家蠶絲—蛹營(yíng)養(yǎng)平衡的代謝組學(xué)分析及甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因BmGT1的功能研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-30 18:49
家蠶(Bombyx mori)是完全變態(tài)的鱗翅目昆蟲(chóng),一生經(jīng)歷卵、幼蟲(chóng)、蛹和蛾四個(gè)在形態(tài)結(jié)構(gòu)和機(jī)能上完全不同的發(fā)育階段。其中, 幼蟲(chóng)期是家蠶攝取食物進(jìn)行生長(zhǎng)的階段,所汲取的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)除了完成個(gè)體的生長(zhǎng)外,還在幼蟲(chóng)末期用來(lái)合成絲蛋白以形成蠶繭,同時(shí)為蛹體的構(gòu)建儲(chǔ)備營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);家蠶幼蟲(chóng)生民到合適的大小,遂開(kāi)始吐絲結(jié)繭,并在繭層內(nèi)完成幼蟲(chóng)向蛹的轉(zhuǎn)變。蛹期是幼蟲(chóng)過(guò)渡到成蟲(chóng)的變態(tài)階段,為生殖系統(tǒng)的發(fā)育和成蟲(chóng)器官的形成提供關(guān)鍵支持。毫無(wú)疑問(wèn),蠶蛹對(duì)于家蠶的繁衍至關(guān)重要,而繭層則主要保護(hù)蠶蛹免遭自然環(huán)境危害、微生物感染和天敵獵食,同時(shí)可以用來(lái)生產(chǎn)具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的蠶絲。一個(gè)蠶繭的繭層和蠶蛹的重量通常是平衡的,如果繭層太少,不利于蠶蛹保護(hù);而蠶蛹太小,又不利于生殖。正因?yàn)槿绱司畹倪M(jìn)化,家蠶在地球上才能生存至今。繭層和蠶蛹的平衡關(guān)系通常用繭層率來(lái)反映,該指標(biāo)是指繭層重占繭重的百分比。目前,生產(chǎn)上使用的家蠶,其繭層率分布范圍大概在10%到30%之間。盡管雜交選育可以使該性狀得到一定程度的優(yōu)化,但是很難突破30%。究其原因有以下幾個(gè)方面:繭層率性狀受到遺傳調(diào)控,其遺傳穩(wěn)定性受環(huán)境影響較小,而受品種的影響相對(duì)較...
【文章來(lái)源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:136 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在昆蟲(chóng)體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)方式
1.2 家蠶對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的汲取、代謝和利用
1.2.1 家蠶的生命周期
1.2.2 家蠶所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
1.2.3 家蠶營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝
1.2.4 家蠶營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分配及利用
1.3 家蠶若干數(shù)量性狀的遺傳相關(guān)通徑分析
1.4 提高蠶絲產(chǎn)量的方法
1.5 代謝組學(xué)研究
1.5.1 代謝組學(xué)的研究流程
1.5.2 代謝組學(xué)技術(shù)的應(yīng)用
第二章 引言
2.1 研究背景
2.2 研究目的及意義
2.3 主要研究?jī)?nèi)容
2.3.1 自然條件下家蠶絲-蛹營(yíng)養(yǎng)失衡的血淋巴代謝組學(xué)
2.3.2 人為阻礙絲合成導(dǎo)致家蠶絲-蛹營(yíng)養(yǎng)失衡的血淋巴代謝組學(xué)
2.3.3 家蠶絲素重鏈(Bmfib-H)基因敲除組脂肪體的蛋白質(zhì)組學(xué)分析
2.3.4 生物學(xué)功能驗(yàn)證
2.4 技術(shù)路線(xiàn)
第三章 家蠶絲-蛹營(yíng)養(yǎng)失衡突變體血淋巴代謝組學(xué)分析
3.1 材料與方法
3.1.1 家蠶的飼養(yǎng)和樣本準(zhǔn)備
3.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
3.1.3 主要溶液及配制
3.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 家蠶不同品種經(jīng)濟(jì)性狀調(diào)查
3.2.2 家蠶三個(gè)品種糖、脂、蛋白質(zhì)和ATP含量測(cè)定
