jīng)消毒好的PLLA/Gelatin支架上，然后通過(guò)DAPI熒光染色進(jìn)行觀察軟骨細(xì)胞在該支架上的粘附分布，并用二苯基四氮唑溴鹽（MTT）法檢測(cè)細(xì)胞在該支架上的增殖，并通過(guò)HE染色和阿爾新藍(lán)-核固紅雙染法觀察軟骨細(xì)胞在支架上的生長(zhǎng)情況和分泌軟骨特異性細(xì)胞外基質(zhì)的能力。結(jié)果：通過(guò)靜電紡絲技術(shù)制備的PLLA/Gelat... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

肉眼觀察Fig3.1Visualstudy

圖 3.2 掃描電鏡觀察Pig3.2 Scanning electron microscopy0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.40510152025mean：0.833stdev：0.178umberNfoibersfDiamter（μm）

90%的軟骨細(xì)胞都能完成貼壁，軟骨細(xì)胞變暗并且軟骨細(xì)胞的形態(tài)從橢圓形逐步變成多角形，并呈現(xiàn)結(jié)節(jié)狀聚集生長(zhǎng)。原代軟骨細(xì)胞傳代后，細(xì)胞多在 4-6h 左右全部完成貼壁，軟骨細(xì)胞呈多角形，傳至第二代時(shí)候，細(xì)胞大多數(shù)為三角形，呈分散生長(zhǎng)的特點(diǎn)，較少聚集形成軟骨結(jié)節(jié)。隨著傳代次數(shù)的增加，細(xì)胞增殖能力逐漸下降，細(xì)胞形態(tài)逐漸變?yōu)殚L(zhǎng)梭形，呈現(xiàn)“成纖維細(xì)胞”樣形態(tài)，甚至形成肥大的不規(guī)則形態(tài)，表現(xiàn)出明顯的去分化、肥大老化狀態(tài)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]運(yùn)動(dòng)性關(guān)節(jié)軟骨缺損支架材料的選擇及其生物相容性[J]. 王向春.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(12)
[2]醫(yī)學(xué)組織工程在骨科臨床中的應(yīng)用[J]. 呂剛.  遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2009(06)



本文編號(hào)：2900198