發(fā)布時間：2020-11-19 20:13

　　 目的1.構(gòu)建過敏性支氣管哮喘大鼠模型。2.在哮喘大鼠第一次哮喘發(fā)作前給予藥物干預(yù)，探討葛根素對大鼠實驗性哮喘有無預(yù)防作用。3.在哮喘大鼠第一次哮喘發(fā)作后給予藥物干預(yù)，探討葛根素對大鼠實驗性哮喘有無治療作用。 方法1.將20只SPF級雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組和哮喘模型組。哮喘模型組采用OVA（ovalbumin,卵清蛋白）+氫氧化鋁凝膠致敏3次后，OVA激發(fā)1次建模，正常對照組以NS（normal saline，生理鹽水）為替代品致敏和激發(fā)。建模后通過觀察大鼠行為學(xué)改變，檢測BALF（broncho-alveolar lavage fluid，支氣管肺泡灌洗液）中炎性細(xì)胞構(gòu)成，肺組織病理學(xué)，細(xì)胞因子水平，血流變，動脈血氣，凝血四項等對模型建立成功與否進(jìn)行評價。2.將50只SPF級雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為5個實驗組，分別為正常對照組，哮喘對照組，哮喘PUE（puerarin,葛根素）預(yù)防組，哮喘PUE+DEX預(yù)防組，哮喘DEX（dexamethasone，地塞米松）預(yù)防組。除正常對照組外，其余各組大鼠分別于第0、7、14天腹腔注射OVA+氫氧化鋁凝膠混合物1ml致敏；第21天將大鼠用乙醚麻醉后氣道內(nèi)滴入1%的OVA200μl進(jìn)行激發(fā)。正常對照組：以NS為替代品進(jìn)行致敏和激發(fā)。自第15天至第20天，各組大鼠分別接受以下干預(yù)：①正常對照組：1ml NS灌胃+1ml NS腹腔注射；②哮喘對照組：1ml NS灌胃+1ml NS腹腔注射；③哮喘PUE預(yù)防組：100mg/kg葛根素灌胃+1ml NS腹腔注射；④哮喘PUE+DEX預(yù)防組：100mg/kg葛根素灌胃+0.5mg/kg地塞米松腹腔注射；⑤哮喘DEX預(yù)防組：1ml NS灌胃+0.5mg/kg地塞米松腹腔注射。第22天處死大鼠，檢測各組大鼠炎癥指標(biāo)（BALF中炎癥細(xì)胞計數(shù)、肺組織病理學(xué)、炎癥因子等）及凝血指標(biāo)（凝血四項及外源性、內(nèi)源性凝血因子活性等）的改變，評價葛根素對大鼠實驗性哮喘有無預(yù)防作用及其療效。3.將50只SPF級雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為5個實驗組，分別為正常對照組，哮喘對照組，哮喘PUE治療組，哮喘PUE+DEX治療組，哮喘DEX治療組。除正常對照組外，其余各組大鼠分別于第0、7、14天腹腔注射OVA+氫氧化鋁凝膠混合物1ml致敏；第21天將大鼠用乙醚麻醉后氣道內(nèi)滴入1%的OVA200μl進(jìn)行激發(fā)；第28天將大鼠用乙醚麻醉后氣道內(nèi)滴入0.5%的OVA200μl激發(fā)。正常對照組：以NS為替代品進(jìn)行致敏和激發(fā)。自第22天至第27天，各組大鼠分別接受以下干預(yù)：①正常對照組：1ml NS灌胃+1ml NS腹腔注射；②哮喘對照組：1ml NS灌胃+1ml NS腹腔注射；③哮喘PUE治療組：100mg/kg葛根素灌胃+1ml NS腹腔注射；④哮喘PUE+DEX治療組：100mg/kg葛根素灌胃+0.5mg/kg地塞米松腹腔注射；⑤哮喘DEX治療組：1ml NS灌胃+0.5mg/kg地塞米松腹腔注射。第29天處死大鼠，檢測各組大鼠炎癥指標(biāo)（BALF中炎癥細(xì)胞計數(shù)、肺組織病理學(xué)、炎癥因子等）及凝血指標(biāo)（凝血四項及外源性、內(nèi)源性凝血因子活性等）的改變，評價葛根素對大鼠實驗性哮喘有無治療作用及其療效。 結(jié)果1.大鼠哮喘模型觀察：與正常大鼠相比，哮喘大鼠BALF中總細(xì)胞計數(shù)及嗜酸細(xì)胞百分比(P0.01，P0.01)顯著增高，肺組織病理切片，炎癥因子(TNF-α(P0.01)、IFN-γ(P0.01))，血氣分析(PaO2(P0.05)、SaO2(P0.05))等均有顯著的改變。2.葛根素對大鼠過敏性哮喘預(yù)防作用觀察：在炎癥指標(biāo)方面，葛根素能夠有效的減輕哮喘大鼠氣道炎癥（BALF中總細(xì)胞計數(shù)及嗜酸細(xì)胞百分比(P0.01，P0.01)，肺組織病理學(xué)改變顯著減輕，血清IL-10水平升高，肺組織IL-10mRNA基因表達(dá)上調(diào)），但效果不及地塞米松；在凝血指標(biāo)方面，葛根素能夠有效的糾正哮喘大鼠凝血平衡紊亂（PT(P0.01), TT(P0.05), FIB(P0.01)；FII(P0.01), FV(P0.05), FVII(P0.05), FX(P0.05), FVIII(P0.01), FIX(P0.05),FXII(P0.05)），顯著下調(diào)FVII mRNA基因表達(dá)水平(P0.01),且效果優(yōu)于地塞米松。3.葛根素對大鼠過敏性哮喘治療作用觀察：在炎癥指標(biāo)方面，葛根素能夠有效的減輕哮喘大鼠氣道炎癥（BALF中總細(xì)胞計數(shù)及嗜酸細(xì)胞百分比(P0.01，P0.01)，肺組織病理學(xué)改變顯著減輕，血清IL-10水平升高，肺組織IL-10mRNA基因表達(dá)顯著上調(diào)(P0.01)），但效果不及地塞米松；在凝血指標(biāo)方面，葛根素能夠有效的糾正哮喘大鼠凝血平衡紊亂（PT(P0.01), TT(P0.05), FIB(P0.05)；FII(P0.05), FVII(P0.05), FX(P0.05), FVIII(P0.01), FXII(P0.01)），顯著下調(diào)FVII mRNA基因表達(dá)水平(P0.01),且效果優(yōu)于地塞米松。 結(jié)論1.本實驗成功的建立了過敏性哮喘大鼠模型；2.葛根素能夠有效地預(yù)防大鼠過敏性哮喘；3.葛根素能夠有效地治療大鼠過敏性哮喘。
【學(xué)位單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R562.25
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
研究背景
    參考文獻(xiàn)
第一部分 過敏性哮喘大鼠模型的建立
    一. 前言
    二. 實驗材料
    三. 實驗方法
    四. 實驗結(jié)果
    五. 討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 過敏性哮喘大鼠模型的優(yōu)化
    一. 前言
    二. 實驗材料
    三. 實驗方法
    四. 實驗結(jié)果
    五. 討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 葛根素對大鼠過敏性哮喘的預(yù)防作用研究
    一. 前言
    二. 實驗材料
    三. 實驗方法
    四. 實驗結(jié)果
    五. 討論
    參考文獻(xiàn)
第四部分 葛根素對大鼠過敏性哮喘的治療作用研究
    一. 前言
    二. 實驗材料
    三. 實驗方法
    四. 實驗結(jié)果
    五. 討論
    參考文獻(xiàn)
綜述：過敏性哮喘動物模型的研究現(xiàn)狀
    參考文獻(xiàn)
綜述：哮喘與凝血
    參考文獻(xiàn)
附錄：英文縮略詞表
攻讀碩士期間發(fā)表論文
致謝

