目的1.探討食管鱗癌中PI3K/AKT/m TOR信號通路對LSD1的調(diào)控作用。2.探討食管鱗癌中LSD1對mTOR信號通路的調(diào)控作用。方法1.用PI3K/AKT/m TOR信號通路抑制劑(LY294002、RAD001和PP242)作用于食管鱗癌細(xì)胞ECa109,CCK-8法檢測三種藥物對食管鱗癌細(xì)胞增殖的影響。2.分別用LY294002、RAD001和PP242處理食管鱗癌細(xì)胞ECa109,Western blot檢測PI3K/AKT/m TOR信號通路相關(guān)蛋白Raptor、Rictor、p-AKT(Ser473)、p-p70S6K及LSD1和組蛋白H3K4me2的表達(dá)情況。3.CCK-8法檢測PI3K抑制劑LY294002分別與不同濃度RAD001和PP242聯(lián)合應(yīng)用對食管鱗癌細(xì)胞增殖的影響,并計(jì)算聯(lián)用指數(shù)CI以判定聯(lián)用效果。4.嘌呤霉素篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Rictor-sh RNA的ECa109細(xì)胞,CCK-8法檢測轉(zhuǎn)染Rictor-sh RNA后PI3K/AKT/m TOR信號通路抑制劑(LY294002、RAD001和PP242)對ECa109細(xì)胞增殖影響的變化。5.Western...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文符號說明
前言
    1 食管鱗癌
    2 PI3K/AKT/m TOR 信號通路
    3 組蛋白修飾
    4 LSD1與腫瘤
    5 本文研究內(nèi)容
    6 本研究的創(chuàng)新之處
第一章 食管鱗癌中PI3K/AKT/mTOR信號通路對LSD1的調(diào)控作用研究
    引言
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.3 試劑配制
            1.1.4 細(xì)胞株
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            1.2.2 細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)
            1.2.3 Western blot實(shí)驗(yàn)
            1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2 結(jié)果
        2.1 LY294002和RAD001對食管鱗癌細(xì)胞ECa109增殖的影響
        2.2 RAD001單用及與LY294002聯(lián)用對食管鱗癌細(xì)胞ECa109的增殖抑制作用
        2.3 LY294002對食管鱗癌ECa109細(xì)胞中相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        2.4 RAD001對食管鱗癌ECa109細(xì)胞中相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    3 討論
    小結(jié)
第二章 食管鱗癌中mTORC2對LSD1的調(diào)控作用研究
    第一節(jié) mTORC2功能的探討
        引言
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料
                1.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
                1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
                1.1.3 試劑配制
            1.2 實(shí)驗(yàn)方法
                1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
                1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
                1.2.3 熒光顯微鏡下觀察和照相
                1.2.4 篩選穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株
                1.2.5 CCK-8
        2 結(jié)果
            2.1 Rictor-shRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染ECa109細(xì)胞的效率觀察
            2.2 shRNA下調(diào)Rictor表達(dá)后PI3K/AKT/mTOR信號通路抑制劑對ECa109細(xì)胞增殖影響的變化
        3 討論
        小結(jié)
    第二節(jié) 探討抑制m TORC2對LSD1的調(diào)控作用
        引言
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料
                1.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
                1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
                1.1.3 試劑配制
            1.2 實(shí)驗(yàn)方法
                1.2.1 CCK-8
        2 結(jié)果
            2.1 PP242對食管鱗癌ECa109細(xì)胞增殖的影響
            2.2 PP242對食管鱗癌ECa109細(xì)胞中相關(guān)蛋白的表達(dá)影響
            2.3 Rictor-shRNA對食管鱗癌細(xì)胞ECa109中Rictor及LSD1蛋白表達(dá)的影響
        3 討論
        小結(jié)
第三章 食管鱗癌中LSD1對mTOR信號通路的調(diào)控作用研究
    引言
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.2 試劑配制
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
            1.3.1 LSD1-siRNA轉(zhuǎn)染食管鱗癌細(xì)胞ECa109
            1.3.2 LSD1-shRNA轉(zhuǎn)染食管鱗癌細(xì)胞ECa109
            1.3.3 熒光顯微鏡下觀察和照相
    2 結(jié)果
        2.1 LSD1-siRNA干擾LSD1表達(dá)后對ECa109中mTOR通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        2.2 LSD1-shRNA轉(zhuǎn)染食管鱗癌細(xì)胞ECa109的效率觀察
        2.3 shRNA干擾ECa109細(xì)胞中LSD1的表達(dá)后對mTOR通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        2.4 新合成的LSD1抑制劑244對ECa109中mTOR通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        2.5 TCP抑制LSD1的活性對ECa109中LSD1及mTOR通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    3 討論
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述：組蛋白賴氨酸去甲基酶LSD1的生物學(xué)功能及靶向LSD1治療的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡歷
致謝



本文編號：4009508