3.2.3 家蠶血淋巴代謝指紋GC-MS分析方法的表征
3.2.4 家蠶血淋巴代謝指紋中代謝物結(jié)構(gòu)鑒定
3.2.5 家蠶Nd、Dazao和21-872血淋巴的代謝組學(xué)分析
3.3 討論
第四章 人為阻礙絲合成導(dǎo)致絲-蛹營(yíng)養(yǎng)失衡的代謝組學(xué)研究
4.1 材料與方法
4.1.1 樣本準(zhǔn)備
4.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
4.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 Bmfib-H基因敲除或摘除絲腺后家蠶經(jīng)濟(jì)性狀調(diào)查
4.2.2 Bmfib-H基因敲除或摘除絲腺血淋巴PLS-DA分析
4.2.3 Bmfib-H基因敲除或摘除絲腺血淋巴差異代謝物的篩選與分析
4.2.4 Bmfib-H基因敲除組差異代謝的相關(guān)網(wǎng)絡(luò)分析
4.2.5 三組實(shí)驗(yàn)差異代謝物的整合以及代謝途徑的分析
4.3 討論
第五章 家蠶FGKO組脂肪體的蛋白質(zhì)組學(xué)研究
5.1 材料與方法
5.1.1 家蠶的飼養(yǎng)和樣本準(zhǔn)備
5.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
5.1.3 主要溶液及配制
5.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
5.2 結(jié)果與分析
5.2.1 蛋白質(zhì)的SDS-PAGE檢測(cè)
5.2.2 蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)和分子量分析
5.2.3 蛋白質(zhì)的功能聚類(lèi)分析
5.2.4 蛋白種類(lèi)的豐度分析
5.2.5 蛋白質(zhì)的LFQ分析
5.2.7 差異蛋白質(zhì)的代謝通路分析
5.2.8 脂肪體中糖原和蛋白質(zhì)含量測(cè)定
5.3 討論
第六章 家蠶甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因BmGT1的功能探索
6.1 材料與方法
6.1.1 家蠶的飼養(yǎng)和樣本準(zhǔn)備
6.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
6.1.3 主要溶液及配制
6.1.4 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
6.2 結(jié)果與分析
6.2.1 關(guān)鍵代謝物對(duì)繭層率的影響
6.2.2 甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因及甘氨酸-絲氨酸合成途徑酶的qPCR分析
6.2.3 家蠶甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的生物信息分析
6.2.4 細(xì)胞水平添加甘氨酸或ACPC
6.2.5 細(xì)胞水平干涉家蠶甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因
6.2.6 細(xì)胞水平過(guò)量表達(dá)家蠶甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因
6.2.7 甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑處理家蠶
6.3 討論
第七章 綜合與結(jié)論
論文的創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
在讀期間發(fā)表論文及參與課題
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蒽酮-硫酸法測(cè)定靈芝破壁孢子粉中多糖含量的研究[J]. 許玲,李曄,黃晉之,宋玉娥. 海峽藥學(xué). 2009(07)
[2]代謝組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 許國(guó)旺,路鑫,楊勝利. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(06)
[3]氣相色譜衍生試劑的研究進(jìn)展[J]. 楊小玲. 中國(guó)科技信息. 2005(07)
[4]非蛋白氨基酸ACC對(duì)動(dòng)物的生理作用[J]. 朱旭祥,徐俊良. 科技通報(bào). 1991(04)
[5]家蠶若干數(shù)量性狀的遺傳通徑網(wǎng)絡(luò)[J]. 楊明觀(guān),鐘伯雄. 蠶業(yè)科學(xué). 1987(04)
[6]家蠶幼蟲(chóng)血液中海藻糖含量及其酶的活性測(cè)定[J]. 趙祖康. 蠶業(yè)科學(xué). 1983(03)
