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產(chǎn)脂肪酶耐冷菌的分離及其對油脂降解吸附的條件優(yōu)化

發(fā)布時間:2023-02-07 08:07
  隨著社會的發(fā)展,油脂污水的污染問題不斷增多,油脂污水的主要污染物是動植物油。2020年公布的第二次全國污染源普查公告中,全國動植物油污染物排放量為30.97萬噸,僅次于總磷的排放量。我國冬季大部分地區(qū)處于低溫狀態(tài),北方地區(qū)在夏季也有低溫的情況,這導致污水水體溫度下降,使得低溫條件下油脂污水的生物處理效果不佳。耐冷菌可以在低溫、溫度波動很大的環(huán)境中進行正常的生長代謝活動,其分泌的脂肪酶在低溫時仍具有很好的降解油脂效果,因此分離具有高效去除油脂能力的耐冷菌是解決此難題的關鍵。除此之外,一些疏水性微生物對油脂有著強烈的生物吸附作用。本文從土壤中篩出一株產(chǎn)高效脂肪酶的耐冷菌:LTW-1,通過對該菌的26S r DNA D1/D2區(qū)域序列測序并進行Blast比對構建系統(tǒng)發(fā)育進化樹后,可以確定LTW-1菌屬于酵母菌屬(Saccharomyces)。該菌最適的溫度范圍在15~25℃,在15℃條件下測得脂肪酶酶活為108.9U/m L,酶活高于很多已知的低溫酵母菌。通過脂肪酶酶活的響應面實驗優(yōu)化,其最佳的產(chǎn)酶培養(yǎng)條件為:發(fā)酵時間61h、發(fā)酵溫度22℃、pH 8、牛肉浸粉12g/L、裝液量50m L/2...

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 課題來源及背景
        1.1.1 課題來源
        1.1.2 課題背景
    1.2 課題研究的目的與意義
    1.3 國內(nèi)外研究進展
        1.3.1 耐冷菌的發(fā)現(xiàn)
        1.3.2 耐冷菌的耐冷機理
        1.3.3 耐冷菌的應用
        1.3.4 油脂污水處理
        1.3.5 油脂的生物降解
        1.3.6 油脂的生物吸附
    1.4 菌株LTW-1 簡介
    1.5 課題技術路線與研究內(nèi)容
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 菌種來源
        2.1.2 實驗器材
        2.1.3 實驗所用培養(yǎng)基
        2.1.4 試驗試劑與藥品
    2.2 實驗方法
        2.2.1 耐冷菌的篩選
        2.2.2 篩選產(chǎn)高效脂肪酶耐冷菌株
        2.2.3 菌種初步鑒定
        2.2.4 菌種生長曲線的測定
        2.2.5 除油率
        2.2.6 試驗菌株發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶酶活優(yōu)化
        2.2.7 試驗菌株生物吸附油脂條件的優(yōu)化
第3章 菌種的篩選與產(chǎn)脂肪酶條件優(yōu)化
    3.1 產(chǎn)脂肪酶耐冷菌的篩選與鑒定
        3.1.1 耐冷菌的篩選
        3.1.2 脂肪酶產(chǎn)生菌的篩選
        3.1.3 菌種鑒定
        3.1.4 LTW-1 菌株的生長曲線測定
    3.2 LTW-1 產(chǎn)脂肪酶條件的單因素優(yōu)化
        3.2.1 發(fā)酵時間對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
        3.2.2 發(fā)酵溫度對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
        3.2.3 裝液量對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
        3.2.4 接種量對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
        3.2.5 初始pH對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
        3.2.6 碳源對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
        3.2.7 氮源對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
        3.2.8 金屬離子對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
        3.2.9 不同誘導劑對發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的影響
    3.3 響應面優(yōu)化LTW-1 菌株發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶結果
        3.3.1 PB實驗篩選主效應影響因子
        3.3.2 Box-Benhnken Design響應面實驗結果分析
    3.4 本章小結
第4章 生物吸附去除油脂的初步探究
    4.1 LTW-1的生物吸附現(xiàn)象
    4.2 初始接種量對吸附的影響
    4.3 裝液量對吸附的影響
    4.4 培養(yǎng)時間對吸附的影響
    4.5 吸附時間對吸附效果的影響
    4.6 本章小結
結論
參考文獻
致謝



本文編號:3736718

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