沙蔥黃酮類化合物是沙蔥的主要生物活性成分之一,本課題組前期研究結(jié)果表明,沙蔥黃酮類化合物具有抗氧化、抗菌、促進(jìn)綿羊外周血淋巴細(xì)胞增殖、提高機(jī)體特異性免疫、改善羊肉風(fēng)味等功能,但是有關(guān)其抗炎活性的研究報道較少,所以本論文應(yīng)用體內(nèi)和體外炎癥模型,系統(tǒng)研究了沙蔥黃酮類化合物的抗炎活性及其分子作用機(jī)制,主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.沙蔥總黃酮不同洗脫組分抗炎活性的初步評價本試驗以小鼠腹腔巨噬細(xì)胞為研究對象,應(yīng)用CCK8法檢測沙蔥總黃酮水洗組分、35%、55%、75%乙醇洗脫組分(簡稱 AMFⅠ、AMFⅡ、AMFⅢ、AMFⅣ 組分)對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞增殖活性的影響,篩選出沙蔥總黃酮4種洗脫組分應(yīng)用于后續(xù)試驗的最佳添加濃度;應(yīng)用LPS誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞建立炎癥模型,檢測沙蔥總黃酮4種洗脫組分對炎癥模型中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的影響,評價并比較沙蔥總黃酮4種洗脫組分的抗炎活性,篩選最佳抗炎活性組分。結(jié)果顯示:與對照組相比,AMF 1在50～800μg/mL添加濃度范圍內(nèi)對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞無毒性作用(P>0.05),A.MFⅡ、AMFⅢ、AMFⅣ 在 25～100μg...

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學(xué)位級別】：博士

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圖２?ＬＰＳ的免疫識別機(jī)制示意圖??Ｆｉｇ．２?Ｉｍｍｕｎｅ?ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ＬＰＳ??

ＬＰＳ的內(nèi)層成分，將ＬＰＳ分子錨定在細(xì)菌細(xì)胞膜上，構(gòu)成革蘭氏陰性菌毒性作用的??主要成分（Ｗｅｌｌｓ?等，１９９６；?Ｈａｎｃｏｃｋ?等，２００５）?［８６８７ｉ。早在?１９９０?年，有關(guān)?ＬＰＳ?對??免疫識別的作用及機(jī)制己基本明確，如圖２所示，當(dāng)人體或動物受到革蘭氏陰性菌??....

圖３?ＴＬＲ４信號通路示意圖??Ｆｉｇ．３?ＴＬＲ４?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ??注：引自?Ｒａｈｉｍｉｆａｒｄ，２０ｌ７ｈ°１－??１．４．?

圖３?ＴＬＲ４信號通路示意圖??Ｆｉｇ．３?ＴＬＲ４?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ??注：引自?Ｒａｈｉｍｉｆａｒｄ，２０ｌ７ｈ°１－??１．４．?３對花生四烯酸代謝途徑的影響??類花生酸如前列腺素（ＰＧ）是環(huán)氧合酶（ＣＯＸ）和脂氧合酶途徑的終產(chǎn)物并參??與各種免疫應(yīng)答，環(huán)....

圖５小鼠腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果??ｉ．?Ｔｈｅ?ｃｕｌｕｒｅ?ｏｆ?ｍｏｕｓｅｅｒｉｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｈａｅ

小鼠腹腔巨噬細(xì)胞作為高度終末分化的細(xì)胞，在體外一般不繼續(xù)進(jìn)行增殖分化，所??以只能進(jìn)行原代培養(yǎng)。由倒置顯微鏡下觀察到未貼壁的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞多呈小、??圓且亮狀態(tài)，胞漿豐富（圖５－Ａ），隨著培養(yǎng)時間的增加，細(xì)胞貼壁后慢慢伸出偽足，??此時細(xì)胞多呈梭型、多角形、不規(guī)則圓形等多種形態(tài)....

圖７沙蔥總黃酮不同洗脫組分對ＬＰＳ誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞ＮＯ含量的影響（ｎ＝３）??Ｆｉｇ．７?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｅｌｕｔｉｏｎｓ?ｏｆ?Ａｌｌｉｕｍ?ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍ?Ｒｅｇｅｌ?ｔｏ?

與ＬＰＳ應(yīng)激模型組相比，沙蔥總黃酮四種洗脫組分預(yù)處理組均呈劑量依賴性??極顯著的降低由ＬＰＳ誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中ＮＯ的含量（Ｐ＜０．００１），?ＡＭＦＩ在??添加濃度為４００噸／ｍＬ時，對ＮＯ的抑制率為７４．２％?（圖７－Ａ），ＡＭＦ?ＩＩ、ＡＭＦ?ＩＩＩ??與ＡＭＦ?ＩＶ三....

本文編號：3957299