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡艷;安蕓;黃鶴;郝洪軍;宿利;王月丹;劉新民;李海潮;;不同時間變應(yīng)原暴露對大鼠哮喘模型的影響[J];北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年03期

2 李睿;劉恩梅;楊錫強(qiáng);王莉佳;;不同飼養(yǎng)環(huán)境、種屬、佐劑及激發(fā)方法對小鼠哮喘炎癥的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2006年01期

3 吳奎,畢玉田,孫鯤,夏俊波,王長征;屋塵螨提取液致敏BALB/c與C57BL/6小鼠肺部變應(yīng)性炎癥模型的比較[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2005年17期

4 黎鎮(zhèn)賜;羅義;呂婧;楊陽;;血漿PAI-1、Fg與糖尿病腎病的相關(guān)性研究[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2012年15期

5 苗會,薛全福,莊逢源,胡清華,趙靜波;哮喘大鼠動物模型的制備[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1998年01期

6 李美容;王敏;;哮喘小鼠模型的建立與評價[J];臨床肺科雜志;2011年05期

7 許卓謙;劉志剛;于琨瑛;喻海瓊;丘勁;;蟑螂變應(yīng)原誘導(dǎo)小鼠肺部變應(yīng)性炎癥動物模型的研究[J];免疫學(xué)雜志;2006年05期

8 楊均萍;張亞冰;;血漿凝血-纖溶功能變化在評價急性胰腺炎病情和預(yù)后中的價值[J];檢驗醫(yī)學(xué)與臨床;2012年17期

9 槐麗蘋;劉輝;張楠;孫俊峰;王云英;魏輝;;不同粒徑氫氧化鋁佐劑對白喉類毒素免疫效果的影響[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2011年03期

10 李超乾,徐永健,鐘小寧,楊丹蕾,劉先勝,熊維寧,張珍祥;不同Th1/Th2細(xì)胞免疫應(yīng)答支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞學(xué)的變化[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年06期

本文編號：2890386