[7]植源性蛻皮激素對(duì)家蠶后部絲腺谷氨酸—丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶活力的影響(初報(bào))[J]. 李瑞,戴玉錦,朱江,金琇玨,李才蓉. 蠶業(yè)科學(xué). 1982(02)
[8]昆蟲(chóng)激素調(diào)節(jié)控制的研究——保幼激素類(lèi)似物對(duì)合成甘氨酸和丙氨酸有關(guān)酶系的調(diào)節(jié)控制[J]. 林浩,戴祝英,鄒柏祥,許廷森. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 1980(04)
[9]保幼激素類(lèi)似物對(duì)家蠶氨基酸代謝一些酶的影響[J]. 許廷森,戴祝英,莊大桓,項(xiàng)美華,鄒柏祥,林浩. 蠶業(yè)科學(xué). 1979(04)
博士論文
[1]家蠶分子圖譜的構(gòu)建及繭質(zhì)性狀的QTL定位研究[D]. 司馬楊虎.西南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
本文編號(hào):2948125
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【文章頁(yè)數(shù)】:136 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在昆蟲(chóng)體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)方式
1.2 家蠶對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的汲取、代謝和利用
1.2.1 家蠶的生命周期
1.2.2 家蠶所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
1.2.3 家蠶營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝
1.2.4 家蠶營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分配及利用
1.3 家蠶若干數(shù)量性狀的遺傳相關(guān)通徑分析
1.4 提高蠶絲產(chǎn)量的方法
1.5 代謝組學(xué)研究
1.5.1 代謝組學(xué)的研究流程
1.5.2 代謝組學(xué)技術(shù)的應(yīng)用
第二章 引言
2.1 研究背景
2.2 研究目的及意義
2.3 主要研究?jī)?nèi)容
2.3.1 自然條件下家蠶絲-蛹營(yíng)養(yǎng)失衡的血淋巴代謝組學(xué)
2.3.2 人為阻礙絲合成導(dǎo)致家蠶絲-蛹營(yíng)養(yǎng)失衡的血淋巴代謝組學(xué)
2.3.3 家蠶絲素重鏈(Bmfib-H)基因敲除組脂肪體的蛋白質(zhì)組學(xué)分析
2.3.4 生物學(xué)功能驗(yàn)證
2.4 技術(shù)路線(xiàn)
第三章 家蠶絲-蛹營(yíng)養(yǎng)失衡突變體血淋巴代謝組學(xué)分析
3.1 材料與方法
3.1.1 家蠶的飼養(yǎng)和樣本準(zhǔn)備
3.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
3.1.3 主要溶液及配制
3.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 家蠶不同品種經(jīng)濟(jì)性狀調(diào)查
3.2.2 家蠶三個(gè)品種糖、脂、蛋白質(zhì)和ATP含量測(cè)定
3.2.3 家蠶血淋巴代謝指紋GC-MS分析方法的表征
3.2.4 家蠶血淋巴代謝指紋中代謝物結(jié)構(gòu)鑒定
3.2.5 家蠶Nd、Dazao和21-872血淋巴的代謝組學(xué)分析
3.3 討論
第四章 人為阻礙絲合成導(dǎo)致絲-蛹營(yíng)養(yǎng)失衡的代謝組學(xué)研究
4.1 材料與方法
4.1.1 樣本準(zhǔn)備
4.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
4.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 Bmfib-H基因敲除或摘除絲腺后家蠶經(jīng)濟(jì)性狀調(diào)查
4.2.2 Bmfib-H基因敲除或摘除絲腺血淋巴PLS-DA分析
4.2.3 Bmfib-H基因敲除或摘除絲腺血淋巴差異代謝物的篩選與分析
4.2.4 Bmfib-H基因敲除組差異代謝的相關(guān)網(wǎng)絡(luò)分析
4.2.5 三組實(shí)驗(yàn)差異代謝物的整合以及代謝途徑的分析
4.3 討論
第五章 家蠶FGKO組脂肪體的蛋白質(zhì)組學(xué)研究
5.1 材料與方法
5.1.1 家蠶的飼養(yǎng)和樣本準(zhǔn)備
