超積累東南景天Sedum alfredii Hance)屬于陰生植物,具有生長(zhǎng)快、生物量大和易于繁殖等特點(diǎn),并且能從土壤中吸收、積累大量的Zn和Cd,但對(duì)高溫、強(qiáng)光、干旱等條件敏感,這就極大的限制了它的應(yīng)用范圍。外界環(huán)境的脅迫條件會(huì)給植物帶來(lái)氧化損傷,直接或間接地促使活性氧(ROS)的產(chǎn)生。超氧化物歧化酶是一個(gè)主要的活性氧清除劑,能夠有效的清除對(duì)機(jī)體有害的超氧自由基,在抵御自由基的損傷及植物逆境生理等方面起到重要作用。本實(shí)驗(yàn)利用農(nóng)桿菌LBA4404介導(dǎo)發(fā)菜sod基因?qū)Τe累型東南景天進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,選取新鮮的愈傷組織和葉片作為外植體,經(jīng)過長(zhǎng)期的篩選得到轉(zhuǎn)基因愈傷組織,實(shí)驗(yàn)表明在2.0mg/L6-BA和0.3mg/L NAA濃度時(shí)愈傷組織生長(zhǎng)最快；芽的分化需要一段較長(zhǎng)的時(shí)間；在2.0mg/L GA3和0.1mg/L6-BA共同作用下,莖生長(zhǎng)較粗壯；培養(yǎng)基硬度對(duì)轉(zhuǎn)基因苗生根的影響較大,培養(yǎng)基硬度越低越利于根的誘導(dǎo)和伸長(zhǎng)。PCR結(jié)果顯示來(lái)自發(fā)菜的sod基因已經(jīng)整合到超積累型東南景天的基因組中,并在東南景天的葉片組織中表達(dá),成功地建立了東南景天的遺傳轉(zhuǎn)化體系。轉(zhuǎn)基因的愈傷組織和植株分別在400mm...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

3.5.1 PCR檢測(cè)以所提取的基因組為模版（圖3),以NF-S0DF5和NF-S0DF3為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。退火溫度設(shè)為55°C。用1.0%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測(cè)，結(jié)果見圖4。野生型東南景天葉片沒有擴(kuò)出條帶,而轉(zhuǎn)基因植株和發(fā)菜的PCR結(jié)果都能看到明顯的條帶，DNA片段的大....

以所提取的基因組為模版（圖3),以NF-S0DF5和NF-S0DF3為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。退火溫度設(shè)為55°C。用1.0%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測(cè)，結(jié)果見圖4。野生型東南景天葉片沒有擴(kuò)出條帶,而轉(zhuǎn)基因植株和發(fā)菜的PCR結(jié)果都能看到明顯的條帶，DNA片段的大小約603bp,與實(shí)際....

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