甘藍型油菜(Brassica napus L.)是世界上植物油的第二大來源,提高其產(chǎn)量一直是油菜育種的重要目標(biāo)。角果是一個十分重要的生理和生殖器官。油菜籽粒產(chǎn)量的三個構(gòu)成因子——單位面積有效角果數(shù)、每角果粒數(shù)和粒重都與角果的生長發(fā)育密切相關(guān)。角果長和粒重是影響籽粒產(chǎn)量的數(shù)量性狀,由多個QTL位點基因控制。目前,對角果長和粒重的研究仍集中在QTL定位的工作上,成功克隆到的基因還很少。在前期研究中,本實驗室利用親本S1(長角果、大粒)和S2(短角果、小粒)衍生出的重組自交系群體在A9染色體上定位到一個控制角果長和粒重的主效QTL qSLWA9。在一個殘余雜合系后代中,得到了該QTL的近等基因系。本研究中,我們實現(xiàn)了qSLWA9的精細定位并通過圖位克隆分離了該主效QTL基因BnaA9.CYP78A9,分析了BnaA9.CYP78A9的表達模式和進化來源,初步研究了基因的功能。主要研究結(jié)果如下:1.qSLWA9的精細定位。我們利用近等基因系NIL(S1)(長角果、大粒)和NIL(S2)(短角果、小粒)雜交得到的NIL-F₂分離群體用于精細定位。通過分析9,737株NIL-...

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圖1.2擬南芥角果（引自(Ferrandiz2002)）

GS5蛋白大量存在時，GS5和OsBAK1-7的互作會競爭性地抑制OsBMSBP1的互作，表明GS5通過BR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑影響粒型(Xuetal2015，有研究報道，水稻的粒長受到G-蛋白途徑的調(diào)控：異源三聚體的G基組成，一個Gα蛋白，一個Gβ蛋....

圖2.1技術(shù)路線

甘藍型油菜角果長和粒重主效QTLqSLWA9的克隆與功能分析技術(shù)路線研究技術(shù)路線如圖2.1所示。

圖2.2p3301-GUS載體示意圖

圖2.2p3301-GUS載體示意圖。Fig.2.2Theschematicdiagramofp3301-GUSvector.然后，利用引物PBnaA9.CYP78A9-GUS-F/R從重組質(zhì)粒S2-p3.9-qSLWA9-p23012.6.3.2)中擴....

圖2.4mini35S-GUS載體示意圖

為了驗證插入的3.7-kb片段中是否含有增強子作用的元件，我們將利用引物m35S-Pst-F和m35S-Hind-R擴增出minimal35S序列，并通過酶切位點PstI和HindIII插入到p3301-GUS載體的GUS報告基因前，構(gòu)建驗證增強子的....

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