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大豆GmNH23基因的抗病毒功能相關(guān)及下游信號通路基因的篩選鑒定

發(fā)布時間:2025-01-11 03:54
  大豆花葉病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是大豆的主要病原,感染大豆后出現(xiàn)葉片黃斑、卷曲和種粒斑駁等癥狀,從而影響大豆的正常生長發(fā)育并導(dǎo)致產(chǎn)量及品質(zhì)的下降。本實驗室在前期研究中發(fā)現(xiàn)了一個與煙草N基因同源的對煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和SMV均具有抗性的大豆基因GmNH23(Glycine max N Homolog 23)。GmNH23是一個典型的TN(TIR-NBS)型的R蛋白。雖然GmNH23基因的抗病毒功能已經(jīng)鑒定,但是GmNH23基因的下游信號通路及功能相關(guān)基因的研究未見報道。因此,本論文中我們篩選并研究了參與GmNH23抗病免疫反應(yīng)的大豆相關(guān)及下游基因的作用。首先我們克隆了20個功能相關(guān)基因,成功構(gòu)建了16個候選基因的RNAi重組載體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時過表達(dá)系統(tǒng)在大豆品種合豐55的葉片中瞬時沉默了這些基因的表達(dá)。GmNH23的過表達(dá)抑制SMV的侵染。通過候選基因的沉默對GmNH23介導(dǎo)的SMV抗性的變化來篩選出與GmNH23基因功能相關(guān)的基因。實驗結(jié)果顯示GmEDS1、GmSGT1-1、GmSGT1-2、GmJAR...

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1NBS-LRR家族的抗病蛋白[9]

圖1.1NBS-LRR家族的抗病蛋白[9]

)序列[9]。根據(jù)其N末端,NLR蛋白可分類為CC-NLR(CNLs)或TIR-NLR(TNLs)(如圖1.1)。研究發(fā)現(xiàn),TNL和CNL需要不同的信號途徑來觸發(fā)ETI反應(yīng)。但是,迄今為止僅發(fā)掘了較少的信號組分。為了激活免疫,大多數(shù)CNL(例如RPM1,RPS2,RPS5)都需要....


圖1.2植物中病原體誘導(dǎo)的SA生物合成的信號通路[66]

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內(nèi)蒙古大學(xué)碩士論文81.4.2SA合成代謝途徑通過對ICS1基因(AT1G74710)缺陷型的擬南芥sid2突變體進(jìn)行丁香假單胞菌感染后發(fā)現(xiàn),在擬南芥中大部分的SA都來自異分支酸,這是分支酸合酶(Isochorismatesynthase,ICS1)產(chǎn)生的關(guān)鍵中間體[63]。SA....


圖1.3高等植物的SA生物合成途徑[67]

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內(nèi)蒙古大學(xué)碩士論文9進(jìn)一步證明AtPBS3和AtEPS1是SA代謝途徑相關(guān)的基因。PBS3是GH3酰基-腺苷酸酶家族的成員[69]。擬南芥包含總共19種GH3蛋白,其特點是能夠催化L-氨基酸與茉莉酸,吲哚乙酸和羥基苯甲酸的結(jié)合。在體外PBS3具有體外;0坊铣擅富钚訹69]。....


圖1.4重組S5H/DMR6將SA轉(zhuǎn)化為2,5-DHBA

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內(nèi)蒙古大學(xué)碩士論文10圖1.4重組S5H/DMR6將SA轉(zhuǎn)化為2,5-DHBA。S5H/DMR6在體外催化生化反應(yīng)[73]Fig1.4ConversionofSAto2,5-DHBAbytherecombinantS5H/DMR6proteininvitro.Biochemica....



本文編號:4025899

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