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桃樹(shù)枝條皮層響應(yīng)低溫的特異蛋白質(zhì)2-DE分析

發(fā)布時(shí)間:2024-05-24 21:08
  低溫是限制桃樹(shù)生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及地理分布的一個(gè)重要環(huán)境因子。明確桃響應(yīng)低溫脅迫的分子調(diào)控機(jī)制有可能為培育和篩選出相對(duì)抗寒的桃品系提供研究基礎(chǔ)。以抗寒性較強(qiáng)的秋燕桃為試材,將一年生休眠枝條置于-5 (CK),-15,-25℃低溫處理48 h,應(yīng)用雙向電泳技術(shù)(Two-dimensional electrophoresis, 2-DE)測(cè)定枝條皮層蛋白質(zhì)表達(dá)變化情況。結(jié)果顯示:通過(guò)質(zhì)譜鑒定發(fā)現(xiàn),有150個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)的表達(dá)豐度在低溫脅迫后發(fā)生明顯變化,豐度顯著上調(diào)的有97個(gè),豐度顯著下調(diào)的有53個(gè),通過(guò)蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)檢索成功地鑒定了其中的20個(gè)蛋白,發(fā)現(xiàn)這些蛋白質(zhì)主要參與氨基糖和核苷酸糖代謝、蔗糖和淀粉代謝、氨基酸代謝、MAPK信號(hào)通路、苯丙氨酸代謝和DNA的復(fù)制等代謝過(guò)程。利用RT-PCR驗(yàn)證了Alpha淀粉酶(M5VVU6)、葉綠素a/b結(jié)合蛋白(M5WUQ0)和環(huán)氧化物水解酶(D8L7V9)蛋白編碼的基因,隨著低溫脅迫的增加而上調(diào)表達(dá)。研究結(jié)果暗示了這些代謝途徑和3個(gè)特異蛋白可能在桃的抗寒機(jī)制中起重要作用。

【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)

【部分圖文】:

圖1不同溫度下蛋白的表達(dá)分布示意圖

圖1不同溫度下蛋白的表達(dá)分布示意圖

采用pH值4~7的非線性IPG干膠條和12.5%SDS-PAGE膠對(duì)不同溫度脅迫下樣品蛋白進(jìn)行分離,經(jīng)考馬斯亮藍(lán)染色后,獲得了分辨率和重復(fù)性較好的雙向電泳圖譜。本研究采用雙向電泳分析軟件(ImageMaster2Dplatinum5.0)比較分析了不同溫度脅迫下秋燕桃在-....


圖2相關(guān)基因的差異表達(dá)變化趨勢(shì)

圖2相關(guān)基因的差異表達(dá)變化趨勢(shì)

由于蛋白質(zhì)的翻譯經(jīng)常伴隨發(fā)生磷酸化、糖基化和可變剪切等翻譯后的修飾,一個(gè)基因有可能會(huì)調(diào)控多個(gè)蛋白,致使基因的表達(dá)量和蛋白質(zhì)的表達(dá)量不一致,出現(xiàn)蛋白質(zhì)水平和基因水平的相關(guān)變化不一致的現(xiàn)象。通過(guò)RT-PCR分析發(fā)現(xiàn)所檢測(cè)的蛋白質(zhì)有5個(gè)蛋白質(zhì)水平和基因水平表達(dá)變化一致(圖2)。以-5....



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