發(fā)布時間：2020-06-13 04:50

【摘要】：目的:國內外研究表明鎂缺乏與帕金森病的發(fā)生發(fā)展密切相關,我們的前期研究證明了L-蘇糖酸鎂(Magnesium-L-threonate,Mg T)可以改善帕金森病1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)小鼠模型行為學障礙,并減少多巴胺神經元進行性缺失,但是L-蘇糖酸鎂對MPTP小鼠的保護機制尚不明確。已知在MPTP毒性損傷機制中,炎癥和氧化應激在多巴胺神經元損傷過程中發(fā)揮重要作用,因此,本研究主要探討口服Mg T后,MPTP小鼠黑質小膠質細胞活化和i NOS的變化。方法:本實驗使用C57BL/6J小鼠(雄性,18-22g),稱重后隨機分為3組:正常對照組,MPTP模型組(腹注,連續(xù)7天,日一次,30mg/kg)和L-蘇糖酸鎂治療組(口服Mg T+腹注MPTP,Mg T 1.2m M)。分別于腹腔注射MPTP后第1天及第7天,對小鼠進行處死取腦,評價Mg T對MPTP小鼠模型的神經保護機制,主要通過三個方面進行評價:1、多巴胺神經元的形態(tài)與數目改變:通過Kluver Barrer法和酪氨酸羥化酶(Tyrosine Hydroxylase,TH)免疫染色法觀察Mg T對MPTP小鼠黑質多巴胺神經元的形態(tài)和數目的影響;2、通過離子鈣接頭蛋白(Ionized calciumbingding adaptor molecule-1,Iba-1)免疫組織化學染色探討Mg T對小膠質細胞活化的影響;3、通過誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)免疫組織化學染色,評價Mg T對MPTP小鼠黑質致密部i NOS表達的影響。結果:1、Kluver Barrer染色觀察發(fā)現(xiàn),對照組細胞核大深染,卵圓形,位于胞體中央,核仁明顯,胞體呈梭形或三角形;與對照組相比,模型組黑質神經細胞胞核染色變淺,胞體萎縮,胞漿減少;與模型組相比,Mg T治療組神經細胞數目增加,核染色較深,胞體體積增大。TH免疫組化染色提示與對照組(66±11)相比,MPTP模型組小鼠黑質致密部TH陽性神經元數目(27.3±8)明顯減少,Mg T治療組TH陽性神經元數目(54.7±4.6)與MPTP模型組相比,神經元數目顯著增加(P0.05)。2、小膠質細胞標記物Iba-1陽性細胞的活化:與對照組(0.0±0.0)相比,MPTP模型組小鼠黑質活化的Iba-1免疫陽性細胞數量(14.7±3.3)明顯增加(P0.05),細胞體積增大,突起增粗;Mg T治療組小鼠黑質區(qū)域的活化Iba-1陽性細胞數目(6.6±4.8)與MPTP組相比減少55.1%,P0.05。3、Mg T對i NOS蛋白表達影響的評價:與對照組相比,MPTP模型組小鼠黑質致密部區(qū)i NOS陽性細胞數(17.3±5.1)明顯升高,P0.01;與MPTP模型組比較,Mg T治療組小鼠黑質區(qū)i NOS陽性細胞(9.3±1.5)減少46.2%(P0.01)。結論:1、口服L-蘇糖酸鎂可以改善MPTP毒性引起的多巴胺神經元的形態(tài)改變及數目減少。2、L-蘇糖酸鎂可以降低MPTP引起的小鼠黑質小膠質細胞的活化和i NOS蛋白的表達,提示L-蘇糖酸鎂可能是通過抑制膠質細胞活化引起的炎癥反應和減少氧化應激,對MPTP小鼠的多巴胺神經元缺失產生保護作用。
【圖文】：

- 24 -圖1 小鼠腦底觀模式圖Figure1 The schematic view of a mouse’s brain tissue圖2 黑質斷面模式圖（冠狀斷Bregma - 3.08mm 至- 3.52mm）Figure2 The schematic view of substantia nigra（coronal section bregma -3.08mm to -3.52mm）

圖1 小鼠腦底觀模式圖Figure1 The schematic view of a mouse’s brain tissue圖2 黑質斷面模式圖（冠狀斷Bregma - 3.08mm 至- 3.52mm）Figure2 The schematic view of substantia nigra（coronal section bregma -3.08mm to -3.52mm）
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R742.5

【參考文獻】

相關期刊論文 前6條

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相關碩士學位論文 前2條

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本文編號：2710678