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新生鼠皮膚表皮細(xì)胞牙源性上皮方向分化的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-02 11:53
  牙齒的發(fā)生和發(fā)育是由上皮和間充質(zhì)在一系列信號(hào)分子組成的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的精確調(diào)控下完成的。因此牙齒的生物性再生至少需要兩種細(xì)胞:上皮源性細(xì)胞和間充質(zhì)源性細(xì)胞。目前牙源性間充質(zhì)細(xì)胞的替代研究進(jìn)展較快而且取得了可喜的成績(jī),例如成體的牙髓干細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞均被證明具有形成牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體的功能。在尋找牙源性上皮細(xì)胞替代細(xì)胞方面雖然也進(jìn)行了一些研究,如誘導(dǎo)胚胎時(shí)期口腔粘膜上皮或皮膚表皮以及成體骨髓來(lái)源的細(xì)胞向成釉細(xì)胞轉(zhuǎn)化,但這些研究多建立在應(yīng)用胚胎早期組織基礎(chǔ)之上,以出生后組織為來(lái)源尋找替代細(xì)胞的研究進(jìn)展有限。尋找能夠向牙源性上皮方向分化的成體或出生后組織來(lái)源的細(xì)胞對(duì)解決牙齒再生研究中上皮源性種子細(xì)胞來(lái)源的瓶頸問(wèn)題具有重要意義。本研究著重探討出生后1d仔鼠的皮膚來(lái)源的表皮細(xì)胞向牙源性上皮方向分化以及參與牙齒發(fā)育的能力。本課題主要進(jìn)行了以下幾方面的研究:1.牙乳頭間充質(zhì)細(xì)胞對(duì)皮膚表皮細(xì)胞牙向分化的體外誘導(dǎo)研究(1)皮膚表皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)與鑒定以出生1d的SD仔鼠背部皮膚為組織來(lái)源進(jìn)行表皮細(xì)胞培養(yǎng)。采用胞外基質(zhì)的黏附法對(duì)原代培養(yǎng)的表皮細(xì)胞進(jìn)行篩選,對(duì)篩選細(xì)胞的增殖能力、細(xì)胞表型以及細(xì)胞周期的特性進(jìn)行分... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:115 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

新生鼠皮膚表皮細(xì)胞牙源性上皮方向分化的實(shí)驗(yàn)研究


DPMCs體外礦化誘導(dǎo)VonKossa染色結(jié)果大體觀察

分析結(jié)果圖,間充質(zhì)細(xì)胞,牙乳頭間充質(zhì),牙齒發(fā)育


圖 1.25 RT-PCR 分析結(jié)果3 討論牙源性間充質(zhì)細(xì)胞在發(fā)育生物學(xué)上是牙胞。在牙齒發(fā)育過(guò)程中,牙乳頭間充質(zhì)在多下,其表層的細(xì)胞分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞,并的牙本質(zhì)。而中心的細(xì)胞逐漸發(fā)生終末分化的牙髓組織[107,108]。牙胚間充質(zhì)細(xì)胞的體外培和再生研究具有重要意義。44

結(jié)果分析,表皮細(xì)胞,牙齒發(fā)育


說(shuō)如何提供一個(gè)誘導(dǎo)環(huán)境能夠盡可能多的包含細(xì)胞分化所是目前對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分化誘導(dǎo)的關(guān)鍵。目前研究干細(xì)胞多項(xiàng)分化一般都采用單因子或多因子相結(jié),例如,牙髓干細(xì)胞的成牙本質(zhì)細(xì)胞方向分化,既可以用T,也可以采用TGF-β與bFGF聯(lián)合應(yīng)用[114],還可以采用地賽β-磷酸甘油共同作用而實(shí)現(xiàn)[115]。但不管采用上述何種方式難完全模擬體內(nèi)牙齒發(fā)育當(dāng)時(shí)的多因素協(xié)同作用的復(fù)雜過(guò)成牙誘導(dǎo)方案成為實(shí)現(xiàn)非牙源性上皮牙向分化的前提。因基礎(chǔ)上,研究者不斷探索新的誘導(dǎo)模式,即采用細(xì)胞間的圖 1.29 體外誘導(dǎo) 6d 后 RT-PCR 結(jié)果分析ane 1:成釉器 Lane 2:誘導(dǎo)后表皮細(xì)胞 Lane 3:未誘導(dǎo)表皮細(xì)胞


本文編號(hào):2895260

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