發(fā)布時(shí)間：2024-04-22 20:26

　　為探究嗜酸乳桿菌對(duì)人體腸道細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用,將pH 5.5和pH 7.5條件下培養(yǎng)的具有不同黏附特性的嗜酸乳桿菌與人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29共同培養(yǎng),測(cè)定其免疫因子的變化。通過反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)了熱休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-8、IL-10、核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)、Toll樣受體4(Toll-like receptors 4,TLR-4)和腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因的相對(duì)表達(dá)量,采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定了免疫因子IL-8、IL-10和TNF-α蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果表明,HT-29細(xì)胞與兩種pH值條件下的嗜酸乳桿菌共同培養(yǎng)后,在轉(zhuǎn)錄水平上,較空白對(duì)照組均呈現(xiàn)出Hsp70和TNF-α基因表達(dá)的極顯著上調(diào),IL-8、NF-κB和TLR-4基因表達(dá)的極顯著下調(diào)(P<0.01)。pH 7.5組與pH 5.5組對(duì)比,Hsp70、IL-10和TNF-α的基因表達(dá)顯著上調(diào),NF-κB和TLR-4的基因表達(dá)顯...

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圖1HT-29細(xì)胞RNA瓊脂糖凝膠電泳圖

為確定提取的HT-29細(xì)胞總RNA的質(zhì)量，對(duì)提取的RNA進(jìn)行2%的瓊脂糖凝膠電泳（圖1),HT-29細(xì)胞的28SRNA和18SRNA條帶較為清晰且單一，表明提取的RNA純度較高，可用于后期實(shí)驗(yàn)。2.2HT-29細(xì)胞免疫因子基因相對(duì)表達(dá)量測(cè)定結(jié)果

圖23組HT-29細(xì)胞免疫因子基因相對(duì)表達(dá)量

2.2HT-29細(xì)胞免疫因子基因相對(duì)表達(dá)量測(cè)定結(jié)果圖23組HT-29細(xì)胞免疫因子基因相對(duì)表達(dá)量

圖23組HT-29細(xì)胞免疫因子基因相對(duì)表達(dá)量

圖23組HT-29細(xì)胞免疫因子基因相對(duì)表達(dá)量如圖2所示，與空白對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)處理組Hsp70和TNF-α基因的相對(duì)表達(dá)量極顯著上調(diào)（P<0.01),IL-8、NF-κB和TLR-4基因的相對(duì)表達(dá)量極顯著下調(diào)（P<0.01），表明在共培養(yǎng)過程中L.acidophil....

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