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煙草分泌肽PPI的鑒定及其免疫功能分析

發(fā)布時間:2024-04-20 23:53
  卵菌(Oomycetes)是一類在形態(tài)上和真菌相似,在進化上與硅藻和褐藻等藻類距離更近的微生物。其中疫霉菌屬(Phytophthora)包含大量能夠?qū)r(nóng)田和生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生嚴重危害的病原物。寄主范圍廣泛的寄生疫霉菌(P.parasitica)可侵染1000多種植物,其侵染煙草引起的黑脛病病害是煙草生產(chǎn)中最嚴重的病害之一,能造成嚴重的經(jīng)濟損失。此外,一些對真菌有效的殺菌劑對疫霉菌無效,再加上疫霉菌的變異快,品種抗性喪失問題嚴重,導致其難防難治。因此,研究寄生疫霉菌與植物的互作機制,對于作物抗病育種以及卵菌病害的綜合防治具有重要的意義。植物在受到損傷或者病原菌侵染時,往往誘導產(chǎn)生損傷相關(guān)的分子模式DAMP(Damage associated molecular pattern),包括植物分泌肽。植物分泌肽作為響應(yīng)壓力產(chǎn)生的信號分子,能夠激活植物的免疫反應(yīng),例如活性氧(Reactive oxygen species,ROS)產(chǎn)生、抗病基因表達、MAPK(Mitogen-activated protein kinases)激活以及胼胝質(zhì)沉積等。我們利用根癌農(nóng)桿菌(Agrobacterium tim...

【文章頁數(shù)】:108 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1-2寄生疫霉菌侵染擬南芥及侵染過程顯微觀察(Wangetal.2011)

圖1-2寄生疫霉菌侵染擬南芥及侵染過程顯微觀察(Wangetal.2011)

通過建立寄生疫霉菌與模式植物擬南芥的親和互作體系,加深了大家對寄生疫霉菌侵染植物過程的認識。王燕等人發(fā)現(xiàn)寄生疫霉菌可通過產(chǎn)生附著胞侵染擬南芥的根部和葉片(圖1-2),并在侵染初期產(chǎn)生吸器定殖。在適合條件下,寄生疫霉菌在葉片表面產(chǎn)生大量的孢子囊增強侵染能力(Wangetal.2....


圖4-5NbPPI1促進flg22引起的胼胝質(zhì)沉積

圖4-5NbPPI1促進flg22引起的胼胝質(zhì)沉積

我們將1μMNbPPI1與flg22一起注射進入本氏煙葉片后,12h后進行苯胺藍染色,在顯微鏡下觀察葉片的胼胝質(zhì)沉積的情況。與預期相符,NbPPI1本身不能引起葉片中胼胝質(zhì)的積累,但是在與flg22一同注射后,可以誘導出比flg22本身引起的更為強烈的胼胝質(zhì)累積。我們也在沉默了....


圖4-6NbPPI1促進flg22引起的ROS迸發(fā)

圖4-6NbPPI1促進flg22引起的ROS迸發(fā)

植物細胞內(nèi)的活性氧往往與植物的免疫息息相關(guān),植物細胞受到損傷時,活性氧會大量積累(Gallettietal.2008)。既然NbPPI1參與植物的抗病反應(yīng),我們也很關(guān)注它對植物細胞中ROS的產(chǎn)生是否有影響。我們利用魯米諾試劑定量檢測ROS的化學發(fā)光,觀察NbPPI1對細胞內(nèi)R....


圖4-7NbPPI1抑制本氏煙煙草根的生長。實驗重復三次,結(jié)果一致。

圖4-7NbPPI1抑制本氏煙煙草根的生長。實驗重復三次,結(jié)果一致。

很多DAMPs都會參與到植物的免疫反應(yīng)中,在經(jīng)過DAMPs處理后,植物的生長會受到抑制,在不同程度上影響植物的生長和發(fā)育,如AtPIP1和AtPIP2可以抑制擬南芥的主根和側(cè)根的生長(Houetal.2014)。我們用15天的本氏煙草幼苗做了檢測。首先在培養(yǎng)皿中種植煙草種子,....



本文編號:3960113

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