以恥垢分枝桿菌(Mycobacterium smegmatis)為研究對(duì)象,通過在藥物平板上篩選轉(zhuǎn)錄因子超表達(dá)文庫,發(fā)現(xiàn)MSMEG₄369(Ms3469)影響恥垢分枝桿菌(M.smegmatis)對(duì)抗結(jié)核一線藥物異煙肼(Isoniazid,INH)的敏感性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)超表達(dá)Ms3469能增強(qiáng)恥垢分枝桿菌的INH抗性;基因保守結(jié)構(gòu)域分析表明Ms3469編碼一個(gè)TetR/AcrR家族的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白;凝膠遷移率阻滯實(shí)驗(yàn)和細(xì)菌單雜交實(shí)驗(yàn)證明Ms3469能夠與自身啟動(dòng)子直接特異結(jié)合。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)菌生長(zhǎng)曲線測(cè)定
    1.3 蛋白質(zhì)保守結(jié)構(gòu)域分析
    1.4 目的基因的克隆、蛋白表達(dá)和純化
    1.5 凝膠遷移率阻滯實(shí)驗(yàn)
    1.6 細(xì)菌單雜交實(shí)驗(yàn)
2 結(jié)果與分析
    2.1 Ms3469超表達(dá)菌株的INH抗性分析
    2.2 Ms3469結(jié)構(gòu)域保守性分析
    2.3 Ms3469蛋白的純化
    2.4 Ms3469蛋白的DNA結(jié)合活性分析
    2.5 Ms3469與自身啟動(dòng)子結(jié)合的特異性分析
3 討論



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