背景X連鎖無丙種球蛋白血癥(XLA)是常見的原發(fā)性免疫缺陷病之一。其致病原因是位于X染色體上的BTK基因突變而導致B淋巴細胞分化發(fā)育的障礙。目前,尚無研究證實XLA的疾病表型與基因型之間存在明確的相關(guān)性,但是仍然不可否定XLA患者不同的BTK基因突變類型可能是影響疾病嚴重程度的因素之一。 目的通過對臨床擬診為X連鎖無丙種球蛋白血癥的患者進行BTK基因突變分析,就中國大陸XLA患者的地區(qū)分布特點、免疫表型、BTK蛋白表達水平和BTK基因突變類型及特點等方面進行探討,了解中國大陸XLA患者BTK突變的類型及特點,分析基因型和表型之間可能存在的關(guān)系。 方法 1.散射比濁法檢測臨床擬診患者血清免疫球蛋白水平,流式細胞法檢測外周血T、B淋巴細胞數(shù)量。 2.使用抗BTK單克隆抗體通過流式細胞技術(shù)分析細胞內(nèi)BTK蛋白表達水平。 3.采用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)獲得患者cDNA。使用8對不同引物分2步擴增BTK cDNA, PCR產(chǎn)物測序。突變結(jié)果通過對DNA外顯子相應部位擴增、測序證實。 結(jié)果 1.經(jīng)臨床和常規(guī)實驗室檢查被擬診為XLA的50例患者均有反復發(fā)生的細菌性感染,血清免疫球蛋白及...

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【學位級別】：碩士

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圖1RNA凝膠電泳條帶

圖1RNA凝膠電泳條帶制備:反應體系依據(jù)TaKaLa逆轉(zhuǎn)錄管中依次加入下列反應物:sx逆轉(zhuǎn)錄緩沖液隨機引物01190PrimerM一MLVRNADEPC處理水，于冰上配制。增儀中37OC15分鐘，u85“C分鐘終組DNA抽提(使用QIAGEN血液

圖1研究對象地區(qū)分布

本研究中的50例臨床擬診患者中，8例來自上海，6例來自江蘇，12例來自浙江，5例來自江西，5例來自河南，3例來自廣東，2例來自安徽，2例來自山東，2例來自福建，四川、遼寧、黑龍江和內(nèi)蒙古各1例(圖1)，1例患者無所屬區(qū)域一記錄。上海江蘇12%才叮10%25%圖1研究對象地區(qū)分布二....

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