TLR3調(diào)節(jié)HCMV相關(guān)惡性膠質(zhì)瘤PD-L1表達(dá)的機(jī)制研究
【學(xué)位單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R739.4
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
實(shí)驗(yàn)材料和試劑
1.病理樣本和細(xì)胞病毒
2.主要實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
3.主要實(shí)驗(yàn)試劑來源及配制方法
3.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑來源
3.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑配制方法
實(shí)驗(yàn)方法
1.臨床標(biāo)本組織化學(xué)染色
2.膠質(zhì)瘤細(xì)胞感染HCMV
2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
2.2 細(xì)胞的傳代
2.3 細(xì)胞的凍存
2.4 HCMV AD169 毒株的制備
2.5 HCMV病毒的滴度的測定
2.6 HCMV感染U87、原代膠質(zhì)瘤和星形膠質(zhì)細(xì)胞后RNA提取
2.7 RNA反轉(zhuǎn)錄為DNA
2.8 熒光實(shí)時定量PCR分析HCMV感染神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞后PD-L1 的表達(dá)
3.免疫熒光技術(shù)檢測細(xì)胞感染HCMV后 PD-L1 的表達(dá)變化
3.1 細(xì)胞感染HCMV處理
4.siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞封閉TLR3 表達(dá)
4.1 小干擾RNA的構(gòu)建
4.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA
5.HCMV感染TLR3 封閉的膠質(zhì)瘤細(xì)胞后PD-L1 的表達(dá)情況
6.共培養(yǎng)檢測細(xì)胞因子
7.統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果分析
1.臨床標(biāo)本組化染色分析
2.細(xì)胞感染HCMV后 PD-L1的mRNA和蛋白表達(dá)變化
3.封閉TLR3 表達(dá)及封閉后HCMV感染細(xì)胞PD-L1 的表達(dá)變化
4.封閉TLR3 后誘導(dǎo)TGF-β分泌并抑制IL-8 分泌
討論
參考文獻(xiàn)
綜述
1.1 人巨細(xì)胞病毒
1.2 膠質(zhì)瘤與HCMV的關(guān)系
1.3 PDL1 參與免疫逃逸
1.4 HCMV感染后Toll樣受體的變化
1.5 TLR3 觸發(fā)PD-L1 上調(diào)
1.6 結(jié)論
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間研究成果
致謝
【相似文獻(xiàn)】
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本文編號:2885113
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