16SrRNA熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)輪狀病毒腸炎患兒腸道菌群的變化
【文章頁(yè)數(shù)】:38 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1電泳結(jié)果
95℃15s,55℃1min,72℃45s共30個(gè)循環(huán),最后以72℃10min延伸后結(jié)束。擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)PAGE電泳顯示各細(xì)菌的擴(kuò)增片段。如圖1所示! ∽1~3道為乳酸桿菌,4~6道為雙岐桿菌,7~9道為大腸桿菌,10道為標(biāo)準(zhǔn)分子量Mark圖1 電泳結(jié)果1.2.4 ....
圖2雙岐桿菌的標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)樣品通過(guò)PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化獲得。將三種細(xì)菌的標(biāo)準(zhǔn)樣品按上述條件進(jìn)行熒光定量PCR反應(yīng)作為標(biāo)準(zhǔn)曲線,見圖2(所示為雙歧桿菌標(biāo)準(zhǔn)曲線),以不同拷貝數(shù)的陽(yáng)性模板的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),以PCR反應(yīng)過(guò)程中出現(xiàn)熒光信號(hào)的初始循環(huán)數(shù)(Ct)為縱坐標(biāo)繪制而成。待測(cè)樣品同時(shí)進(jìn)行熒光定量PCR并和標(biāo)準(zhǔn)....
圖1電泳結(jié)果,其中左1一3道為乳酸桿菌,4一6道為雙歧桿菌,7一9道為大腸桿菌,10道為標(biāo)準(zhǔn)分子量Mark
在80V的電壓下電泳90分鐘使藍(lán)色指示帶走到膠孔中間偏下的位置,取下電泳膠,放入顯色液N(aH07.59,甲醛5.4ml,加蒸餾水至500m)l中顯色30分鐘后將電泳膠放置在凝膠成像儀中照相,即可顯示各細(xì)菌的擴(kuò)增片段,圖1所示。3.4熒光定量PCR反應(yīng):同樣的方法配制混合液,反應(yīng)....
圖210份標(biāo)本所得雙歧桿菌的溶解曲線,顯示產(chǎn)物的TM值為88℃一91℃
M盯k02〕bb圖1電泳結(jié)果,其中左1一3道為乳酸桿菌,4一6道為雙歧桿菌,7一9道為大腸桿菌10道為標(biāo)準(zhǔn)分子量Mark
本文編號(hào):4002971
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