發(fā)布時間：2025-02-09 20:07

　　目的:在慢性間歇性缺氧狀態(tài)下建立心房纖維化模型后,使用高通量測序技術分析心房組織中的lncRNA表達譜,通過RT-PCR驗證深度測序結果的可靠性,并進行生物學分析,為心房纖維化的上游治療方法提供新的思路及方向。方法:(1)建立大鼠慢性間歇缺氧心房纖維化模型將40只SD大鼠隨機分為對照組(C組),間歇缺氧組(CIH組),通過對CIH組大鼠連續(xù)間歇缺氧4周建立大鼠心房纖維化模型。建模完成后檢查兩組大鼠心臟超聲,同時測量大鼠血壓、心電圖。最后獲取大鼠心房組織后通過HE染色觀察模型組與對照組心肌細胞的排列及大小;Masson染色比較對照與模型組心房組織膠原纖維含量的變化;免疫組織化學及Western bolt比較兩組纖維化相關因子(Ⅰ型膠原、 Ⅱ Ⅲ型膠原、CTGF、TGF-β1)的變化,從而驗證模型建立成功。(2)慢性間歇缺氧模型中心房組織的lncRNA表達譜研究采用高通量測序技術檢測9對心房組織中l(wèi)ncRNA的表達譜,并篩選差異表達lncRNA,繪制火山圖、聚類圖等顯示差異表達的lncRNAs。隨機選取5個差異表達的lncRNAs(NONRATT011456.2,NONRATT013797....

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、建立慢性間歇缺氧大鼠心房纖維化模型
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實驗動物和分組
        1.1.2 實驗儀器及試劑
        1.1.3 建立心房纖維化模型
        1.1.4 心臟彩超測量
        1.1.5 血壓、心電圖監(jiān)測
        1.1.6 心房組織獲取
        1.1.7 心房組織固定、脫水、包埋及切片
        1.1.8 HE染色
        1.1.9 Masson染色
        1.1.10 免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)染色
        1.1.11 Western Blot實驗
        1.1.12 統(tǒng)計學方法
    1.2 結果
        1.2.1 基礎參數(shù)及心臟超聲資料
        1.2.2 心電、血壓指標
        1.2.3 心房組織病理學變化
        1.2.4 Western blot實驗結果
    1.3 討論
    1.4 小結
二、慢性間歇缺氧模型中心房組織lncRNA的表達譜研究
    2.1 對象和方法
        2.1.1 實驗對象
        2.1.2 實驗設備及試劑
        2.1.3 LncRNA表達譜的鑒定
        2.1.4 RT-PCR實驗驗證高通量測序結果
        2.1.5 生物信息學分析
        2.1.6 構建lncRNA-miRNA-mRNA網(wǎng)絡
        2.1.7 統(tǒng)計學方法
    2.2 結果
        2.2.1 RNA質量檢測結果
        2.2.2 原始數(shù)據(jù)質量控制
        2.2.3 大鼠心房組織lncRNA一般特性
        2.2.4 差異lncRNA篩選
        2.2.5 差異表達基因的火山圖
        2.2.6 LncRNA的聚類分析
        2.2.7 RT-PCR法驗證差異表達的lncRNA
        2.2.8 GO分析
        2.2.9 KEGG結果
        2.2.10 lncRNA-miRNA-mRNA網(wǎng)絡圖
    2.3 討論
    2.4 小結
結論
論文創(chuàng)新點
論文局限性
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 LncRNA與心血管疾病的研究進展
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：4032799