第一部分氫氣及PI3K/AKt/FOXO3a信號(hào)通路在高氧致早產(chǎn)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡中的作用及機(jī)制目的:探討氫氣在高氧致早產(chǎn)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡中的作用及潛在機(jī)制。方法:將原代分離培養(yǎng)的肺泡二型上皮細(xì)胞隨機(jī)分為4組,空氣對(duì)照組、高氧組、高氧組+氫氣組、高氧+氫氣+LY294002組(PI3K/Akt信號(hào)通路特異性抑制劑),高氧+氫氣組在高氧暴露前加入氫氣(將氫氣溶解在完全培養(yǎng)基中制作成富氫培養(yǎng)基);高氧+氫氣+LY294002組在高氧暴露前同時(shí)加入氫氣和PI3K/Akt特異性抑制劑LY294002�？諝饨M置于氧體積分?jǐn)?shù)為21%的細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),其余各組置于氧體積分?jǐn)?shù)為95%密閉氧倉后放入細(xì)胞培養(yǎng)箱,各組干預(yù)24h后,采用MTS法檢測各組細(xì)胞增殖情況;流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期;Western blot法檢測P-Akt、P-FoxO3a、Foxo3a、Akt、Bim、Bax、cyclinD1和Bcl-2蛋白表達(dá)差異;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測Foxo3a、Bax、Caspase3和Bcl-2 mRNA表達(dá)差異。結(jié)果:與空氣組比較,高氧組P-Akt,P-FoxO3a,c...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1倒置相差顯微鏡下觀察AECII形態(tài)學(xué)變化(X100)

GAPDHGCAAGTTCAACGGCACAGTCTCACCCCATTTGATGTTAGCG1.2.9統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)以xs表示,采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,各組間差異比較采用單因素方差分析,其兩兩比較采用Tukey’s檢驗(yàn)。P<0.05為....

圖2MTS法檢測各組細(xì)胞增殖情況

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文phologicalobservationofAECIIunderinvertedphasecontrastm(X100).A:airculture24h;B:airculture48h增殖能力MTS實(shí)驗(yàn)檢測高氧、氫氣、L....

圖3流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡情況

21圖3流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡情況Fig.3theapoptosisofeachgroupofcellswasdetectedbyflowcytometry.A:airgroup;B:hyperoxiagroup;C:hyperoxia+hydr....

圖6各組細(xì)胞Akt、p-Akt、Foxo3a、p-Foxo3a蛋白質(zhì)水平

圖6各組細(xì)胞Akt、p-Akt、Foxo3a、p-Foxo3a蛋白質(zhì)水平Fig.6ThelevelsofAkt、p-Akt、Foxo3a、p-Foxo3aproteinofcellsineachgroup2.6氫氣和LY294002對(duì)Foxo3....

本文編號(hào)：3998196