馬鈴薯卷葉病毒屬(Polerovirus)的病毒侵染很多具有經(jīng)濟(jì)重要性的作物,引起嚴(yán)重病害。近期的研究表明,在Polerovirus中新發(fā)現(xiàn)的一個(gè)ORF所編碼的蛋白P3a是病毒長(zhǎng)距離運(yùn)動(dòng)所必需的,但其發(fā)揮作用的分子機(jī)制尚不清楚。本研究以侵染十字花科作物的蕓薹黃化病毒(Brassica yellows virus,BrYV)為研究對(duì)象,通過分子生物學(xué)和生物化學(xué)手段分析比較野生型與P3a突變體病毒侵染過程的時(shí)空差異,結(jié)合P3a及其突變體的生化特性研究,進(jìn)一步明確P3a突變對(duì)系統(tǒng)侵染的影響。研究中我們發(fā)現(xiàn)BrYVP3a缺失表達(dá)的突變體病毒AGC(將ORF3a起始的ACG突變?yōu)锳GC)無法系統(tǒng)侵染本生煙。同時(shí),BrYV3406位的胞嘧啶C突變?yōu)槟蜞奏�U導(dǎo)致P3a第18位脯氨酸P突變?yōu)榱涟彼酟時(shí)(突變體命名為BrYV^B18L),BrYV^B18L也無法系統(tǒng)侵染本生煙。并且異源互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)表明,瞬時(shí)表達(dá)的P3a能幫助AGC突變體病毒系統(tǒng)侵染本生煙,但是瞬時(shí)表達(dá)的P3a^B18L不能。這些實(shí)驗(yàn)說明P3a第18位的脯氨酸是病毒系統(tǒng)侵染所必需的。...

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圖３－３．?ＢｒＹＶ?

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圖４－１．?ＢｒＹＶ三種基因型病毒的侵染性檢測(cè)??Ｆｉｇ?４－１．?Ｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ?ｔｅｓｔ?ｏｆ?ＢｒＹＶ?ｔｈｒｅｅ?ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ??（八）農(nóng)桿菌浸潤(rùn)接種?

中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文?第四章ＢｒＹＶ三種基因型病毒Ｐ０生物學(xué)活性的初步比較??克隆后，提取質(zhì)粒ｐＴ－ＢｒＢＰＯ和ｐＴ－ＢｒＣＰＯ；質(zhì)粒經(jīng)屈〇丨和卻〇［雙酶切后，與同樣雙酶切處理??的?ｐＧＤ－３Ｆｌａｇ?載體連接，得到?ｐＧＤ－Ｐ０ＢｒＢ－３Ｆｌａｇ?和?ｐＧＤ－Ｐ０ＢｒＣ－....

圖４－５?Ｐ０ＢＭ各突變體對(duì)單鏈ＧＦＰ所誘發(fā)的局部沉默抑制表型及分子檢測(cè)??Ｆｉｇ?４－５．?Ｓｕｐ?

?Ｈ２２７Ｙ?Ｆ２２８Ｌ???ＷＢＭＳＷＭＲＭ??■ＳＫｌＫＳｌ??ｑ?＊ＧＦＰ＋???Ｐ〇？，Ａ???ｐＣＤ?Ｔ５６Ｌ?Ｖ７０Ｉ?Ｔ１５２Ｉ?ＲＩ５９Ｅ?Ｐ１６３Ｓ?Ｑ１９３Ｅ?Ｓ１９７Ｐ?Ｈ２２＾?Ｆ２２８Ｌ?ＷＴ?ＰＱ８＾??ａｎｄ－?ＧＦＴ??ＣＯＯＤＩ．?．一?，一—?....

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中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文?第四章ＢｒＹＶ三種基因型病毒Ｐ０生物學(xué)活性的初步比較??１?２?３?Ｍ?４?５?６?７??ｔｔＨｐ?Ｗｍｍ?ｗｍｍｍ?ｍｍｍｍ?＿＿鑛?ｍｍｎｍ?？?ｇｓｔ－ｐｃ＾??ｗｍｐ?？?Ｈｉｓ－ＮｂＳＫＰｌ??圖４－９?ＳｃＹＬＶ?ＰＯ與ＮｂＳＫＰｌ復(fù)合物ＧＳ....

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