5.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
5.1.3 主要溶液及配制
5.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
5.2 結(jié)果與分析
5.2.1 蛋白質(zhì)的SDS-PAGE檢測(cè)
5.2.2 蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)和分子量分析
5.2.3 蛋白質(zhì)的功能聚類(lèi)分析
5.2.4 蛋白種類(lèi)的豐度分析
5.2.5 蛋白質(zhì)的LFQ分析
5.2.7 差異蛋白質(zhì)的代謝通路分析
5.2.8 脂肪體中糖原和蛋白質(zhì)含量測(cè)定
5.3 討論
第六章 家蠶甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因BmGT1的功能探索
6.1 材料與方法
6.1.1 家蠶的飼養(yǎng)和樣本準(zhǔn)備
6.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
6.1.3 主要溶液及配制
6.1.4 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
6.2 結(jié)果與分析
6.2.1 關(guān)鍵代謝物對(duì)繭層率的影響
6.2.2 甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因及甘氨酸-絲氨酸合成途徑酶的qPCR分析
6.2.3 家蠶甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的生物信息分析
6.2.4 細(xì)胞水平添加甘氨酸或ACPC
6.2.5 細(xì)胞水平干涉家蠶甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因
6.2.6 細(xì)胞水平過(guò)量表達(dá)家蠶甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因
6.2.7 甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑處理家蠶
6.3 討論
第七章 綜合與結(jié)論
論文的創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
在讀期間發(fā)表論文及參與課題
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]蒽酮-硫酸法測(cè)定靈芝破壁孢子粉中多糖含量的研究[J]. 許玲,李曄,黃晉之,宋玉娥. 海峽藥學(xué). 2009(07)
[2]代謝組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 許國(guó)旺,路鑫,楊勝利. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(06)
[3]氣相色譜衍生試劑的研究進(jìn)展[J]. 楊小玲. 中國(guó)科技信息. 2005(07)
[4]非蛋白氨基酸ACC對(duì)動(dòng)物的生理作用[J]. 朱旭祥,徐俊良. 科技通報(bào). 1991(04)
[5]家蠶若干數(shù)量性狀的遺傳通徑網(wǎng)絡(luò)[J]. 楊明觀(guān),鐘伯雄. 蠶業(yè)科學(xué). 1987(04)
[6]家蠶幼蟲(chóng)血液中海藻糖含量及其酶的活性測(cè)定[J]. 趙祖康. 蠶業(yè)科學(xué). 1983(03)
[7]植源性蛻皮激素對(duì)家蠶后部絲腺谷氨酸—丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶活力的影響(初報(bào))[J]. 李瑞,戴玉錦,朱江,金琇玨,李才蓉. 蠶業(yè)科學(xué). 1982(02)
[8]昆蟲(chóng)激素調(diào)節(jié)控制的研究——保幼激素類(lèi)似物對(duì)合成甘氨酸和丙氨酸有關(guān)酶系的調(diào)節(jié)控制[J]. 林浩,戴祝英,鄒柏祥,許廷森. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 1980(04)
[9]保幼激素類(lèi)似物對(duì)家蠶氨基酸代謝一些酶的影響[J]. 許廷森,戴祝英,莊大桓,項(xiàng)美華,鄒柏祥,林浩. 蠶業(yè)科學(xué). 1979(04)
博士論文
[1]家蠶分子圖譜的構(gòu)建及繭質(zhì)性狀的QTL定位研究[D]. 司馬楊虎.西南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
本文編號(hào):2948125
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