帕羅西汀作為選擇性五羥色胺重?cái)z取抑制劑（SSRIs）的代表藥之一，可以顯著改善抑郁癥狀，被廣泛應(yīng)用于重性抑郁障礙（MDD）的臨床治療中。然而，由于帕羅西汀最低有效濃度的尚不明確，臨床醫(yī)師在給予帕羅西汀治療時(shí)大多采用摸索式的經(jīng)驗(yàn)療法；且臨床發(fā)現(xiàn)給予MDD患者同樣劑量的帕羅西汀，他們體內(nèi)帕羅西汀血藥濃度差異很大，臨床應(yīng)答個(gè)體差異明顯。這兩個(gè)問(wèn)題均會(huì)導(dǎo)致患者的病程遷延，造成明顯的個(gè)體療效差異。由于MDD是一種受遺傳因素和環(huán)境因素等多因素影響的疾病，帕羅西汀血藥濃度和相關(guān)基因的遺傳多態(tài)性是否影響抗抑郁療效有待進(jìn)一步的探討。本實(shí)驗(yàn)在繼承前人工作經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，考慮到腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）、膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（GDNF）與神經(jīng)元細(xì)胞的萎縮、損壞的修復(fù)密切相關(guān)，且BDNF和GDNF均是SSRIs的下游信號(hào)因子，因此遴選出BDNF、GDNF的單核苷酸多態(tài)性（SNPs），探討它們與帕羅西汀療效的相關(guān)性，篩選出與藥物療效相關(guān)的等位基因，以更好地指導(dǎo)臨床個(gè)體化用藥。目的研究漢族人群帕羅西汀的血藥濃度和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子rs6265的基因多態(tài)性、膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的21個(gè)位點(diǎn)的基因多態(tài)性與帕羅西汀臨床療效的相關(guān)性。方法2010年10月至2011年9月期間，根據(jù)診斷與統(tǒng)計(jì)手冊(cè)第四版（DSM-IV）的標(biāo)準(zhǔn)，入組中國(guó)漢族MDD患者298名作為研究對(duì)象。給予患者鹽酸帕羅西汀片（賽樂(lè)特，葛蘭素史克）20mg/天，治療周期6周。用藥前及用藥6周后，對(duì)入組患者進(jìn)行漢密爾頓抑郁17項(xiàng)量表（HAMD-17）評(píng)分。于用藥第六周末，計(jì)算HAMD減分率，進(jìn)行療效評(píng)定。同時(shí)抽取患者外周靜脈血，首先采用高效液相-熒光色譜法（HPLC-FD）測(cè)定患者體內(nèi)帕羅西汀血藥濃度，剩余全血采用SequenomMassArray系統(tǒng)進(jìn)行基因分型。結(jié)果根據(jù)298名MDD患者帕羅西汀血藥濃度數(shù)值，認(rèn)為帕羅西汀血藥濃度在一定范圍內(nèi)與其療效顯著相關(guān)。統(tǒng)計(jì)分析得出帕羅西汀的最低有效濃度為50.31ng/ml。入組研究對(duì)象使用帕羅西汀治療6周后，根據(jù)HAMD減分率，將298名患者分為有效組219人，無(wú)效組79人。在排除血藥濃度對(duì)療效影響的條件下，BDNF單核苷酸突變位點(diǎn)rs6265的基因多態(tài)性與帕羅西汀抗抑郁療效顯著相關(guān)，其中無(wú)效組攜帶G等位基因的頻率要顯著高于有效組（p <0.001），且這種顯著性差異只存在于女性中（p=0.019）。在GDNF的21個(gè)單核苷酸突變位點(diǎn)中，發(fā)現(xiàn)2個(gè)位點(diǎn)（rs2973049, rs2216711）與帕羅西汀抗抑郁療效顯著相關(guān)，其中rs2973049中無(wú)效組攜帶A等位基因的頻率要顯著高于有效組（p=0.005），且這種區(qū)別并無(wú)性別差異；在rs2216711中無(wú)效組攜帶T等位基因的頻率要顯著高于有效組（p=0.006），且這種顯著性差異只存在于女性中（p <0.001）。結(jié)論1.帕羅西汀血藥濃度在一定范圍內(nèi)與其臨床療效顯著相關(guān)，其最低有效濃度值為50.31ng/ml。2. BDNF rs6265位點(diǎn)基因型多態(tài)性與帕羅西汀療效顯著相關(guān)，攜帶G等位基因的女性患者可能對(duì)帕羅西汀臨床應(yīng)答較低，用藥療效較差。3. GDNF rs2973049位點(diǎn)基因型多態(tài)性與帕羅西汀療效顯著相關(guān)，攜帶A等位基因的患者可能對(duì)帕羅西汀臨床應(yīng)答較低，用藥療效較差。4. GDNF rs2216711位點(diǎn)基因型多態(tài)性與帕羅西汀療效顯著相關(guān)，攜帶T等位基因的女性患者可能對(duì)帕羅西汀臨床應(yīng)答較低，用藥療效較差。

 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

 

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

 

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

 

文章目錄

英文縮略詞表

摘要

Abstract

1 引言

2 材料與方法

    2.1 實(shí)驗(yàn)試劑

        2.1.1 高效液相色譜試劑

        2.1.2 DNA 提取試劑

        2.1.3 DNA 電泳用試劑

        2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)化 DNA 用試劑

        2.1.5 Sequenom MassArray 系統(tǒng)基因分型用試劑

    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器

        2.2.1 高效液相色譜器材

        2.2.2 DNA 提取器材

        2.2.3 DNA 電泳器材

        2.2.4 測(cè) OD 值儀器

        2.2.5 Sequenom MassArray 基因分型儀器

    2.3 實(shí)驗(yàn)方法

        2.3.1 研究對(duì)象

        2.3.2 帕羅西汀治療

        2.3.3 全血標(biāo)本采集

        2.3.4 血藥濃度檢測(cè)

        2.3.5 基因組 DNA 提取

        2.3.6 基因組 DNA 電泳

        2.3.7 DNA 濃度標(biāo)化

        2.3.8 Sequenom MassArray 系統(tǒng)基因分型

        2.3.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    3.1 研究對(duì)象的一般臨床特點(diǎn)

    3.2 患者帕羅西汀血藥濃度的相關(guān)分析

    3.3 基因分型結(jié)果

    3.4 BDNF 基因型與帕羅西汀療效之間的相關(guān)分析

    3.5 GDNF 基因型與帕羅西汀療效之間的相關(guān)分析

4 討論

5 結(jié)論

參考文獻(xiàn)

附錄

致謝

綜述

    參考文獻(xiàn)

 

 

參考文獻(xiàn)

 

期刊論文

 

[1]重性抑郁癥首發(fā)未用藥患者的枕葉GABA波譜研究[J]. 宋哲,黃沛鈺,邱麗華,吳杞柱,龔啟勇,張必達(dá),Heberlein Keith,謝鵬.  生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2012(02)

[2]抑郁癥神經(jīng)生化機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 王艷芬,邱家榮.  廣州醫(yī)藥. 2008(06)

[3]SHEsis,a powerful software platform for analyses of linkage disequilibrium,haplotype construction,and genetic association at polymorphism loci[J]. Yong Yong SHI1,2, Lin HE2,3,*1Bio-X Life Science Research Center, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai, China;2Institute for Nutritional Sciences, Shanghai Institute of Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai,China;3NHGG, Bio-X Center, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai, China.  Cell Research. 2005(02)