目的:橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)的病理特點(diǎn)是大量的免疫活性細(xì)胞浸潤甲狀腺組織以及機(jī)體異常識(shí)別自身抗原發(fā)生免疫應(yīng)答,導(dǎo)致甲狀腺組織腫大、纖維化和甲狀腺結(jié)構(gòu)完整性破壞,最終導(dǎo)致甲狀腺功能紊亂。本文旨在探討人髓樣相關(guān)蛋白14(Myeloid-Related Protein14,MRP14)是否通過調(diào)節(jié)趨化因子的表達(dá)參與橋本氏甲狀腺炎淋巴細(xì)胞的浸潤,以及IL-1β對(duì)MRP14的調(diào)控作用及分子機(jī)制,闡明IL-1β、MRP14在淋巴細(xì)胞浸潤機(jī)制中的作用,為HT治療提供潛在的干預(yù)靶點(diǎn)。方法:1.免疫組織化學(xué)法檢測MRP8/MRP14、MRP14在單純性甲狀腺結(jié)節(jié)組織(作為正常對(duì)照)、橋本氏甲狀腺炎組織及甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)情況。2.收集健康體檢者的血清標(biāo)本和橋本氏甲狀腺炎患者的血清標(biāo)本各20例,采用蛋白濃縮法濃縮蛋白,隨后用免疫印跡法測定血清中MRP14的水平。3.分別用不同濃度IL-1β(0、10、20、50 ng/mL),TGF-β(0、10、20、40、80 ng/mL)和TNF-α(0、1、10、20、40、60 ng/mL)處理甲狀腺濾泡上...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 橋本氏甲狀腺炎
        1.1.1 簡介
        1.1.2 流行病學(xué)
        1.1.3 免疫病理特征
        1.1.4 主要臨床表現(xiàn)
        1.1.5 研究現(xiàn)狀
    1.2 白介素-1β
        1.2.1 白介素
        1.2.2 白細(xì)胞介素-1β
        1.2.3 白細(xì)胞介素-1β與橋本氏甲狀腺炎
    1.3 MRP
        1.3.1 MRP14簡介
        1.3.2 MRP14與自身免疫疾病
    1.4 MAPK/NF-κB信號(hào)通路
    1.5 趨化因子
        1.5.1 趨化因子簡介
        1.5.2 趨化因子與自身免疫性疾病
    1.6 小結(jié)
第二章 研究目的、內(nèi)容、方法、意義及實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)
    2.1 研究目的
    2.2 研究內(nèi)容
    2.3 研究方法及技術(shù)
    2.4 研究意義
    2.5 實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)
        2.5.1 橋正常甲狀腺組織、橋本氏甲狀腺炎甲狀腺組織與乳頭狀癌甲狀腺組織中MRP8/MRP14、MRP14的表達(dá)情況
        2.5.2 正常甲狀腺患者與橋本氏甲狀腺炎患者血清中MRP14的表達(dá)及組織中IL-1β的表達(dá)
        2.5.3 MRP14對(duì)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞Nthy-ori3-1趨化因子表達(dá)的影響及其機(jī)制的研究
第三章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    3.1 臨床標(biāo)本收集
        3.1.1 橋本氏甲狀腺炎、甲狀腺乳頭狀癌及正常對(duì)照組甲狀腺組織標(biāo)本
    3.2 主要試劑和材料
        3.2.1 細(xì)胞株
        3.2.2 相關(guān)抗體及主要試劑
        3.2.3 主要儀器設(shè)備和耗材
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 Nthy-ori3-1、TPC-1細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.3.2 免疫組織化學(xué)
        3.3.3 上清蛋白的濃縮
        3.3.4 免疫印跡
        3.3.5 細(xì)胞免疫熒光
        3.3.6 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        3.3.7 提取RNA(Trizol法提取)
        3.3.8 逆轉(zhuǎn)錄和實(shí)時(shí)定量PCR
        3.3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 橋本氏甲狀腺炎患者M(jìn)RP8/14,MRP14的表達(dá)情況
        4.1.1 橋本氏甲狀腺炎組織中MRP14表達(dá)增加
        4.1.2 橋本氏甲狀腺炎患者血清中的MRP14表達(dá)明顯升高
    4.2 IL-1β誘導(dǎo)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞MRP14的表達(dá)
        4.2.1 IL-1β促進(jìn)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞MRP14的mRNA上調(diào)
        4.2.2 IL-1β促進(jìn)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞MRP14蛋白的表達(dá)
    4.3 橋本甲狀腺炎患者的甲狀腺組織中IL-1β表達(dá)量增多
    4.4 IL-1β通過MAPK和NF-κB信號(hào)通路促進(jìn)MRP14的表達(dá)
    4.5 IL-1β促進(jìn)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞趨化因子的分泌
    4.6 MRP14對(duì)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞趨化因子的分泌影響
        4.6.1 siRNA-MRP14抑制甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞趨化因子的分泌
        4.6.2 過表達(dá)MRP14(pcDNA3.1-MRP14)可以促進(jìn)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞趨化因子的分泌
第五章 討論
第六章 主要結(jié)論及展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3993215